Актомиозин из равдомиосарком и генетическая регуляция цитодифференцировки

• Автор: Матвеев, Владимир Владимирович
• Шифр специальности: 03.00.17
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1983
• Место защиты: Ленинград
• Количество страниц: 111 c. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ. ОПУХОЛИ, АКТОМИОЗИН И ЦИТОДЙФФЕРЕНЦИРОВКА. .

Цитодифференцировка.

Актомиозин.

Опухоли . . . . . II

ГЛАВА I. АКГОЮЮЗИНОВЫЕ ПРЕПАРАТЫ, ПОЛУЧЕННЫЕ ИЗ НИЗКО ДИФФЕРЕНЦИРОВАННОЙ РАБДОМИОСАРКОМЫ С ПОМОЩЬЮ ТРАДИЦИОННЫХ МЕТОДОВ МЫШЕЧНОЙ
БИОХИМИИ.

Материалы и методы.

Результаты и обсуждение

ГЛАВА 2. МЕТОД ВЫДЕЛЕНИЯ АКТ0МИИНА ИЗ НИЗКОДИФФЕРЕНЦИРОВАННЫХ РАБДОМИОСАРКОМ

Материалы и методы.

Результаты.
Критерий степени чистоты опухолевого
актомиозина.
Факторы, влияющие на содержание примесей в
препаратах опухолевого актомиозина
Обсуждение.
Проблемы выделения актомиозина из низкодифференцированных рабдомиосарком
Возможные подходы к получению опухолевого экстракта, содержащего большое количество актомиозина и минимальную примесь хроматина. .
Условия, препятствующие экстракции хроматина и благоприятные для экстракции актомиозина при
0.3 0.5, 7.0
Стр.
Гомогенизация.
Растворы для гомогенизации и отмывка
гомогената
Экстракция актомиозина.
Локализация опухолевого миозина
Возможность применения метода 5 для выделения актомиозина из клеток, сходных с клетками А7.
ГЛАВА 3. АКТОМИОЗИН ИЗ РАБДОМИОСАРКОМ.
Материалы и методы
Результаты
ДСНэлектрофорез
Мэлектрофорез.
Соотношения концентраций легких цепей миозина в опухолевых и скелетномышечных актомиозиновых препаратах.
Активность Са АТФазы.
Синтетические миозиновые филаменты
Обсуждение
Электрофорез.
Соотношения концентраций миозиновых легких
АТФаза и филаменты .
ГЛАВА 4. СОДЕРЖАНИЕ МИОЗИНА И АНГИНА В НИЗКОДИФФЕРЕНЦИРОВАННОЙ РАБДОМИОСАРКОМЕ
Материалы и методы
Результаты
Обсуждение.
Стр.
ГЛАВА 5. ОСНОВНЫЕ ИТОГИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОСТАВА СОКРАТИТЕЛЬНЫХ
БЕЛКОВ РАБДОМИОСАРКОМ.
ГЛАВА б. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ СВЕДЕНИЯ, СЛЕДУЮЩИЕ ИЗ ДАННЫХ О
СОСТАВЕ ОПУХОЛЕВЫХ БЕЛКОВ.
Диагностика рабдомиосарком
Определение тканевого типа клеток, не имеющих выраженных морфологических тканеспецифичных
признаков
Индивидуальные характеристики линий опухолевых
и нормальных клеток i vi
Метод исследования многокомпонентных субклеточных элементов.
ВЫВОДЫ
ЛИТЕРАТУРА


Рассмотрим предварительно ее важнейшие элементы опухоли, белки, суждения о регуляции генной экспрессии и цитодифференцировки. В основе процесса цитодифференцировки лежит, как принято считать, регуляция генной экспрессии. Вследствие этой регуляции изменяется состав клеточных белков. Разнообразие таких изменений, включающее появление, исчезновение, увеличение или уменьшение содержания отдельных полипептидов и их групп ,9,3,7 свидетельствует о разнообразии актов регуляции генной экспрессии, которые можно систематизировать следующим образом. Кратковременные изменения генной экспрессии и координированные, и некоординированные. Долговременные изменения генной экспрессии и координированные, и не координированные. Для осуществления большого количества различных регуляторных актов в клетках должны существовать один или несколько полифункциональных или большое количество монофункциональных регуляторных элементов, различающихся по структуре и воздействию на генную экспрессию. Для обнаружения и исследования значительного количества различных регуляторных элементов необходимо проанализировать дифференцировочные изменения в такой группе генов, которая а достаточно велика, б большинство компонентов которой экспрессируются не независимо друг от друга и в обладают связанными с цитодифференцировкой фенотипическими проявлениями, совместимыми с приведенной выше схемой регуляторных актов. Одна из групп генов, удовлетворяющая выдвинутым выше требованиям, гены, кодирующие сократительные белки, насколько можно судить по следующим данным. В настоящее время выделено и охарактеризовано большое количество сократительных белков многие из них имеют несколько изоформ молекулы некоторых из них состоят из нескольких неидентичных субъединиц суммарное количество известных полипептидов сократительной системы достигает в клетках высших животных нескольких десятков ,,,,3. Построение в процессе цитодифференцировки сократительного аппарата и поддержание его в дифференцированных клетках требует строгой координации синтеза соответствующих полипептидов. Это следует и из данных о высокоупорядоченной структуре некоторых типов сократительного аппарата ,,,,,3,7,7 и из результатов определения относительных количеств сократительных белков и их субъединиц в нормальных тканях, клетках, миофибриллах и филаментах ,, ,,,,6,8,5,0. В клетках различных типов и на разных этапах цитодифференцировки синтезируются различные наборы полипептидов сократительной системы и различные относительные количества последних ,,,,,,,,,,,,,,, ,,,0,3,5,5,6. Состав каждого из таких частично перекрывающихся наборов постоянен и может рассматриваться как константа, характеризующая клеточный тип или стадию дифференцировки. Характер изменений полипептидного состава, возникающих в ходе дифференцировки, указывает на многообразие актов регуляции экспрессии в группе генов, кодирующих сократительные белки. Митотические недифференцированные миобласты синтезируют немышечные изоформы актина и миозина, включающие следующие полипептиды актин , актин X А У , тяжелые цепи миозина немышечного типа нш и легкие цепи миозина немышечного типа , . После слияния миобластов первый этап нормального миогенеза постепенно снижается содержание , А и быстро исчезают , Ь и, повидимому, Н. В это же время начинают синтезироваться и быстро накапливаться субъединицы мышечного миозина Не, , , тропомиоЗинТМ. , и, вероятно, . Молярные скорости накопления большинства полипептидов Н, , ТМ , Шр , , одинаковы . Но накопление актинас происходит в 34 раза быстрее. Картина же изменений экспрессии генов, кодирующих миозиновые легкие цепи эмбриональная легкая цепь 9,4, и относительно сложна. Но вскоре содержание начинает снижаться, одновременно начинает синтезироваться и накапливаться создается впечатление, что вытесняет . Теперь накапливается одновременно с , Н и многими другими сократительными белками. Третья миозиновая легкая цепь Ы6 не синтезируется до конца эмбриогенеза, но в дефинитивных мышцах ее содержание координировано с содержанием Н, и .