Поиск изоферментных маркеров многолетности и устойчивости к грибным болезням у ржи (Secale L. )

• Автор: Забродина, Марина Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.23, 03.00.15
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 119 с. : ил

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ .
ГЛАВА 1. МАРКЕРЫ КАК БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИЙ ИНСТРУМЕНТ В СЕЛЕКЦИИ РАСТЕНИЙ ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Молекулярные маркеры в селекции.

1.2. Изофермеггиыс маркеры генов и признаков.

1.3. Использование дикорастущих сородичей для создания доноров

атрономически ценных генов и признаков для улучшения культурных форм сельскохозяйственных растений.

1.4. оиск молекулярных маркеров агрономически важных генов и

признаков у ржи

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Формы ржи

2.2. Выращивание растений
2.3. Получение белковых экстрактов
2.4. Разделение белков электрофорезом в ПААГ
2.5. Обнаружение специфической ферментативной активности
2.6. Фиксация и хранение гелей
2.7. Интерпретация изоферментиых спектров.
2.8. Кластерный анализ
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Гснстичсская идентификация изо ферментных маркеров у ржи.
3.1.1. Органная специфика изоферментов у ржи.
3.1.2. Генегический полиморфизм изоферментов у ржи.
3.2. Аллели изофсрмснтов как маркеры признаков устойчивости к
неблагоприятным факторам внешней среды
3.2.1. Вндоспецифичные аллели.
3.2.2. Изменение аллельных частот при отборе на зимостойкость.
3.2.3. Изменение аллельных частот при отюре на устойчивость к рибньм болезням.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Но многие признаки строения и химического состава растений являются полигонными, что резко ограничивает их использование в качестве генетических маркеров. Кроме того, выбор морфологических признаков отраничен, они нестабильны, а их проявление нередко сильно зависит условий развития организма. ДНК решающим образом изменило современные селекцию и семеноводство растений. Начиная с х гг использование белковых признаков главным образом, запасных белков и изоферментов значительно расширило возможности анализа генетического полиморфизма и генетического маркирования растений i i. Глазко. Созинов, Конарев. Белковые признаки в меньшей мерс, чем морфологические, подвержены фенотипической изменчивости, поскольку белок является первичным продуктом гена. Белками может быть маркирована любая генетическая система, так как белок обязательный продукт генетических систем клетки и только через нею идет реализация генетической информации в морфогенезе. Белок одновременно может быть маркером генетической системы, хромосомы или генома. Белковые маркеры позволяют болсс точно идентифицировать генные локусы и избежать проблем, связанных с влиянием других локусов. Белковые признаки наследуются кодоминактно, что позволяет анализировать гибридные популяции уже в первом поколении. Существует два основных подхода к созданию белковых маркеров. Один из них основан на использовании антигенной специфичности белка это иммунохнмнческие, или серологические маркеры. Они хорошо отражают биоло Принадлежность к виду, роду, на этом основана идентификация вида и генома растений. Другой основан на анализе спектра компонентов множественных генетически полиморфных белков электрофоретические маркеры. В основе этих методов лежат физикохимические свойства белка заряд, масса, форма. Для идентификации генома широко используются видоспецифичные белкнангнгены. Для сорговой идентификации и проблем, связанных с изменчивостью внутри вида и популяций, необходимы генетически полиморфные белковые системы, в которых полиморфизм обусловлен аллельной изменчивостью. По спектру компонентов можно различать генотипы, идентифицировать сорта, биотипы и линии. Развитие методов молекулярной генетики в последнее десятилетие привело к появлению нового класса молекулярных маркеров фрагментов ДНК, соответствующих нуклеотидным последовательностям, которые входят непосредственно в структуру агрономически важного гена или фланкируют этот ген. Число ДНКмаркеров во много раз превосходит потенциал иэоферментов или запасных белков. В отличие от запасных белков, проявление таких молекулярных маркеров нейтрально по отношению к фенотипу. В отличие от всех запасных белков и многих изоферментов, ДНКмарксры не является тканеспецифнчными и их можно обнаружить на любой стадии развития растений. Существует два основных вида ДНКмаркеров рсстриктазные фрагменты и фрагменты, полученные с помощью полимеразной цепной реакции. Ресгрикгазиые фрагменты. Для анализа полиморфизма но длине рестриктазных фрагментов ii i, ДНК разрезается специфичными бактериальными ферментами рестрнктазамн. Ресгрнктазныс фрагменты разделяют электрофорезом в агарозе, переносят на нейлоновую мембрану с помощью Саузсрнблотгинга. ДНК размером в 0 оснований и затем анализируют различия в размерах фрагментов но положению полос на радиоавтографах. В качестве зондов пользуются специально отобранными клонами уникальных и редко повторяющихся последовательностей ДИК. В отличие от морфологических маркеров и подобно белковым маркерам. маркеры кодоминантны. I. . Эти маркеры непосредственно идентифицируют изменения в последовательности ДНК. Подобно белковым маркерам, большинство маркеров кодоминалтно. локусы могут нести множественные до 5, легко различимые аллели. анализ позволяет выявлял, паследствептше особенности отдельных организмов и, подобно морфолоптческим признакам и изоферментам, может быть использован в качестве генетических маркеров для анализа расщепления в потомстве от скрещивания и локализации генов.