Анализ молекулярных и цитогенетических маркеров в кариотипе домашней лошади : Eguus caballus

• Автор: Дерюшева, Светлана Ефимовна
• Шифр специальности: 03.00.15
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 145 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Общие закономерности структурнофункциональной

организации хромосом

1.1.1. Особенности гетерохроматиновых участков хромосом

1.1.2. Молекулярная и цитохимическая гетерогенность эухроматина

1.1.3. Ядрышкообразующие районы хромосом и методы

их выявления

1.1.4. Теломеры особенности структурной организации и функции

1.2. Специфика кариотипической эволюции в семействе i

1.3. Принципы и методы генетического картирования.
Его особенности применительно к геному домашней лошади
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Материал исследований
2.2. Культивирование лимфоцитов периферической крови,
получение препаратов прометафазных хромосом
2.3. Методы дифференциального окрашивания хромосом
2.3.1 метод
2.3.2. Метод окрашивания ЯОР азотнокислым серебром с желатиной
2.3.3. метод дифференциального окрашивания хромосом с
ЯОР
2.3.4. Сокрашиванис
2.3.5. Окрашивание хромосом нуклеотидспеинфичными
флуорохромами
2.3.6 Выявление гетерогенности прицентромерного гетерохроматина
с помощью обработки хромосом рестрикгазами i i мстод
2.4. Флуоресцентная гибридизация i i
2.5. Анализ препаратов
2.6. Оценка полиморфизма ЯОР и статистическая обработка
полученных данных
2.7. Компьютерный анализ распределения и дисков на
хромосомах
3. РЕЗУЛЬТАТЫ
3.1. Цитохимическая и молекулярногенетическая характеристика
гетерохроматиновых районов митотических хромосом лошади
3.2. Цитогенетическое каргированис хромосом домашней лошади
3.3. Локализация локусов рРНК на хромосомах домашней лошади и
лошади Пржевальского
3.4. Анализ распределения генов рРНК по ядрышкообразующим
хромосомам лошади
3.5. Полиморфизм ЯОР хромосом домашней лошади
3.6. Сравнительный анализ полиморфизма ЯОР, выявляемого
методами 1 и окрашиваиия
3.7. Некоторые случаи нестабильности ЯОР хромосом лошади
3.8. Анализ распределения теломсрспсцифических
последовательностей на хромосомах лошади, коровы и кролика
4. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ
4.1. Сравнительный анализ цитохимической неоднородности
митотических хромосом
4.2. Некоторые закономерности структурнофункционатьной
организации ЯОР лошади
4.3. Теломерные повторы, при центромерный гетерохроматнн и
хромосомная эволюция
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Однако, различия в степени компактизации эу и гетерохроматина могут не сохраняться после процедуры деспирализации хромосом в 5 раз, когда Сдиски уже не выявляются . В зависимости от нуклеотидного состава ДНК различают разные типы конститутивного гетерохроматина, которые можно дифференцировать с помощью нуклсотидспсиифичных флуорохромов. В хромосомах свиньи Димитрова, , человека и высших приматов ПрокофьеваБельговская, гетерохромагин гетерогенен по нуклеотидному составу ДНК. АТбогатый гетерохроматин , , а у представителей семейств vi и i только ГЦбогатый Чирясва, , , , i, i, , . Развитие методов фракционирования ДНК и гибридизации нуклеиновых кислот i i показало, что основная часть ДНК в конститутивном гстсрохроматинс разных видов представлена фракциями тандемных повторов Беридзе, . Причем именно наличие и копийность тандемно повторяющихся последовательностей определяет феномен Сокрашнвания . Однако соответствие между гетерохроматином и высокоповторяющимися последовательностями ДНК не абсолютно. Например, участки митотических хромосом некоторых раковых клеток, которые на состоят из сателлитной ДНК, не выявляются методом Сокрашивания , . Могут наблюдаться и противоположные связи. Так полностью гетерохроматиновая хромосома китайского хомячка и гетерохроматнн первых четырех пар аутосом американской норки практически не содержат многократноповторяющихся блоков нуклеотидов ii . Графодатский и др. Исследованиями последних лет доказано существование двух типов конститутивного Сгетерохроматмна содержащего тандемно повторяющиеся сателлиты ые ДНК агетерохроматина и содержащего интерсперсно распределенные транспозоны i, но и в геномах млекопитающих i . В гетерохроматине половых хромосом полевок i i ДНК представлена в основном ретропозонами i . Еще одной характерной особенностью гетерохроматнна является его генетическая инертность. Обедненность генами iii . , , iii, , i, , , отсутствие репликации гетерохроматиновых участков в процессе политснизации хромосом i, , сильная вариабельность размеров блоков гетерохроматина, не имеющая фенотипического проявления ПрокофьеваБельговская. . Однако, так ли это на самом деле Давно известно о влиянии конститутивного гетерохроматина на число и распределение хиазм на мсйотичсских хромосомах iI, . , i. , . Но роль гстсрохроматина не ограничивается влиянием на функционирование эухроматиновой части генома. Упомянутые выше элиминация и отсутствие амплификации гетерохроматина в соматических клетках позволяют предполагать, что функция функции гстсрохроматина должна быть связана с процессами оогенеза и сперматогенеза и, возможно, первых стадий дробления зиготы , . Исследования последних лет показали, что гетерохроматин i содержит ряд локусов, ответственных за правильную конъюгацию и расхождение хромосом в мейозе, жизнеспособность дочерей в потомстве. хромосомные факторы фертильности, представляющие собой тандемные повторы, продукт которых не известен, и некоторые гены, определяющие фертильность самцов иди самок i, iii, . Существуют ли подобные генетические системы у других видов не известно, но даже если они есть, наличие нескольких генов не объясняет необходимость остальной значительно большей части гетерохроматина в геноме большинства видов. Рассматривая функциональное значение гетерохроматина, следует обратить внимание на его околоцентромерную в большинстве случаев локализацию и наличие в его составе большого количества относительно коротких тандемно повторяющихся последовательностей ДНК. Основные функции центромерных районов хромосом связаны с процессами прикрепления микротрубочек веретена деления и удержанием сестринских хроматид вместе до конца метафазы с последующим их разделением и правильным расхождением в начате анафазы В настоящее время получены прямые доказательства роли гетерохроматиновых блоков в спаривании и сегрегации мсйотичсских хромосом .