Конструирование и характеристика цитотоксичных гибридных белков на основе генов экзотоксинов Pseudomonas aeruginosa и Corynebacterium diphtheriae

• Автор: Здановская, Марина Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.15
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 84 с. : ил

Он представляет собой металлопротеиназу, способную деградировать лектин и сфингомиелия 2. Анализ нуклеотидной последовательности, кодирующей этот белок, показал, что атоксин синтезируется в виде предшественника, содержащего сигнальный пептид аминокислотных остатков на конце ,4. Первые 8 аминокислотных остатка зрелого белка образуют домен, обладающий фосфолипазной активностью и имеющий сходство с нетоксичной фосфолипазой С из i ,4. Сконцевая область атоксина аминокислотные остатки с 9 по 0 хотя и не обладает каталитической активностью, тем не менее необходима для проявления гемолитической, летальной и сфингомиелиназной активности остоксина 3. Как недавно показано , Сконцевая область отвечает за Са2зависимое распознавание мембранных фосфолипидов. К этой группе принадлежат токсины, продуцируемые как грамотрицательными, так и грамположительными микроорганизмами. Токсины грамотрицателъных бактерий. Ряд гемолитических штаммов ii i сскретируют агемолизин, являющийся типичным представителем семейства токсинов, продуцируемых такими грамотридательными микроорганизмами как i, i и ii i ,. Этот токсин состоит из одной полипентидной цепи, имеющей молекулярную массу 7 кДа. В мембранах эритроцитов и в синтетических двуслойных мембранах очищенный гсмолизин способен образовывать катионселективные каналы . Лу В, и ,. Эта модификация осуществляется продуктом гена при участии ацетилпсреиосящего белка . В настоящее время показано, что токсины, гомологичные а гемолизину и продуцируемые другими бактериями, оказываются модифицированными сходным образом. Токсины грамположител ь н ых бактерий. Характерной особенностью токсинов грамположительиых бактерий является отсугствие протяженных гидрофобных последовательностей, а также наличие протяженных последовательностей, упакованных в складчатые структуры . К этой группе принадлежат атоксин из ii i, сттоксин из , перфринголизин О из ii i, аэролизин из i, листериолнзин О из ii , пнев. О из , суилизин из i 1 и альвеолизин из i vi. Токсины, принадлежащие к этой группе, являются растворимыми белками, которые могут существовать либо в мономерной форме сттоксин стафилококка, либо в димерной форме аэролизин. Сконцевого пептида при участии либо внеклеточных бактериальных протеаз, либо при участии эукариотической протеазы фьюрина 1,,,1. Другие токсины сразу продуцируются в активной форме и не нуждаются в активации. Тем не менее, характерной особенностью всех токсинов, принадлежащих к этой группе, является олигомеризация в мембране эукариотической клетки, ведущая к образованию водопроницаемых каналов с диаметром от А ,1 до 0 А 1,2. Действие этих токсинов приводит активации и пролиферации значительных субпопуляций Тклсток и сопровождается продукцией и секрецией различных цитокинов I1, I2, I4, I6, II, I, , Iу . Эти токсины, называемые суперантигенами, действуют путем нарушения нормального функционирования иммунной системы. Представителями данной группы токсинов являются продуцируемые энтеротоксины серотипов АЕ, О и Н , , , , , и , соответственно, а также токсин синдрома токсического шока 1, стрептококковый суперантигеи и пирогенные экзотоксины серотипов С и , , и , соответственно, продуцируемые стрептококками iiii А 9,7. Эти секретируемые токсины обладают сходной структурой. Все они имеют молекулярную массу порядка кДа и высокоустойчивы к тепловой денатурации и действию протеаз 2. Наиболее дивергировавшим в этой группе оказывается 1. Этот белок имеет менее процентов гомологии с остальными токсинами и не содержит характерного для других токсинов дисульфидного мостика 9,7. Несмотря на существующие различия в структуре, все эти токсины действуют сходным образом. Они обладают способностью с одной стороны связываться со специфическими Vэлементами рецептора Тклеток . С другой стороны они способны взаимодействовать с областью молекул главного компекса гистосовместимости класса II МНС, находящейся вне пределов пептидсвязывающсй области. В отличие от обычных антигенов токсины, принадлежащие к этой группе и назваемые суперантигенами, не претерпевают протеолиза и связываются с и МНС в интактном виде.