Влияние химических гепатоканцерогенов на активность транскрипционных факторов HNF3: связь с антиглюкокортикоидным и опухолеиндуцирующим действием этих соединений

• Автор: Кропачев, Константин Юрьевич
• Шифр специальности: 03.00.15
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 118 с.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Канцерогенные свойства химических соединений

Влияние химических гепатоканцерогенов на

глюкокортикоидную индукцию ряда ферментов

Молекулярные механизмы глюкокортикоидной реуляции.

Регуляторные районы гена тирозинаминотрансферазы.

Конститутивный печеньспецифический энхансер ТАТ в районе от старта транскрипции.

Печеньспецифический сАМРиндуцибельный энхансер ТАТ в районе 3,6 от старта транскрипции
Печеньспецифические глюкокортикоидиндуцибельные энхан
серы ТАТ в районе 2,5 и 5,5 от старта транскрипции.
Регуляторные элементы промоторного района ТАТ
Н3белки,.
Доменная структура 36i
ДНКсвязывающий домен транскрипционных
факторов класса i ix.
Сконцевой трансактиваторный домен белков.
концевой трансактиваторный домен НЫЕЗбелков.
Связывание НЫЕЗбелков с ДНК.
НЧТЗбелки в эмбриогенезе.
Роль НЫЕЗбелков во взрослом организме.
Позиционирование нуклеосом НМ3белками
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Реактивы.
Олигонуклеотиды
Животные.
Приготовление цитозоля клеток печени
Определение содержания ГР в цитозоле и кажущейся константы
диссоциации комплекса ГРтриамценолон методом Скетчарда
Торможение комплекса ГРДНК в геле
Получение экстрактов ядер клеток печени.
Торможение комплексов ядерных белков со
специфическими ДНКзондами в геле.
Электрофорез белков по методу Лэмли.
Полусухой перенос белка на нитроцеллюлозную мембрану
Гибридизация со специфическими антителами.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Влияние генатоканцерогенов ОАТ и ЗМеДАБ па рецептор
глюкокоргикоидов.
Влияние гспатоканцерогенов на другие ТФ.
Изучение механизма действия гепатоканцерогенов на НКТЗбелки
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЦИТИРОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ


ОАТ существенно снижается в печени мышей тех линий, которые чувствительны к его гепатоканцерогенному действию , и мало изменяется у животных устойчивых линий , б обнаружено, что ОАТ, являясь видоспецифичным гепатоканцерогеном для мышей подавляет НМКЗДНКсвязывающую активность в печени этих животных, но не подавляет ее в печени крыс, а сходное с ним по структуре соединение ЗМеДАБ, являющееся видоспецифичным гепатоканцерогеном для крыс, наоборот, подавляет I МРЗДЫКсвязывающую активность в печени крыс, но не мышей в показано, что Н1хТЗДНКсвязывающая активность в печени крыс не подавляется соединением 4МеДАБ не гепатоканцерогенный молекулярный изомер ЗМеДАБ, но в то же время подавляется сильно отличающимися по химическому строению от них и от друг друга гепатоканцерогенами ААФ и ДЭ1 ТА. Установлено, что действие канцерогенов на НЫНЗбелки опосредовано одним или несколькими факторами, локализованными в ядре клетки. Научнопрактическая ценность. Результаты нашей работы являются серьезным аргументом в пользу представления о важной роли эпигенетических событий в механизме химического канцерогенеза. Полученные нами результаты служат стимулом к развитию исследований роли факторов транскрипции и других компонентов регуляторных систем клетки в процессах канцерогенеза. Эти исследования будут иметь существенное значение не только для понимания механизмов канцерогенеза, но и для получения новых сведений о генах, обеспечивающих процессы жизнедеятельности нормальной клетки. Результаты исследования могут найти практическое применение при разработке тестов на гепатоканцерогеиную активность вновь создаваемых химических соединений. Апробация работы. Результаты исследования были представлены на III съезде физиологов Сибири и Дальнего Востока Новосибирск, август , на первой международной конференции Биоинформатика. Структура и регуляция генома Новосибирск, , на XIII всероссийском симпозиуме Структура и функции клеточного ядра С6. Института цитологии и генетики СО РАН. Публикации по теме диссертации. По материалам диссертации опубликовано 6 печат ных работ. Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания использованных материалов и методов, изложения и обсуждения собственных экспериментальных данных, выводов и списка литературы 4 наименований. Работа изложена на 8 страницах машинописного текста, и содержит 2 таблицы и рисунок. Изучение различных канцерогенов выявило ряд важных особенностей их действия. К ним относятся ткане и органоспецифичность действия, то есть способность вызывать опухоли в определенных тканях или группах органов, а иногда только в одном органе подопытных животных, при этом специфичность, как правило, не зависит от способа введения канцерогена в организм. Также установлено, что канцерогены имеют видовую специфичность действия. Например, азасерин вызывает опухоли поджелудочной железы у сирийских хомяков и крыс, нитрозомегилмочевина опухоли желудка и мочевого пузыря у крыс, уретан опухоли легких у некоторых видов млекопитающих Турусов . ., Кобляков В. Д., . . .. Одно и то же химическое вещество может вызывать рак у одних видов млекопитающих при попадании в организм в малой дозе и в течение короткого периода времени, для возникновения опухолей у других видов животных требуется большая доза и срока воздествия, а у третьих вообще не возникает опухолей, даже при введении канцерогенного для других видов вещества в течение длительного времени в сублетальной дозе. Например, гепагоканцерогенный для печени крыс ацетиламинофлкюрен не оказывает действия на печень хлопковых крыс или гепатониты человека . .. i . ., . Эти факты до настоящего времени не получили адекватного объяснения в рамках существующих представлений о канцерогенезе. Наличие канцерогенных свойств того или иного химического вещества заранее предсказать нельзя. Для их определения необходима эксиериментатьная проверка. Создан ряд моделей для исследования химически индуцированного канцерогенеза. Канцерогенные свойства соединений изучаются путем индукции опухолей кожи или печени крыс, опухолей желудка и легких мышей и крыс, опухолей молочной железы различных видов млекопитающих.