МАССОВЫЙ СКРИНИНГ НОВОРОЖДЕННЫХ НА НАСЛЕДСТВЕННЫЕ БОЛЕЗНИ ОБМЕНА КАК ЧАСТЬ СИСТЕМЫ МЕДИКО-ГЕНЕТИЧЕСКОЙ ПОМОЩИ НАСЕЛЕНИЮ

• Автор: Матулевич, Светлана Алексеевна
• Шифр специальности: 03.00.15
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 211 с. : 9 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

1.1 Общая характеристика обследованного контингента .

1.2 Организация исследования.

1.3 Методы диагностики фен ил кетонури и.

1.4 Методы диагностики врожденного гипотиреоза

1.5 Методы диагностики муковисцидоза.

1.6 Методы диагностики адреногенитального синдрома.

1.7 Методы диагностики галактоземии

1.8 Молекулярногенетические методы диагностики
фенилкетонурии и муковисцидоза.
1.9 Методы изучения генетической эпидемиологии
фенилкетонурии.
1. Психологическое обследование детей, больных
фенилкетонурией
1. Метод оценки физического развития детей
Глава 2. ОРГАНИЗАЦИЯ НЕОНАТАЛЬНОГО СКРИНИНГА НА
НАСЛЕДСТВЕННЫЕ БОЛЕЗНИ ОБМЕНА В КРАСНОДАРСКОМ КРАЕ.
2.1 История и принципы организации генетического
скрининга в России и за рубежом
2.2 Общая характеристика популяции Краснодарского
2.3 Этапы организации массового обследования
новорожденных на наследственные болезни обмена в Краснодарском крае
Резюме
Глава 3. ОРГАНИЗА1 ИЯ И РЕЗУЛЬТАТЫ НЕОНАТАЛЬНОГО
СКРИНИНГА НА ФЕНИЛКЕТОНУРИЮ.
3.1 Организация неонатального скрининга на фенилкетонурию за рубежом и в России
3.2 Организация неонатального скрининга на фенилкетонурию в Краснодарском крае.
3.3 Частота фенилкетонурии в популяции Краснодарского края.
3.4 Эффективность лечения больных фенилкетонурией .
Резюме
Глава 4. ОРГАНИЗАЦИЯ И РЕЗУЛЬТАТЫ НЕОНАТАЛЬНОГО
СКРИНИНГА НА ВРОЖДЕННЫЙ ГИ1ЮТИРЕОЗ
4.1 Организация неонатального скрининга на врожденный гипотиреоз за рубежом и в России
4.2 Организация неонатального скрининга на врожденный гипотиреоз в Краснодарском крас
4.3 Особенности антенатального и перинатального периодов детей с врожденным и транзиторным гипотиреозом
4.4 Ранний неонатальный период детей с врожденным
и транзиторным гипотиреозом.
4.5 Сравнительные данные клинической и биохимической диагностики врожденного гипотиреоза до внедрения биохимического скрининга и в период его реализации.
4.6 Неонатальный транзиторный гипотиреоз как один из критериев определения йодцефицитной эндемичности.
Резюме.
Глава 5. ОРГАНИЗАЦИЯ НЕОНАТАЛЬНОГО СКРИНИНГА НА
МУКОВИСЦИДОЗ, АДРЕНОГЕНИТАЛЬНЫЙ
СИНДРОМ И ГАЛАКТОЗЕМИЮ.
5.1 Организация неонатального скрининга на муковисцидоз, адреногенитальный синдром и галактоземию за рубежом и в России
5.2 Организация неонатального скрининга на муковисцидоз, адреногенитальный синдром и галактоземию в Краснодарском крае.
5.3 Первые результаты скрининга на муковисцидоз
5.4 Первые результаты скрининга на
адреногенитальный синдром.
5.5 Первые результаты скрининга на галактоземию
Резюме.
Глава 6. КОМПЬЮТЕРИЗАЦИЯ И ПРОГРАММНОЕ
ОБЕСПЕЧЕНИЕ НЕОНАТАЛЬНОГО СКРИНИНГА
6.1 Необходимость внедрения информационных технологий в программу неонатального скрининга
6.1 Компьютерная программа Неонатальный скрининг и эффективность ее внедрения в организацию скрининга.
6.2 Оптимизация организации массового скрининга за счет внедрения программного комплекса Неоскрин
Резюме.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
I ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Подтверждающая диагностика и контроль за лечением проводились флуориметрическим методом определения фенилаланина в сыворотке и в сухих пятнах крови. Пороговым значением для выявления ФКУ считали уровень ФА более 2,0 мгдл. Если при проведении подтверждающей диагностики уровень ФА определялся более 7,9 мгдл, диагностировалась Фен ил кето нурия и назначалась терапия. При ФА от 2,1 мгдл до 7,9 мгдл ставился диагноз Доброкачественная гиперфенилаланинемия. Периодически проводился общий анализ крови и мочи, определялся общий белок крови. Содержание ТТГ определяли в сухих пятнах цельной крови с использованием реактивов 1 финской фирмы методом иммунофлюоресцентного анализа с временным разрешением люминесценции. Пороговым значением для выявления ВГ считали уровень ТТГ мЕл у новорожденных дней жизни, ТТГ5 мЕл у новорожденных 7 дней. На втором этапе скрининга оценивали концентрацию ТТГ в повторно взятом образце крови. При уровне гормона менее 5 мЕл ретест считали неподтвержденным. При уровне ТТГ более 5 мЕл новорожденных относили к группе риска по ВГ и направляли к детскому эндокринологу для решения вопроса о назначении лечения. Подтверждающая диагностика проводилась методом иммунофлюоресцентного анализа в сыворотке крови путем определения ТТГ, свободного тироксина св. Т4. Определение уровня иммунореактивного трипсина ИРГ в образце цельной крови осуществляли иммунофлюоресцентным методом с использованием реактивов I I на оборудовании Финляндия. При положительном результате скрининга ИРТ нгмл проводили повторное определение ИРТ в образцах крови, собранных на й й день жизни. При повторно высоком уровне ИРТ нгмл проводили потовую пробу. Потовая проба проводилась с помощью системы для электрофореза и сбора пота корпорации V. Измерялась эквивалентная концентрация хлорида натрия в потовой жидкости. При пограничном и позитивном результате потовой пробы проводили ДНКдиагностику. Метод основан на конкуренции между меченым европием прогестероном ОНР и прогестероном ОНР пробы для ограниченного числа центров связывания на специфичных для ОНР поликлональных антителах взятых у кролика. За пороговый уровень у доношенных новорожденных срок гестации больше недель, вес больше 2,5 кг принимали значения ОНР ,0 , у недоношенных при сроке гестации недель вес меньше 2,5 кг ,0 , при сроке гестации недели 0,0 . На втором этапе скрининга оценивали концентрацию ОНР в повторно взятом образце крови. При снижении уровня ОНР ниже пороговых значений ретест считали неподтвержденным. При повторно высоком уровне ОНР новорожденных относили к группе риска но АГС и вызывали в МГК для углубленного обследования. Подтверждающая диагностика проводилась путем ультразвукового исследования надпочечников и определения в крови уровня электролитов калий, натрий, кортизола, ОНР. Финляндия. Пороговым значением для выявления галактоземии считали уровень ГАЛ 7,1 мгдл. На втором этапе скрининга оценивали концентрацию ГАЛ в повторно взятом образце крови. При снижении уровня ГАЛ ниже пороговых значений рстест считали неподтвержденным. При повторно положительном результате новорожденных относили к группе риска по галактоземии и вызывали в МГК для углубленного обследования и назначения лечения. Выделение ДНК для молекулярногенетических исследований проводили из цельной венозной крови и пятен крови на фильтрах, используя набор реактивов I 0 Россия, по методике, рекомендованной изготовителем. Для определения мутаций использовали наборы, разработанные, в лаборатории ДНКдиагностики ГУ МГНЦ РАМН, ООО Центр молекулярной генетики. В качестве маркера молекулярного веса в работе использовали ДНК фага X. Электрофорез проводили в камерах для вертикального электрофореза, напряженности поля Всм. Гель окрашивали в растворе бромистого этидия 0. X V Франция. Полученные результаты документировали с помощью программного обеспечения I Россия. Для определения наиболее частых мутаций в гене ФАГ I, IV6, IV, 1, 2, 8, 8, 1 использовали набор 8. С целью получения фрагментов гена ФАГ использовали метод полимеразной цепной реакции ПЦР с последующей рестрикцией.