+
Действующая цена700 499 руб.
Товаров:
На сумму:

Электронная библиотека диссертаций

Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО

Расширенный поиск

Функциональная интерпретация единичных нуклеотидных замен в интроне 2 гена К-ras мыши, связанных с развитием рака легких

Функциональная интерпретация единичных нуклеотидных замен в интроне 2 гена К-ras мыши, связанных с развитием рака легких
  • Автор:

    Антонцева, Елена Вячеславовна

  • Шифр специальности:

    03.00.15

  • Научная степень:

    Кандидатская

  • Год защиты:

    2006

  • Место защиты:

    Новосибирск

  • Количество страниц:

    108 с. : ил.

  • Стоимость:

    700 р.

    250 руб.

до окончания действия скидки
00
00
00
00
+
Наш сайт выгодно отличается тем что при покупке, кроме PDF версии Вы в подарок получаете работу преобразованную в WORD - документ и это предоставляет качественно другие возможности при работе с документом
Страницы оглавления работы
"2.1.1. Функциональная значимость белков семейства 2.3.2. Транскрипционный фактор


СОДЕРЖАНИЕ
1. Введение

2. Обзор литературы

2.1. Семейство протоонкогенов

2.1.1. Функциональная значимость белков семейства

2.1.2. Структура белков

2.1.3. Ген и канцерогенез лгких

2.2. Единичные нуклеотидные замены

2.3. Транскрипционные факторы

2.3.1. Транскрипционный фактор

2.3.2. Транскрипционный фактор


3. Материалы и методы
3.1. Материалы, использованные в работе
3.2. Олигонуклеотиды
3.3. Животные
3.4. Выделение геномной ДНК из лгких мыши
3.5. Получение препаратов ДНК с использованием
полимеразной цепной реакции ПЦР
3.6. Выделение продуктов ПЦР из агарозного геля
3.7. Получение экстракта ядер лгких мышей
3.8. Введение метки в ДНК с помощью фрагмента Клнова
3.9. Введение кощевой метки в ДНК
3 Метод задержки ДНКзонда в ПААГ белками ядерного экстракта
3 Вестернблот анализ
3 Поиск сайтов гиперчувствительности К ДНКазе I
31. Обработка ядер клеток легкого ДНКазой I
32. Гибридизация по Саузерну
4. Результаты и обсуждение
4.1. Изучение связывания ядерных белков с районом локализации сопряженых с развитием рака легких однонуклеотидных замен в интроне 2 гена ККая мыши
4.2. Идентификация транскрипционных факторов, взаимодействующих с областью ого кодона гена КЛая мыши
4.3. Влияние легочных канцерогенов 3метилхолантрена
и нитрозоэтилмочевины на ДНКсвязывающую активность транскрипционных факторов ОЛТА6 И
5. Заключение
6. Выводы
7. Список цитированной литературы
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ
ЗМХ 3 метилхолантрена
НЭМ нитрозозтилмочсвины
ДНКаза I Дезоксирибонуклеаза I
мРНК информационная матричная РНК
а.о. аминокислотные остатки
п.и. пар нуклеотидов
ГТААГ полиакриламидный гель
ПЦР полимеразная цепная реакция
РНКаза А рибонуклеаза А
ЕДТА этилендиаминтетрауксусная кислота
кОа килодальтон
додецилсульфаг натрия
единичные нуклеотидные замены i i i
единичные нуклеотидные замены, модифицирующие кодоны структурной части генов i
единичные нуклеотидные замены, модифицирующие сайты сплайсинга ii
единичные нуклеотидные замены, модифицирующие характер г енной экспрессии
ацетилтрансфераза гистонови i
деацетилаза гистонов i
тимидии киназа
ТВР ТАТАбокс связывающая субъединица базального транскрипционного фактора II x ii i
1. ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


В связи с этим изучение молекулярных механизмов, посредством которых в интроне могут оказывать влияние на фенотипические признаки, представляется весьма актуальным и перспективным направлением. Ген является одним из наиболее известных протоонкогенов, мутации в котором как спонтанные, так и индуцированные химическими канцерогенами локализованы почти исключительно в трех горячих точках кодонах , и i . В настоящее время подобную направленность мутагенеза связывают, главным образом, с особенностями локальной структуры ДНК в местах предпочтительного возникновения мутаций , , . , . Однако такое объяснение является далеко не всеобъемлющим. Например, при анализе мутаций, затрагивающих кодоны , и гена , в опухолях легких у гибридных мышей, полученных скрещиванием чувствительных и резистентных линий, было показано, что мутация происходит только в чувствительном аллеле этого гена, несмотря на полную идентичность нуклеотидной последовательности обоих аллелей в местах образования мутаций . Известен также феномен тканевой специфичности напрашюнного мутагенеза. , а в легких в м кодоне гена i, . Такие закономерности дают основание думать об участии еще какихто механизмов в обеспечении избирательности мутационного процесса. В частности, поскольку для гена установлено, что чувствительность мышей разных линий к развитию рака легких коррелирует с в его втором интроне, можно предполагать, что эти нуклеотидные замены могут приводить к специфическим, характерным только для чувствительного аллеля изменениям в структуре хроматина иили конформации ДНК в районе го и го кодонов экзон 1, что может способствать образованию аддуктов ДНКканцероген и в последующем мутаций именно в этих позициях. Так как известно, что в формировании иили поддержании определенной структуры хроматина участвуют транскрипционные факторы, связывающиеся с ДНК, можно думать, что сопряженные с чувствительностью к пульмоноканцерогенезу затрагивают сайты связывания таких белков. Целью исследования являлось выяснение молекулярных механизмов, посредством которых единичные нуклеотидные замены во втором интроне гена могут влиять на формирование чувствительности к спонтанному и индуцированному раку легких у мышей, а также выяснение механизма высокой избирательности возникновения мутаций в м кодоне протоонкогена . Изучение влияния сопряженных с развитием рака легких мононуклеотдных замен в позициях 8 и 6 п. у М. Идентификация транскрипционных факторов, взаимодействующих с полиморфным районом. Изучение влияния замены в позиции 1 п. , отличающей мышей устойчивого к пулъмоноканцерогенезу вида М от чувствительных линий М. , на связывание с транскрипционными факторами и их идентификация. Изучение влияния различных вариантов на картину связывания ядерных белков с потенциальным композиционным элементом в начале интрона 2 гена , охватывающим область расположения всех трех сопряженных с чувствительностью к раку легких мононуклеотидных замен. Идентификация белков экстракта ядер клеток легких, взаимодействующих с областью первого кодирующего экзона гена мыши, включающей кодоны и , которые являются горячими точками возникновения мутаций в гене . После того как нами были получены данные о том, что с областью локализации кодонов и гена мыши и с районом расположения связанных с чувствительностью к раку легких мононуклеотидных замен взаимодействуют транскрипционные факторы и 6, была поставлена также задача определения влияния пульмоноканцерогенов на активность этих факторов. Научная новизна и практическая ценность работы. Впервые показано, что сопряженные с предрасположенностью к развитию рака легких у мышей во втором интроне гена являются потенциально регуляторными. Установлено, что СА вариант полиморфизма в позициях 8 и 6 п. ., соответствует комплексному сайту связывания транскрипционных факторов и АТА6, а в случае устойчивого и промежуточного СС вариантов этот сайт оказывается разрушенным. Показано также, что в результате замены СТ в позиции 1 п.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

Время генерации: 0.780, запросов: 966