Фенотипические и генотипические особенности клеток линии мышиной гепатомы XXIIа на разных уровнях устойчивости к колхицину

• Автор: Горностаев, Вадим Сергеевич
• Шифр специальности: 03.00.17
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Ленинград
• Количество страниц: 103 c. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ

Глава I. ВВЕДЕНИЕ

Глава 2. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР . II

2.1. Устойчивые к антиметаболитам мутанты культивируемых клеток в решении проблем генетики соматических клеток . II

2.1.1. Актуальность проблемы . II

2.1.2. Мутанты, устойчивые к ядам II

2.2. Множественноизмененный фенотип клеток

с мембраннообусловленной устойчивостью. .

2.2.1. Мембранные мутанты

2.2.2. Изменение состава белков устойчивых клеток

2.2.3. Коллатеральная чувствительность и холодочувствительность клеток с множественной устойчивостью
2.2.4. Признаки трансформированного фенотипа в клетках с множественной устойчивостью
2.2.5. Характер наследования признака множественной устойчивости . .
2.3. Высокий уровень устойчивости к антиметаболитам и амплификация генов .
2.3.1. Амплификация генов у эукариот .
2.3.2. Устойчивость, амплификация генов и цитологическая картина явления
2.3.3. Множественная устойчивость к ядам и амплификация генов .
2.3.4. Стабильная и нестабильная амплификация
Глава 3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
3.1. Клеточные линии и клоны. Условия культивирования .
3.2. Селекция устойчивых к колхицину клонов .
3.3. Индукция мутагеном повышенной частоты появления устойчивых вариантов . .
3.4. Изучение стабильности сохранения признака .
3.5. Повышающая селекция
3.6. Особенности размножения клеток скорость роста, насыщающая плотность и зависимость от сыворотки.
3.7. Определение перекрестной устойчивости .
3.8. Потенциирование мембранной проницаемости
твином
3.9. Накопление клетками колхицина
3 Определение чувствительности клеток к
вирусу везикулярного стоматита ВВС
3 Онкогенность клеток
3 Гистологическое исследование опухолей .
3 Гибридизация
3 Определение уровня устойчивости к
колхицину в гибридных клонах
3 Трансформация чувствительных к колхицину клеток с помощью ДНК устойчивых клеток .
3 Кариологический анализ .
Глава 4. РЕЗУЛЬТАТЫ
4.1. Селекция устойчивых к колхицину клонов .
4.1.1. Селекция устойчивых клонов и повышение частоты их появления мутагеном .
4.1.2. Различная степень стабильности устойчивых
к колхицину клонов первого шага селекции .
4.1.3. Повышающая селекция .
4.2. Характеристика фенотипических особенностей устойчивых к колхицину клеток .
4.2.1. Особенности размножения
4.2.2. Перекрестная устойчивость
резистентных клеток
4.2.3. Дотенциирование чувствительности к колхицину твином .
4.2.4. Накопление 3Нколхицина клетками .
4.2.5. Чувствительность к вирусу везикулярного стоматита
4.2.6. Онкогенность клеток МГХХПа и колхицинустойчивых клонов .
4.2.7. Морфология опухолей.
4.3. Стабильное и кодоминантное наследование признака устойчивости .
4.3.1. Стабильное наследование устойчивости к колхицину в высокорезистентных клонах
Г1, Г1 и Г0 .
4.3.2. Кодоминантноеть наследования резистентности в гибридах .
4.3.3. Перенос признака устойчивости к колхицину из устойчивых клеток в чувствительные с помощью ДНК
4.4. Цитогенетическая характеристика
Глава 5. ОБСУЖДЕНИЕ.
5.1. Генетическая природа и различная степень стабильности признака устойчивости в
изученных клонах
5.2. Фенотипические особенности устойчивых к колхицину клонов.
5.2.1. Измененная проницаемость мембраны как механизм устойчивости к колхицину
5.2.2. Особенности трансформированного
фенотипа устойчивых клеток .
5.2.3. Сниженная чувствительность к вирусу . .
5.3. Стабильное и кодоминантное наследование признака устойчивости в высокорезистентных клонах
5.3.1. Стабильность устойчивости высокорезистентных клонов.
5.3.2. Кодоминантное наследование признака устойчивости .
5.4. Цитогенетическая характеристика устойчивых клонов
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
ЛИТЕРАТУРА


ОГЛАВЛЕНИЕ
Глава I. Глава 2. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР . Устойчивые к антиметаболитам мутанты культивируемых клеток в решении проблем генетики соматических клеток . Актуальность проблемы . Характер наследования признака множественной устойчивости . Высокий уровень устойчивости к антиметаболитам и амплификация генов . Амплификация генов у эукариот . Множественная устойчивость к ядам и амплификация генов . Стабильная и нестабильная амплификация
Глава 3. Клеточные линии и клоны. Условия культивирования . Селекция устойчивых к колхицину клонов . Индукция мутагеном повышенной частоты появления устойчивых вариантов . Изучение стабильности сохранения признака . Особенности размножения клеток скорость роста, насыщающая плотность и зависимость от сыворотки. Определение перекрестной устойчивости . Гистологическое исследование опухолей . Трансформация чувствительных к колхицину клеток с помощью ДНК устойчивых клеток . Кариологический анализ . Глава 4. Селекция устойчивых к колхицину клонов . Селекция устойчивых клонов и повышение частоты их появления мутагеном . Повышающая селекция . Характеристика фенотипических особенностей устойчивых к колхицину клеток . Дотенциирование чувствительности к колхицину твином . Накопление 3Нколхицина клетками . Онкогенность клеток МГХХПа и колхицинустойчивых клонов . Морфология опухолей. Стабильное и кодоминантное наследование признака устойчивости . Г1, Г1 и Г0 . Кодоминантноеть наследования резистентности в гибридах . Глава 5. ОБСУЖДЕНИЕ. Фенотипические особенности устойчивых к колхицину клонов. Сниженная чувствительность к вирусу . Стабильность устойчивости высокорезистентных клонов. Кодоминантное наследование признака устойчивости . ЗАКЛЮЧЕНИЕ. ВЫВОДЫ. ЛИТЕРАТУРА. ВВС вирус везикулярного стоматита
Глава I. В современной стратегии лечения злокачественных новообразований у человека химиотерапия занимает одно из центральных мест. Однако лечение рака с помощью химиотерапевтических препаратов осложняется тем, что после противоопухолевой обработки в организме обнаруживаются клетки, устойчивые к действию использованных веществ. Более того, довольно часто такие клетки перекрсно устойчивы к целому ряду цитостатиков метотрексату, пуромицину, эметину, винбластину, колхицину, винкристину, имеющим различные молекулярные мишени в клетках вакек,Ыг, . В связи с этим, изучение механизмов устойчивости клеток к противоопухолевым веществам является важной задачей. Клетки с перекрстной устойчивостью имеют изменнуго плазматическую мембрану, вследствие чего снижено накопление цитотоксических веществ внутри клеток. Стабильно наследующие признак устойчивости клеточные варианты с изменнной проницаемостью мембраны в литературе получили название мембранных мутантов Вакег, Ып2, . Обнаружение в мембранных мутантах ослабления по одним и усиления по другим признакам трансформированного фенотипа, повышенной чувствительности к некоторым гормонам и местным анестетикам, генетической нестабильности по ряду свойств делает эти клетки перспективной модельной системой в исследовании проблем практического и теоретического значения. Стабильное и доминантное наследование признака перекрстной устойчивости к ядам позволяет использовать клетки с таким фенотипом для решения различных проблем генетики соматических клеток.