Изучение клеточных функций гена Merlin на модели сперматогенеза Drosophila Melanogaster

• Автор: Юдина, Ольга Сергеевна
• Шифр специальности: 03.00.15
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 123 с. : ил.

Таким образом, он является удобной экспериментальной моделью для изучения функций белков на клеточном и молекулярном уровнях. Нами было обнаружено, что мутация Мег3 влияет на процессы компактизации ядер и поляризации цисты, что приводит к серьезным нарушениям сперматогенеза на стадии индивидуализации спермиев, что и вызывает стерильность самцов. Ранее было показано, что мутация Мег затрагивает особый участок белка x , который идентичен у человеческого и дрозофилиного гомологов белка. Он имеет важное значение для правильного функционирования белка . Спецификой нашей работы является использование модифицированного вектора , который позволяет достичь высокого уровня экспрессии белков в генеративных тканях дрозофилы , . Чтобы определить функционально значимые районы белка, необходимые для правильного протекания сперматогенеза дрозофилы, мы создали конструкции на основе вектора , кодирующие различные мутантные формы мерлина. Нами было показано, что белок мерлин, который является туморсупрессором в соматических тканях дрозофилы, играет существенную роль в процессах сперматогенеза. В частности, открытая форма белка участвует в агломерации митохондрий на стадии луковицы, а закрытая влияет на цитокинез в мейозе. Таким образом, в соматической и генеративной тканях мерлин функционирует поразному. Целыо данной работы было изучение клеточных функций гена i на модели сперматогенеза i . Показать роль белка мерлин в сперматогенезе . Изучить локализацию белка мерлин в клетках зародышевого пути самцов . Получить линии дрозофилы, содержащие встройки последовательностей, кодирующих различные усеченные формы белка мерлин, в векторе , который позволяет экспрессировать целевой трансген в клетках зародышевой линии самцов . Проанализировать эктопическую экспрессию конструкций в составе вектора , содержащем последовательности, кодирующие различные усеченные формы белка мерлин, в клетках зародышевого пути и в соматической ткани самцов . Проанализировать особенности и возможные аномалии сперматогенеза, вызванные эктопической экспрессией трансгенных конструкций в клетках зародышевой линии дрозофилы. Основываясь на результатах анализа сперматогенеза дрозофилы при эктопической экспрессии полноразмерной и усеченных копий белка мерлин, определить роль различных доменов белка в выполнении его функций. Впервые, на модели сперматогенеза i были изучены клеточные функции белка мерлин, оказывающие влияние на сперматогенез i влияние на цитокинез, на поляризацию цист и морфогенез митохондрий, и изучено взаимодействие белка мерлин и колокализация с клеточными структурами. Получены линии мух, несущие последовательности, кодирующие различные аллели гена i в векторе , позволяющем получить эктопическую экспрессию трансгенных конструкций в клетках зародышего пути. Основные результаты исследований были представлены в стендовых докладах на Международной конференции по исследованию дрозофилы 8 июль г. Япония, Кобе и на X Международной молодежной Школеконференции сентябрь г. I Международной конференции Дрозофила в экспериментальной генетике и биологии сентябрь г. Украина, Харьков. Диссертация содержит следующие разделы введение, обзор литературы, материалы и методы, результаты, обсуждение, заключение, выводы, список литературы. Работа изложена на 3 страницах, включает рисунка, 3 таблицы, список цитируемой литературы включает 5 ссылок. По теме диссертации опубликовано 7 работ. V., v Е. М., , v . V. i i i i i. Юдина , Гусачснко , Лхмаметьева , Омельянчук Л. В. Нерасхожденис хромосом в линиях дрозофилы, мутантных по опухолевому супрессору i II Генетика. Т. . С. . Юдина О. С., Галимова Ю. А. Структурный анализ супрессора опухолей i с помощью трансгенных конструкций в сперматогенезе i. Н Информационный Вестник ВОГиС. Том . С. . Юдина О. С., Дорогова Н. В., Галимова Ю. А., Омельянчук Л. В. Различие функций супрессора опухолей i в соматической и генеративной тканях самцов дрозофилы Сборник научных статей I Международной конференции Дрозофила в экспериментальной генетике и биологии Харьков. С. . Болоболова Е. У., Дорогова Н. В., Юдина О. С., Омельянчук Л. В., Чанг Л.