Клинико-генетический анализ наследственных аксонопатий, обусловленных нарушением формирования хондриома

• Автор: Щагина, Ольга Анатольевна
• Шифр специальности: 03.00.15
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 114 с. : 15 ил.

Оглавление
Оглавление.

Список использованных сокращений

ВВЕДЕНИЕ.

Актуальность темы.

Научная новизна.

Практическая значимость.

Положения, выносимые на защиту.

Апробация работы.

Глава 1

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫИ

1.1.Клиникогенетические характеристики НМСН
1.1 Л Классификация НМСН.
1.1.2 Гистоморфологическая основа различных типов НМСН.
1.1.3 Гены, мутации которых могут приводить к НМСН.
1.2. Наследственные аксонопатии
1.2.1 Молекулярногенетическая характеристика наследственных периферических аксонопатий.
1.2.2 Гены белков, обеспечивающих формирование и функционирование хондриома, вовлеченные в патогенез НМСН
1.2.3 Роль нарушения структуры и функций хондриома в патогенезе наследственных аксонопатий.
1.2.4 Клиническая характеристика аксонопатий, вызванных мутациями в генах белков, обеспечивающих формирование и функционирование хондриома
Глава И
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
II. 1. Материалы исследования
.2. Методы.
II.2.1 Выделение геномной ДНК
.2.2 Полимеразная цепная реакция.
.2.3 Анализ полиморфизма длин рестрикционных фрагментов ПДРФанализ
.2.4 Электрофорез в ПААГ.
.2.5 Метод анализа
.2.6 Гетеродуплексный анализ.
.2.7 Определение нуклеотидной последовательности.
.2.8 Исследование гаплотипов хромосом с мутацией 9
Глава III
РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ .
III. 1 Молекулярногенетический анализ НМСН НА типа
Ш.2.Генетический анализ НМСН промежуточного 1В типа
1.3 Молекулярногенетический анализ НМСН IV типа
1.3.1 Анализ мутаций гена 1
1.3.2 Эффект основателя для мутации 9 с.5СТ.
1.4 Клиническая характеристика больных.
1.4.1 Клиническая характеристика больных с мутациями в гене 2
1.4.2 Клиническая характеристика больных с мутациями в гене 1 .
1.4.3 Сравнительный анализ клинических проявлений у больных с мутациями генов 2 и 1
1.5 Алгоритм молекулярногенетического обследования больных с наследственными аксонопатиями.
Заключение.
Выводы.
Список публикаций по теме диссертационной работы
Список литературы


Однако исследования последних лет показали достаточную условность этого критерия выделения двух групп НМСН, так как в ряде случаев отмечается внутрисемейная вариабельность показателей СПИ по срединному нерву, а также обнаружение мутаций в одном и том же гене у больных с ее низкими и высокими значениями. Все это затрудняет диагностический этап медикогенетического консультирования и требует проведения анализа частот встречаемости и особенностей клинических проявлений различных генетических вариантов НМСН. В последние годы в ряде популяций проведены исследования, направленные на изучение частоты и спектра мутаций в генах обеспечивающих формирование митохондриальных сетей , , , , . Показано, что эти генетические варианты составляют существенную долю в структуре наследственных аксонопатий в группах больных ряда европейских стран, однако в выборке больных проживающих на территории РФ такого рода исследования не проводились. Целью работы явилось проведение клиникогенетического анализа аксонопатий, обусловленных нарушением структуры и функции хондриома и разработка алгоритмов их молекулярногенетической диагностики на материале выборки больных, проживающих на территории РФ. Определить доли и спектр мутаций трх генов 2, 2 и 1, ответственных за формирование хондриома, в выборке российских больных наследственными аксонопатиями. Выявить наиболее часто встречающиеся мутации, установить причины их распространенности и разработать эффективные системы их регистрации. Оценить спектр основных клинических симптомов и частоту их встречаемости при различных вариантах аксонопатий, обусловленных мутациями в генах 2, и . На основании полученных результатов и анализа литературных данных разработать алгоритм молекулярногенетического обследования больных наследственными аксонопатиями. Впервые в выборке больных, проживающих на территории РФ оценены частоты встречаемости НМСН II, НМСН IV и НМСН промежуточного I типов, обусловленных мутациями генов 2, 1 и 2, белковые продукты которых обеспечивают динамические процессы в хондриоме аксонов. Определен спектр мутаций в генах 2 и . Установлен вклад мутаций этих генов в структуру заболеваемости НМСН. Описаны две ранее не известные мутации гена 12 и одна гена I. В гене 2 выявлена горячая точка мутаций кодон , а в гене 1 частая мутация 9. Установлено, что причиной распространенности мутации 9 является эффект основателя и определен возраст мутации. Разработаны протоколы ДНКдиагностики для выявления мутаций в генах 2 и 1 и алгоритмы молекулярногенетического обследования больных. Определены диагностические критерии, позволяющие проводить дифференциальную диагностику НМСН II и НМСН IV при клиническом осмотре больного. Результаты проведенного исследования могут быть использованы в работе диагностических лабораторий и практической работе врачейгенетиков и неврологов, работающих в области наследственной патологии нервной системы. Мутации гена 2 являются причиной наследственной аксонопагии у семей, у 8 семей причиной заболевания являются мутации гена 1. В гене 2 выявлена частая мутация , на долю которой приходится случаев НМСН II у неродственных пробандов. В гене 2 имеется горячая точка кодон . Выявлена частая мутация гена I НМСН IV у больных, проживающих на территории РФ 9. Причиной высокой частоты мутации 9 гена 1 является эффект основателя. Возраст мутации оценен в 0 лет. Существуют статистически достоверные отличия по частотам основных неврологических симптомов в группах больных с НМСН II и НМСН 1V типов, позволяющие диагностировать их при клиническом осмотре. Разработан алгоритм молекулярногенетического обследования больных наследственными аксонопатиями и разработаны эффективные системы диагностики частых мутаций генов 2 и 1. По материалам исследования опубликованы научных работ, включая 7 статей. Материалы диссертации доложены на конференциях i и , на V съезде Российского общества медицинских генетиков , на Международной Школе Молодых Ученых по Молекулярной генетике Ггномика и Биотехнология и на IX всероссийском съезде неврологов .