Состояние системы протеолиза в условиях окислительных воздействий на организм

• Автор: Ефременко, Юлия Рудольфовна
• Шифр специальности: 03.00.13
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2001
• Место защиты: Нижний Новгород
• Количество страниц: 144 с.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Структурная организация протеолитических ферментов.

1.2. Протсолиз как особая форма биологической регуляции

1.3. Механизмы регуляции активности протеиназ

1.4. Биологический эффект воздействия озонированного

и оксигенированного растворов л..

Г V . V

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Характеристика материала и выбор физиологобиохимических методов исследования
2.2. Определение активности протеолитических ферментов
2.3. Определение общей протеолитической активности
2.4. Комплексный метод определения активности трипсиноподобных протеиназ, а 1антитрипсина и а2макроглобулина в плазме
2.5. Методические приемы оценки состояния перекисного окисления липидов.
2.6. Унифицированный метод определения концентрации озона в физиологическом растворе
2.7. Статистическая обработка данных
Глава 3. ВЛИЯНИЕ ОКСИГЕНИРОВАННОГО ФИЗИОЛОГИЧЕСКОГО РАСТВОРА НА АКТИВНОСТЬ СИСТЕМЫ ПРОТЕОЛИЗА И ПЕРЕКИСНОЕ ОКИСЛЕНИЕ ЛИПИДОВ У ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ
ЗЛ. Состояние системы протеолиза при воздействии оксигенированного
физиологического раствора
3.2. Активность основных ингибиторов протеолиза плазмы крови.
3.3. Исследование основных показателей перекисного окисления липидов и антиоксидантной активности.
Глава 4. ВЛИЯНИЕ РАЗЛИЧНЫХ ДОЗ ОЗОНА НА СОСТОЯНИЕ СИСТЕМЫ ПРОТЕОЛИЗА И ПЕРЕКИСНОЕ ОКИСЛЕНИЕ ЛИПИДОВ У ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ
4.1. Изучение кинетики насыщения и распада озона
в водных растворах
4.2. Состояние системы протеолиза при воздействии озонированного физиологического раствора
4.3. Активность основных ингибиторов протеолиза плазмы крови при введении животным различных доз озона
4.4. Исследования основных показателей перекисного окисления липидов на фоне введения животным различных доз озона
ГЛАВА 5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Диссертация изложена на 4 страницах машинописного текста, иллюстрирована рисунками и таблицами, состоит из введения, обзора литературы, характеристики материалов и методов исследования, двух глав результатов собственных исследований и их обсуждения, заключения, выводов, списка литературы, включающего 4 источника 4 отечественных и 0 иностранных. ГЛАВА 1. Согласно номенклатуре Международного биохимического союза 1ВМ протеолитические ферменты относятся к классу или типу гидролаз кл. З, подклассу пептидгидролаз подкл. Кольман , Марри . Число протеиназ ферментов, катализирующих гидролиз пептидной связи в молекуле белка, весьма обширно. Это в известной степени объясняется разнообразием задач, которые решают эти энзимы, а также множественностью белковых субстратов, присутствующих в организме. Однако, при всем многообразии протеиназ, число их классов невелико. Согласно данным Степанова , в классификации протеолитических энзимов классом называют совокупность ферментов, каталитические центры которых обладают однотипной структурой. Хорошо описаны четыре класса протеиназ, но, вероятно, их несколько больше. Вместе с тем, следует подчеркнуть, что обнаружение новых классов протеолитических ферментов событие чрезвычайно редкое Антонов Степанов СаШз . Основные классы протеиназ и их важнейшие представители продемонстрированы в таблице 1. Как видно из таблицы 1, основными активными группами сериновых протеиназ являются гидроксильная группа остатка серина, имидазольная группа остатка гистидина и карбоксильная группа остатка аспарагина. В основополагающих исследованиях Степанова отмечена значительная консервативность в строении активного центра сериновых протеиназ. В связи с этим, дальнейшая эволюция протеолитических ферментов осуществлялась путем усложнения, приобретения новых функциональных доменов, так называемых кринглов, дополнительно к родственному домену трипсина. Каждый крингл, выполняя свои новые функции, значительно обогащал функциональные возможности протеолитических ферментов. Таблица 1. Металлопро теиназы , Аминопептидазы, металлокарбоксипептидазы, термолизин. Аспартильные Пепсины, гастриксины, катепсин П, протеиназа вируса иммунодефицита человека ВИЧ1. Из вышеизложенного следует, что наиболее изученным и основным представителем класса сериновых протеиназ является трипсин К. Ф.3. В году Кюне установил, что расщепление белков происходит под влиянием фермента, которому дал название трипсин. Именно этот фермент продуцируется ацинарными клетками поджелудочной железы, являясь в связи с этим, панкреатоспецифичным Губсргриц . Именно трипсин запускает каскад протеолитических реакций, активируя все важнейшие протеиназы Губсргриц Тимофеева . Согласно данным Комарова , смесь из а, р и у трипсина гидролизует соединения пептидов, амидов и эфиров, расщепляя связь вблизи аргинина и лизина. Этот фермент имеет молекулярную массу кДа и оптимально действует при 8,0. Установлено, что трипсин, не действуя на живые ткани, расщепляет только денатурированные белки. Следующим ярким представителем панкреатических гидролаз является химотрипсин К. Ф.3. По данным Антонова , Кашпарова , химотрипсин представляет собой трехцепочечный белок с короткой остатков Ацспыо и более длинными В 1 остаток и С 5 остатков цепями, связанными пятью дисульфидными мостиками. Смесь из А и В химотрипсинов гидролизует связи пептидов, амидов и эфиров, в которых принимает участие такие ароматические аминокислоты, как тирозин, фенилаланин, триптофан, не значительно лейцин и метионин. Для того чтобы субстрат мог гидролизоваться химотрипсином, ароматические аминокислоты должны иметь Ьконфшуранию. Подобно трипсину, химотрисии способен расщеплять 3 кетокислоты. Молекулярная масса фермента составляет кДа, а оптимум действия 7,78,0 Тимофеева Шслагуров . Расщепление пептидной связи основными представителями протеолитических ферментов продемонстрировано на рис. К классу сериновых эндопротсииаз также относится эластаза К. Ф.3. Электрофоретически доказано существование двух форм проэласгазы.