Организация теломерной ДНК Allium fistulosum L.

• Автор: Фесенко, Игорь Александрович
• Шифр специальности: 03.00.23, 03.00.15
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 109 с. : ил.

Гибридизация i i на растянутую ДНК Л. Изучение локализации продуктов амплификации на хромосомах . Слотблот анализ геномной ДНК . ПЦР анализ геномной ДНК с праймерами на теломерный повтор и . Локализация продуктов амплификации праймеров и НТ1ео2 на хромосомах . Сиквенмрование продуктов ЦР праймеров и НТс1о2. Негомологичная рекомбинация в сателлитиом повторе механизм восстановления теломеры. Дрозофилалодобный механизм восстановления теломер. Рис. Рис. Модель, описывающая процесс формирования петли. Рис. Процесс генной конверсии, восстанавливающий длину теломер. Рис. Филогенетическое дерево Аспараговых v . Рис. ПЦР. Рис. Результаты одностороннего ГЦР с сателлитными праймерами. Рис. Рис. Гибридизация меченого фрагмента 5 п. Рис. Рис. Рис. Рис. Флуоресцентная i i гибридизация метки 8 п. ДНК . Рис. Рис. Рис. Рис. Рис. Рис. Рис. Рис. Гибридизация на хромосомы . Рис. Рис. Рис. Рис. Рис. Рис. Л. сера дорожки 1, 2, 3, 4 и . Рис. ДНК томата. Рис. ПЦР праймера на хромосомы . Рис. ПЦР праймера НТе1о2 на хромосомы . Рис. НТс1о2. Рис. Рис. Рис. Рис. Одним из основных элементов эукариотических хромосом являются теломеры, их физические окончания. Установлено, что теломеры защищают хромосомы от деградации нуклеазами и прогрессирующего укорачивания в результате незавершенной репликации в бконцах i, . Имеются данные о важной роли теломер в коррекции спаривания гомологичных хромосом в мейозе IIi . Недавние исследования тонкой молекулярной структуры теломер указывают на их важную роль в процессах старения организма и пролиферации клеток Егоров, . Теломеры большинства групп организмов представлены простыми повторяющимися богатыми последовательностями ДНК . Для высших растений характерен теломерный повтор арабидопсистип i , . Показано, что представители филогенетической ветви Аспараговые, к которой относится семейство Луковые, потеряли растительный теломерный повтор и взамен, на концах хромосом, содержат характерный для позвоночных повтор . Однако, в отличие от других видов растений, у лука репчатого ЛШшп сера, не обнаружены ни арабидопсистип ни характерный для позвоночных теломерный повтор . Показано, что окончания хромосом лука репчатого 1. ДНК размером пар нуклеотидов i . В настоящее время неизвестно, как Луковые защищают окончания своих хромосом и какие последовательности ДНК выполняют функцию теломер. Поэтому данные о строении и природе последовательностей ДНК составляющих теломеры . Более того, данная работа представляет практический интерес для селекции лука репчатого, так как лукбатун . V V . Данные об организации теломерной ДНК . С целью выяснения механизма восстановления теломерных окончаний хромосом у . ДНК. С помощью III и слотблот анализа провести поиск последовательностей ДНК гомологичных теломерным повторам позвоночных и арабидопсиса. Изучить организацию сателлитного теломерного повтора с помощью ПЦР, Саузернгибридизации и рестрикционного анализа. Изучить организацию и локализацию сателлитной ДНК на митотических хромосомах и растянутой ДНК с помощью I анализа. Определить наличие в структуре теломерных повторов микросателлитов и ретротранспозонов. Впервые применен комплексный подход для изучения геномной организации сателлитного терминального повтора i i 8 п. Г1ЦР, рестрикционный анализ, Саузернблоттинг и молекулярноцитогенетических 1II на митотическую и растянутую ДНК методов. Показано, что сателлитная ДИК . ДНК с перестройками в исходном сателлитном повторе 8 п. Выявлено, что в области сателлитного терминального повтора присутствуют микросателлиты и ретротранспозоны. Однако выявлено, что в терминальном гетерохроматине присутствуют фрагменты теломерного повтора . На основе полученных данных построена модель организации ДНК терминального сателлитного повтора . Луковых. Полученные данные по молекулярной структуре теломерных повторов у i i могут быть использованы для мониторинга и успешной интрогрессии генов в селекционных программах. На основании данных о нуклеотидной последовательности клонов теломерной ДНК могут быть разработаны молекулярные маркеры.