Генетическая организация и функции криптических плазмид Bacillus megaterium и Bacillus thuringiensie

• Автор: Рябченко, Николай Федорович
• Шифр специальности: 03.00.15
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 126 c. : ил

1. Состав плазмидных комплексов

2. Структура плазмидных комплексов.

3. Вактериоцшш. ЗО

4. Конъюгация

5. стоксш

6. Эксперименты по молекулярному клонированию

гена токсина.

7. Заключение .

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

ГЛАВА . ГШЕРИАЛЫ И ШОДА

ГЛАВА У. УЧАСТИЕ ГОАЗЩЦ i iii В РМУЛПЦИИ СПОРУЛЯЦИИ И ПРОДУКЦИИ БАКТЕ

РИ0ЦИН0В
1. Бактерсциногенпье шташы в .iii . 2. Бактероциногешше плазмиды в шташах
v.ii Н8 v.ii
3. Участке плазмид в.iii в регуляции споруляции
4. Эксперименты по коныогационному переносу
плазмид В.игх1щ1епа
5. Стабильность плазмид в штаммах в.ашгц
вГепзГэ .
ГЛАВА . ШВШЕСШ ОРГАНИЗАЦИЯ МШ1Щ0ГЕН
НОл ПЛАЗМИДЕ рШЗОЭ.
1. Получение делецяонных производных плазмиды рЕМЗОЭ
2. Клонирование гена мегацина Л.
3. Рестрикционное картирование делеционных
производных плазмиды рШЗОЭ
4. Стабильность делоционннх вариантов
5. Индукция мегацина А в клетках в.Бгiит АГ1, содержащих делеционные производные рВМЗОЗ
ГЛАВА УП. ОЮУЗДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЕ
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


В прцессе роста, на стадии споруляции в клетках в. Необходимо отметить, что в отличии от большинства бацилл, и даже близкородственного организма . Табл. Обязательное присутствие плазмид в штаммах в,iii предполагает их сущест
венное значение для жизнедеятельности это1х бактерии. Действительно, первые предположения о том, что в сверхпродукции кристаллического белка существенную роль играют плазмиды, в настоящее время нашли убедительное подтверждение 5, , 3. Гены, ответственные за синтез 8токсина, картированы на больших плазмидах . Установлено, что плазмиды . ДНК между плазмидами как одного, так и различных штаммов показано участие плазмид в процессе обмена генетической информации у . II, . Бее эти факты открывают новые возможности создания штаммовпродуцентов энтоиотоксинов. Поэтому несомненно, что изучение свойств плазмид . Существование плазмкдных комплексов описано еще у одного представителя рода i . Детально изученный генетически штамм . МД. При помощи методик слияния и трансформации протопластов установлено, что плазмида рШЗОЭ из штамма . А 6. По своей функции мегацин А является фосфолипазой А 2. Наличие хорошо разработанной системы трансформации . ВМЗОЭ, определило выбор . Делью настоящей работы являлось изучение генетической организации и функции криптических плазмид в. И вгiг. Обнаруженная наш внсосая нестабильность ряда шташов В. Шигпепя. С целью изучения возможностей молекулярного клонирования в Iiш, а также применения плазмид в. А з в. ВМЗОЭ из В. Научная новизна и практическое значение. Изучено распространение явления бактериоциногенни среди различных серотипов В. Шгпвепзв, выявлены плазмиды, определяющие синтез бактериовднов. Показано участие плазмид в. В связи с этим объяснены причины нестабильности штаммов в. Шигпеепва но признасу синтеза токсина. Проведено клонирование в в. А на векторной плазмиде рвьэ . Показана возможность использования в. Ьегит в качестве хозяина при проведении генноинженерных работ. При помощи манипуляций i vi получены делеционные варианты мегациногенноц плазмиды рШЗОЭ, проведено картирование гена мегацина А. Установлено, что генетическая организация бактериоциногенных плазмид из бацилл имеет много общего с таковой бактериоциногенных плазмид грамотрицательных бактерий. Полученные делеционные варианты, в дальнейшем, могут быть использованы для конструирования векторов. Согласно классическому определению, плазмида это внехромосомальный генетический элемент . Лаконичность определения подразумевает большое разнообразие свойств плазмид. При описании внехромосомальных генетических элементов используют следующие характеристик особенности репликации, способность осуществлять собственный конъюгационный перенос, присутствие на плазмиде специфических маркеров. Рис. I Универсальная плазмида из грамотрицательных бактерий. Репликация. V точка начала репликации гер белок, необходимый для автономной репликации плазмиды точка прикрепления ДЖ плазмиды к мембране, участвует в процессе распределения копий плазмиды между дочерними клетками при делении i белок РЖ, определяет несовместимость плазмиды с родственными репликонаг. Конъюгация. Как правило, локализован внутри транспозона Тп. Бактериоциноген. В большинстве случаев, синтез бактериоцинов находится под контролем системы репарации . Вактериоцикы играют важную роль в установлении популяционного равновесия между родственными бактериями . Область X. У ii, или индукции опухолей растений, вызываемые i хромоеомальные гены, входящие в состав плазмид р 1 , гены токсинов. Экстрахромосомальные элементы найдены практически у всех микроорганизмов, однако, наиболее детально они изучены у грамотрицательных бактерий, что и нашло подтверждение в приведенной схеме , , 6. Было бы интересно провести сравнительный анализ плазмид граглотрицательных бактерий и бацилл, что мы и попытались сделать в своем обзоре. Перед тем как перейти к рассмотрению собственно плазмид бацилл, необходимо остановиться на генетических работах с использованием внехромосомальных элементов стафилококков и стрептококков в i ii.