Характеристика белков центральной нервной системы в линиях Drosophila melanogaster, селектированных на изменение уровня двигательной активности

• Автор: Адоньева, Наталья Васильевна
• Шифр специальности: 03.00.15
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 107 с. : ил.

Введение

Список сокращений

Глава 1. Обзор литерату ры.

1. Морфология развивающейся нервной системы . .

1.1. Нервная система личинки i i.

1.2. Нервная система имаго . .

2. Специфические маркеры нервной ткани дрозофилы.

3. Нейрологические мутации и их роль в исследовании нейрохимических процессов и механизмов реализации нейрофункций.

3.1. Мутации, затрагивающие ранний нейрогенез.

3.2. Мутации, связаные со структурными дефектами мозга.

3.3. Мутации, затрагивающие зрение.

3.4. Ольфакторные мутации.
3.5. Мутации, затрагивающие память и способность к обучению.
4. Исследование системы обратимого фосфорилирования белков у дрозофилы.
5. Исследование аденилатпиклазного и фосфодиэстеразного комплексов у дрозофилы.
6. Исследование линий, длительно селектируемых на изменение уровня половой активности самцов.
7. Генетический анализ двигательной активности i .
7.1. Исследование генетической детерминации различных Форм ДвА.
7.2. Мутации, затрагивающие двигательную активность.
7.2.1 ДвА и метаболизм цАМФ.
7.2.2. ДвА и метаболизм биогенных аминов.
7.2.3. ДвА и исследовательское поведение личинок и имаго.
7.2.4. ДвА у мутантов с морфологическими аномалиями в структурах мозга Глава 2. Материалы и методы
1. Линии i . используемые в работе.
2. Схема отбора.
3. Методы оценки двигательной активности.
4. Приготовление экстрактов белков для электрофоретического и
иммунохимического анализа.
5. Фосфорилирование и йодирование нейральных белков i vi.
6. Электрофоретический анализ белков в ПААТ
7. Получение антисыворотки к экстрактам тканей.
8. Перекрестный иммуноэлектрофорез.
9. Иммунодиффузия, иммуноэлектродиффузия и радиальная иммунодиффузия.
Глава 3. Результаты
1. Характеристика белков ЦНС личинок и имаго в линии дикого типа.
1.1. Сравнительный анализ общих и тканеспецифических белков.
1.2 Тканеспецифические белки мозга личинки
1.3. Некоторые свойства нейроспеиифических белков группы
1.4. НейроспеииФические белки имаго дрозофилы.
1.5. Некоторые характеристики нейроспецифического белка имаго 1.
2. Изучение экспресии белков нервной ткани . в инбредных линиях с изменнным уровнем двигательной и половой активности.
2.1. Сравнительный анализ экспрессии общих и специфических белков
нервной ткани имаго в линиях НА. НА. НА. В А и В А.
2.2. Особенности экспрессии нейробелков, выявленные в линиях НА и НА
а Понижение относительного содержания нейробелка .
б Повышение содержания группы нейробелков .
в Изменение экспрессии белка р.
2.3. Модификация р у имаго разного возраста.
3. Изменение экспрессии белков ЦНС в линиях i . селектированных на понижение уровня двигательной активности.
3.1. Изменение уровня ДвА в ходе селекции.
3.2. Изменение экспрессии белков нервной ткани имаго при селекции
на понижение ДвА
3.3. Особенности характера экспрессии полипептидов р. р. р. р. р.
3.4. Исследование экспрессии белков нервной ткани в известных линиях дрозофил с различным уровнем ДвА.
Глава 4 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
1. Характеристика белков ЦНС личинок и имаго в линии дикого типа.
2. Изучение экспрессии белков нервной ткани . в инбрецных линиях с изменнным уровнем двигательной и половой активности.
3. Изменение экспрессии белков ЦНС в линиях i щ селектированных на понижение уровня двигательной активности.
Выводы
Список литературы


Исследование экспрессии белков нервной ткани в известных линиях дрозофил с различным уровнем ДвА. Характеристика белков ЦНС личинок и имаго в линии дикого типа. Изучение экспрессии белков нервной ткани . Изменение экспрессии белков ЦНС в линиях i щ селектированных на понижение уровня двигательной активности. Актуальность проблемы. Генетика количественных признаков является одной из важных областей общей генетики, вскрывающей элементы комплексного контроля многих фенотипических признаков и формирующей, в частности, основы теории селекции. Поэтому разработка проблем генетики количественных признаков является одной из актуальных задач современной генетики. Изучение генетического контроля ряда форм поведения животных с привлечением таких удобных объектов, как дрозофила, представляет в этом отношении несомненный интерес, поскольку позволяет проводить исследование элементарных поведенческих признаков с использованием мутационного и селекционного подходов. Одним из таких подходов является изучение линий, селектированных на определнную форму поведения. Удобную для этих целей модель представляют линии, различающиеся по уровню двигательной активности ДвА. При изучении регуляции половой активности самцов дрозофилы в классической селекционной схеме Кайданов, были выделены линии с устойчивыми различиями по комплексу признаков, среди которых пониженная ДвА самцов и самок в низкоактивной линии НА. Известен также ряд линий, селектированных на различную скорость эфирной наркотизации и харктеризующихся разным уровнем ДвА Лопатина и др. ДвА Лучникова, . Можно было предположить, что в ходе селекции возникли структурные или регуляторные изменения генов, активных в нервной ткани и отвечающих за реализацию этой формы поведения. В этом плане представляет интерес выявление в таких линиях возможных нейральных эффектов, в частности, характеристика белков центральной нервной системы ЦНС. Удобство признака ДвА состоит в возможности быстрого получения контрастных линий, что позволяет исследовать динамику изменений на уровне белков ЦНС в ходе отбора. Цели и задачи исследования. Целью настоящей работы является характеристика белков ЦНС в линиях i , различающихся по уровню двигательной активности. Изучение экспрессии полипептидов нервной ткани в известных линиях . Проведение селекции на изменение уровня двигательной активности в линиях дрозофил из природных популяций, и параллельное изучение экспрессии белков нервной ткани в ходе отбора. Научная новизна и практическая ценность. Впервые детально охарактеризованы полипептиды нервной ткани личинки и имаго . В ходе работы впервые установлено, что селекция дрозофил на разнонаправленное изменение уровня двигательной активности сопровождается изменениями в экспрессии белков ЦНС. Впервые выявлено существование связи между экспрессией белков р, р, р, р, р, и нервной ткани и различным уровнем двигательной активности в линиях дрозофилы, селектированных по ДвА, и у мутанта iiv. На основании полученных данных высказано предположение о том, что совокупность генов, отвечающих за уровень ДвА, включает локусы, кодирующие обнаруженные нами белки. Проведнное исследование создат предпосылки для выяснения роли конкретных белков ЦНС в механизмах обеспечения двигательной активности. Кроме того, имеющиеся данные о наличии гомологии генов, экспрессирующихся в мозге человека и нервной системе дрозофилы, позволяют надеяться, что результаты подобных исследований внесут свой вклад в выяснение молекулярных механизмов детерминации ДвА и у высших животных, включая человека. Апробация работы. Международной конференции Современные концепции эволюционной генетики, посвященной летию акад Д. К. Беляева, Новосибирск, i , i , , i i i i, i , , . Публикации. По результатам исследований опубликовано работ. Структура и объм работы Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов, обсуждения, выводов и списка литературы 4 работ , изложена на 6 страницах машинописного текста, содержит рисунков и 5 таблиц.