Биохимическая и молекулярно-генетическая характеристика болезни Гоше у российских пациентов

• Автор: Букина, Татьяна Михайловна
• Шифр специальности: 03.00.15
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 114 с. : ил.

Учитывая фенотипическое сходство БГ с другими заболеваниями например, БГ тип I с болезнью НиманнаПика тип В или остеомиелитом, БГ тип II с Ош1ганглиозидозм, при клиническом обследовании БГ можно только заподозрить. В практике отечественной медицины до сих пор главным методом постановки диагноза БГ является исследование цитологических препаратов костного мозга. Процедура забора клеток костного мозга является болезненной для пациента, а результат цитологического исследования не всегда может быть однозначным. Отработанный метод биохимической диагностики, основанный на измерении активности рОглюкозидазы в лейкоцитах крови, дает возможность достоверно диагностировать БГ без применения сложного и болезненного для пациента исследования пункции костного мозга. А дополнительное исследование активности ХТ в плазме дает возможность контролировать не только правильность постановки диагноза в случаях пограничной активности рОглюкозидазы, но и процесс лечения БГ. Результаты, полученные при обследовании пациентов в нашей лаборатории, подтверждают значимость биохимических методов исследования в диагностике БГ. Так из 2 человек с направляющим диагнозом БГ, диагноз БГ был подтвержден только у человек. Разработанные подходы к анализу первичной структуры нормального и мутантных аллелей гена рОглюкозидазы позволяют выявить молекулярные дефекты, лежащие в основе болезни Гоше. Впервые был проведен анализ мутантного гена у российских больных с I, II и III типами БГ. Это позволило создать базу для прямого исследования генетической гетерогенности БГ. БГ. Разработанные методы исследования позволили идентифицировать мутантных аллелей. В ходе исследования обнаружены три преобладающих мутациив 9 и экзонах гена рЭглюкозидазы. Эти результаты позволяют предположить наличие специфических генотипов для российских популяций. Положения, выносимые на защиту. Проанализированы значения активности рОглюкозидазы в выборке пациентов с различными клиническими формами БГ, носителей БГ и в контрольной группе. Проанализированы значения активности хитотриозидазы в выборке пациентов с БГ клиническими формами БГ, носителей БГ и в контрольной группе. Обнаружено мутаций в гене рОглюкозилазы у больных с различными клиническими формами БГ, в том числе 7 новых. Выявлены особенности генофснотипических корреляций при БГ. Структура, функции, метаболизм гликосфинголипидов ГСЛ. ГСЛ представляют собой сложные соединения, состоящие из трех компонентов 1 аминосиирта у млекопитающих сфингозина, у дрожжей и растений фитосфингозина рис. В соответствии с размером углеводной цепи, которая может быть представлена моносахаридным остатком, или сложным углеводным полимером, ГСЛ разделяют на несколько классов. Цереброзиды моногликозилцерамиды галактоцерсброзид или глюкоцереброзид. Сульфатиды цереброзиды с сульфогруппой на углеводном остатке. Глобозиды нейтральные ГСЛ, состоящие из церамида и олигосахарида. Ганглиознды анионные ГСЛ, сходные по своему составу с глобозидами, но содержащие один или несколько остатков сиаловой кислоты ацетилнейраминовой кислоты, в составе олигонуклеотидной цепи рис. ГСЛ входят в состав наружной поверхности плазматических мембран всех эукариотических клеток. Главная их функция, как мембранных липидов, формирование бислойного матрикса. Жирнокислотный амид сфингозина церамид погружен в плазменную мембрану, а углеводная цепь располагается снаружи. Обычно ГСЛ являются минорными компонентами, но иногда содержатся в значительных количествах например, в плазматических мембранах эпителиальных клеток, в белом веществе мозга, мислиновой оболочке нервного волокна. В некоторых случаях ГСЛ локализуются не в плазматической мембране, а во внутриклеточных мембранах i, , . Количество и состав ГСЛ клетки зависит от вида ткани. Расположение ГСЛ на наружной поверхности клетки изменяется в зависимости от физиологических процессов стадии дифференциации клетки, онкогенной трансформации. До конца х годов считалось, что липиды являются в основном инертными структурными компонентами, формирующими двуслойный матрикс, в котором взаимодействуют белки, и способствуют стабилизации сильно искривленных участков мембраны i, , i, i, .