Разработка тест-систем для идентификации и определения антибиотикочувствительности возбудителей микоплазмоза : Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum

• Автор: Рока Вильчес Вашингтон
• Шифр специальности: 03.00.23, 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 131 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

I 1ИСОК СОКРАЩЕ1 ГИЙ

ВВЕДЕНИЕ.

1 АНАЛИТИЧЕСКИЙ ОБЗОР

1.1 Систематика Микоплазм

1.2 Семейство .

1.2.1 Морфология микоплазм.

1.2.2 Чувствительность микоплазм к физическим и химическим факторам

1.2.3 Биохимические свойства урогенитальных микоплазм .

1.2.4 Культуральные свойства.

1.2.5 Антигенная структура.

1.3 Микоплазмозы человека
1.3.1 Микоплазмы, инфицирующие человека .
1.3.1.1 i
1.3.1.2
1.3.1.3 ii.
1.3.1.4 i.
1.3.2 Факторы патогенности.
1.3.3 Патогенез
1.3.4 Эпидемиология
1.3.5 Клинические проявления.
1.3.5.1 Здоровых женщин
1.3.5.2 Микоплазмоз беременных.
1.3.6 Лечение
1.4 Чувствительность микоплазм к антибиотикам. Резистентность .
1.4.1 Критерии для определения чувствительности ш уусЛ
1.4.1.1 Клиническая эффективность
1.4.1.2 Уровень антибиотика в сыворотке крови
1.4.1.3 Изменение чувствительности у микроорганизмов одного вида
1.4.2 Механизмы резистентности.
1.4.3 Методы определения чувствительности Чп уИго
1.4.3.1 Методы диффузии
1.4.3.2 Методы разведения
1.5 Классификация антибиотиков.
1.5.1 Группа тетрациклинов.
1.5.2 Группа макролидов
1.5.3 Группа хинолоновфторхинолонов.
1.5.4 Группа линкозамидов
1.5.5 Группа аминогликозидов.
1.5.6 Чувствительность антибиотиков разных классов к урогенитальным микоплазмам.
1.6 Лабораторная диагностика.
1.6.1 Бактериологические методы диагностики
1.6.2 Серологические методы
1.6.3 Методы молекулярной биологии.
1.7 Сравнение методов анализа
2 ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАИЯ
2.1 Объекты исследования.
2.2 Микробиологические методы исследования.
2.3 Физикохимические методы исследования
2.4 Вспомогательные материалы, используемые при исследовании.
3 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.
3.1 Усовершенствование жидкой питательной среды МИКОПЛАЗМА
3.1.1 Подбор системы индикаторов.
3.1.2 Определение точки эквивалентности выбранной
смеси индикаторов
3.1.3 Поиск и определение антибиотиков для подавления роста посторонней микрофлоры
3.2 Определение минимальной подавляющей концентрации МПК.
3.2.1 Приготовление жидких питательных сред МИКОПЛАЗМА и УРЕАПЛАЗМА.
3.2.2 Определение МПК для М. ii.
3.2.3 Определение МПК для .i
3.2.4 Разработка Тестсистемы для определения антибиотикочувствительности к возбудителям урогенительных микоплазмозов
3.3 Сравнительная оценка эффективности разработанной Тестсистемы
4 РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ
4.1 Результаты по усовершенствованию жидкой питательной среды МИКОПЛАЗМА.
4.2 Результаты по определению минимальной подавляющей концентрации МПК
4.3 Результаты по апробации разработанной ТестСистемы
5ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Проведение сравнительной оценки эффективности разработанной Тестсистемы для идентификации и определения антибиотикочувствительности возбудителей урогенитальных микоплазмозов ii и i при сравнении с зарубежным аналогам. Микоплазмы широко распространены в природе. Миниатюрность микоплазм определяет ограниченность их биохимических возможностей и, как следствие, зависимость микоплазм от высших организмов. В процессе эволюции микоплазмы приспособились к тесному сосуществованию с высшими эукариотами. Микоплазмы являются паразитами человека, млекопитающих, рептилий, рыб, членистоногих и растений. Перечень организмов, известных в качестве хозяев микоплазм, постоянно пополняется, при этом растет и число описанных видов микоплазм. К настоящему времени известно более 0 представителей класса i . Представители класса i микоплазмы являются самыми малыми из ныне известных прокариот, способных к самовоспроизведению. В самом названии таксона i мягкий, кожа отражена характерная черта этих микроорганизмов отсутствие ригидной клеточной стенки. В отличие от фазовых вариантов бактерий мутантных форм с характерными структурными нарушениями пептидогликанового каркаса клеточной стенки микоплазмы вообще не синтезируют биохимических предшественников пептидогликана , , , , , например, мурамовую или диаминопимелиновую кислоту. Функции клеточной стенки у микоплазм выполняет трехслойная цитоплазматическая мембрана нуждаются в холестерине и прочих липидных интермедиатах для синтеза компонентов мембраны. Отсутствие клеточной стенки определяет непостоянство и многообразие очертаний их клеток, неустойчивость быстрый лизис при осмотическом шоке, действии детергентов, этанола и специфичных антител в сочетании с комплементом. С отсутствием клеточной стенки связано и безразличие микоплазм к пенициллину, а также его аналогам, действие которых состоит в подавлении синтеза компонентов клеточной стенки бактерий . Геном у микоплазм кольцевидный, реплицируется полуконсервативным путем. Обычно микоплазмы размножаются бинарным делением, подобно большинству бактерий, особенно после образования мелких кокковидных образований элементарные тельца в нитевидных структурах. Также способны к почкованию и сегментации. Включают подвижные и неподвижные виды, грамотрицательны лучше окрашиваются по РомановскомуГимзе нуждаются в стеролах и нативном белке. На плотных средах образуют характерные мелкие колонии с приподнятым центром яичница глазунья, имеющие тенденцию врастать в среду морфология колоний достаточно специфична на поверхности располагаются крупные, часто вакуолизированные клетки, в глубине мелкие оптически плотные организмы , , , , , , . Микоплазмы вызывают адсорбцию, агглютинацию и лизис эритроцитов. У человека выделяют представителей родов , , , включающих патогенные и сапрофитные виды. В частности, человек естественный хозяин видов микоплазм М , М. М. ii, М. М. ii М. М. М. М. i М. М. , М. М. ivi. А также представители других родов iii, . i 2, . Современная систематика относит представителей семейства к классу i объединяющему микоплазмы, ахолеплазмы, спироплазмы, анаэроплазмы и уреаплазмы , . Микоплазмы находятся на уровне бактерий в царстве . Царство разделяется на два типа i и i. В последнем имеются 3 класса i, ii и i. В классе i имеется только один порядок . В порядке имеются семейства , , i и . Медицинское значение имеет только семейство род виды М. М. i, М. вид . Систематика микоплазм изображена на рисунке 1. Вообще род включает около 0 видов, а в роду насчитывается только 3 вида. К микоплазмам, вызывающим поражение мочеполового тракта относятся виды М. М. ii, . Рисунок 1.