Усовершенствование системы иммуногенетического исследования свиней на основе полуавтоматического анализа групп крови с применением мультисканирования

• Автор: Филимонов, Алексей Юрьевич
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Дубровицы
• Количество страниц: 108 с. : ил.

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1Л. Механизм протекания реакции агглютинации

1.2. Группы крови свиней

1.3. ИММУНОСЕЦИФИЧЕСКИЕ СЫВОРОТКИ ГРУПП КРОВИ.

1.4. Техника генетического маркирования свиней по эритроцитарным

антигенам.

1.5. История совершенствования техники генетического

МАРКИРОВАНИЯ

1.6. Связь ГРУПП КРОВИ С ПРОДУКТИВНЫМИ ПРИЗНАКАМИ СВИНЕЙ

1.7. Иммунологическая несовместимость.

1.8. Концентрация аллелей и генотипов.
1.9. ИММУНОГЕНЕТИЧЕСКАЯ ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ПОДТВЕРЖДЕНИЕ
ПРОИСХОЖДЕНИЯ ЖИВОТНЫХ
1 Заключение
2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ.
2.1. Материал.
2.2. Оборудование.
2.3. Реактивы.
2.4. Методы исследований.
3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Разработка режима подготовки суспензии эритроцитов
МИКРО.
3.1.1. Разработка режима центрифугирования.
3.1.2. Изучение плотности осадка эритроцитов.
3.1.3. Апробация нового режима центрифугирования для тестирования
групп крови свиней.
3.1.4. Анализ влияния способа подготовки суспензии на концентрацию эритроцитов в рабочем растворе.
3.2. Разработка нового режима раскапывания реагентов МУЛЬТИДРОП.
3.2.1. Блокировка поверхности плашки.
3.2.2. Анализ влияния концентрации суспензии эритроцитов на постановку реакции
3.3. Разработка режима автоматического чтения результатов реакций МУЛЬТИСКАНИРОВАНИЕ с применением планшетного фотометра.
3.3.1. Режим чтения реакций агглютинации.
3.3.2. Режим чтения реакции гемолиза.
3.4.Ресурсное обеспечение выполнения разработанной методики для определения групп крови свиней
3.5. Апробация методики.
3.5.1. Ливенская порода
3.5.2. Порода йоркшир канадской селекции.
3.5.3. Порода свиней ландрас.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ПРАКТИЧЕСКОЕ ПРЕДЛОЖЕНИЕ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ


Целью исследований явилась разработка высокопроизводительной системы генетического контроля происхождения свиней, основанной на выполнении полуавтоматического анализа групп крови с применением мультисканирования. Научная новизна. Впервые разработана система определения групп крови свиней, основанная на полуавтоматическом инструментальном определении групп крови в луночном формате. Предложены способы подготовки суспензии эритроцитов, раскапывания и постановки реакций. Разработан алгоритм анализа результатов реакций агглютинации и гемолиза с применением планшетного фотометра и персонального компьютера. Получено положительное решение о выдаче патента РФ. Практическая значимость. Предложенная усовершенствованная система позволяет повысить производительность и точность метода, снизить трудоемкость и добиться существенной экономии реагентов и, как следствие, снизить материальные и временные затраты. Основные положения, выносимые на защиту. Новый режим подготовки суспензии эритроцитов МИКРО, позволяющий вне зависимости от исходных образцов крови свиней инструментально получать рабочую суспензию эритроцитов. Усовершенствованная методика постановки реакций в луночном планшетном формате, позволяющая сократить временные и материальные затраты. Новый режим МУЛ1ТИСКАНИРОВАНИЕ, позволяющий осуществлять автоматическое чтение реакций агглютинации и гемолиза. Алгоритм для автоматической идентификации результатов иммуногенетического тестирования. Положительное решение о выдаче патента РФ. Апробация работы. Основные положения диссертационной работы были доложены на III международной научнопрактической конференции Современные технологические и селекционные аспекты развития животноводства России, ВИЖ, г. М.Н. Лущихина Биотехнология в мире животных и растений, , Бишкек, Киргизия в рамках проведения школпрактикумов Методы исследований в биотехнологии сельскохозяйственных животных, ВИЖ, , гг. Центра биотехнологии и молекулярной диагностики ВИЖ, ,. Публикации. По материалам диссертации опубликовано 5 научных статей, в том числе 1 статья в журнале, рекомендованном ВАК, Свиноводство, , 2. Получено положительное решение о выдаче патента РФ. Структура и объем работы. Диссертационная работа написана на 8 страницах, состоит из следующих разделов введение, обзор литературы, материал и методы исследований, результаты и обсуждение исследований, заключение, приложение, выводы, практические предложения, список литературы. Работа включает таблиц и 8 рисунков. Список литературы включает 4 источника, в том числе источников на иностранных языках. Современное свиноводство, как в нашей стране, так и за рубежом развивается и совершенствуется на основе достижений науки и техники. Ведомственная целевая программа Развитие свиноводства в Российской Федерации на период годов и до года наряду с использованием передовых энергосберегающих, ресурсосберегающих и экологически безопасных технологий предусматривает внедрение эффективных селекционногенетических и биологических методов совершенствования лучших отечественных и зарубежных пород и линий свиней. Признавая ведущую роль традиционных методов разведения, следует отметить, что использование только классической селекции уже не может обеспечить должного уровня эффективности селекционноплеменной работы Эрнст Л. К., . Маркирование признаков на уровне генотипа в дополнение к традиционным классическим методам селекции позволяет значительно повысить эффективность селекционноплеменной работы и достигнуть желаемого результата уже в течение нескольких генераций Зиновьева . . и др. Создание высокоспециализированных линий свиней, обладающих повышенными продуктивными и потребительскими качествами, в настоящее время невозможно без использования современных достижений в области генетики животных. Ведущие зарубежные компании I Ii , i , i v , vv и ряд других для совершенствования линий свиней широко используют новые подходы, основанные на применении генетических маркеров признаков продуктивности. Именно такие свиньи отвечают требованиям современного рынка. . .