Рецепция запахов и молекулярно-структурная организация поверхности обонятельного эпителия позвоночных

• Автор: Гладышева, Ольга Семеновна
• Шифр специальности: 03.00.13
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Нижний Новгород
• Количество страниц: 284 с. : ил.

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы

Цель и основные задачи исследования

Научная новизна Научнопрактическое значение. Основные положения, выносимые на защиту
ГЛАВА 1. ИССЛЕДОВАНИЕ ОБОНЯТЕЛЬНЫХ РЕЦЕПТОРНЫХ ОТВЕТОВ ЭОГ У МЛЕКОПИТАЮЩИХ НА ДЕЙСТВИЕ ЗАПАХОВ РАЗЛИЧНОЙ ПРИРОДЫ.
1.1 Условия отведения ЭОГ от изолированного препарата обонятельного органа м л екоп итающих
1.1.2. Изменчивость высоты эпителия и амплитуды электроольфактограммы у лабораторных мышей.

1.1.3. Морфометрическое исследование структурной организации

обонятельного органа лабораторных мышей.

1.1.4. Выбор экспериментального объекта исследования.

1.2. Специфическая аносмия к запаху изовалериановой кислоты в рецепторном отделе обонятельного анализатора самцов мышей СВБ
1.2.1. Морфометрические исследования структурной организации основного обонятельного органа у лабораторных мышей линии В6 и АК.
, 1.3. Рецепция запахов и нейрогенез в обонятельном эпителии.
Экспериментальная аносмия у лабораторных мышей
1.3.1. Морфофункциональное исследование обонятельного органа мыши
после воздействия сульфата цинка.
1.3.2. Взаимосвязь между нейрогенезом и электрическими ответами обонятельных рецепторов на запахи, различной природы.
1.4. Гормональный контроль рецепции запахов в обонятельном эпителии млекопитающих. .
1.4.1. Влияние половых гормонов на морфологические характеристики обонятельного эпителия и рецепцию запахов.
1.4.2. Влияние гонадоэктотомии и последующих инъекций тестостерона на обонятельное поведение самцов мышей.
1.4.3. Особенности рецепции запахов у циклирующих самок мышей.
1.5. Возрастные изменения обонятельной чувствительности к запахам.
1.6. Основные принципы рецепции биологически запахов. 0 ГЛАВА 2. МОЛЕКУЛЯРНОСТРУКТУРНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ПОВЕРХНОСТИ ОБОНЯТЕЛЬНОГО ЭПИТЕЛИЯ ПОЗВОНОЧНЫХ И РЕЦЕПЦИЯ ЗАПАХОВ.
2.1. Метод послойных препаратов для изучения молекулярноструктурной организации поверхности обонятельного эпителия.
2.2. Белковые комплексы поверхностных структур обонятельного эпителия.
2.2.1. Водорастворимые белки поверхностных структур обонятельного эпителия.
2.2.2. Гликопротеиновые компоненты поверхностных структур обонятельного эпителия.
2.2.3. Участие в обонятельной рецепции белков поверхности обонятельного органа.
2.3. Ферментные системы поверхности обонятельного эпителия и молекулярные механизмы возбуждения обонятельной клетки.
2.3.1. Ультраструктурная локализация стимул зависимой АЦ.
2.3.2. Система АТФэктоАТФазы обонятельного эпителия.
2.3.2.1. Экспериментальные подходы к изучению энзиматической активности поверхности обонятельного эпителия.
2.3.2.2. Свойства поверхностной АТФазы обонятельного эпителия лягушки.
2.3.2.3. Влияние кальция и магния на активность эктоАТФазы обонятельного эпителия лягушки.
2.3.2.4. Идентификация эктоАТФазы поверхностных структур обонятельного эпителия некоторых позвоночных животных.
2.3.2.5. Содержание АТФ в обонятельном органе лягушки и ее участие в рецепторном процессе.
2.3.2.6. Роль системы АТФ экто АТФазы в обонятельной рецепции
2.3.3. Щелочная фосфатаза в обонятельном эпителии позвоночных и обонятельная рецепция.
2.3.3.1. Методы исследования ЩФ в обонятельном эпителии.
2.3.3.2. Локализация и активность щелочной фосфатазы в обонятельном эпителии.
2.3.3.3. Молекулярные формы щелочной фосфатазы обонятельного эпителия.
2.3.3.4. Биохимические исследования активности щелочной фосфатазы и ее участие в рецепции запахов.
2.3.4. Перспективы исследований роли щелочной фосфатазы и эктоАТФазы в обонянии.
ГЛАВА 3. НАЗАЛЬНЫЙ ПУТЬ В ЦЕНТРАЛЬНУЮ НЕРВНУЮ СИСТЕМУ ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕХАНИЗМЫ ТРАНСПОРТА ВЕЩЕСТВ.0.
3.1 Анатомофункциональные основы интраназального транспорта веществ.
3.2. Обонятельная система как транспортный канал для поступления фармакологических препаратов в ЦНС.
3.2.1. Физиологические основы транспорта веществ через ткани
обонятельной системы.
3.2.2 Экспериментальные доказательства транспорта различных веществ в структуры головного мозга через обонятельную систему.
3.2.3 Влияние препарата экзогенного гистона на внутривидовую агрессию самцов мышей при интраназальном введении.
3.2.4 Влияние на внутривидовую агрессию самцов мышей, интраназальное введение ГАМК и сиднофена.
3.3 Исследование возможностей облегчения доступа лекарственных препаратов при использовании назальной доставки.
3.3.1 Сравнительное исследование фосфолипидього состава обонятельного эпителия и мозга домашней свиньи и серой крысы.
3.3.2 Получение и исследование свойств многослойных аутолипосом.7 Заключение.
Выводы.
Список использованной литературы


В. Электрофизиологическая сохранность препарата улучшалась при его хранении во влажной камере при температуре С. В. Однако во время эксперимента амплитуда ЭОГ у таких препаратов быстро за мин падала. Кроме того, в ходе экспериментов изменялись крутизна нарастания переднего фронта и длительность ЭОГ, регистрируемой в одной точке рис. За,е. Учитывая, что при такой постановке опыта нельзя знать начального значения амплитуды ЭОГ препарата обонятельного органа сразу же после его извлечения, исследования
по изучению условий сохранности его функциональных свойств были проведены на лабораторных животных. После регистрации ЭОГ с амплитудой мВ изолированные препараты обонятельного органа крысы помещали в растворе Рингера в холодильник на 1 ч при температуре С. Это приводило к резкому уменьшению амплитуды ответа в раз. Хранение препаратов обонятельного органа крысы и мыши в холодильнике во влажной камере не было столь губительным и позволяло регистрировать ЭОГ у этих препаратов даже через 1 сут рис. Однако амплитуда ответов при таком хранении снижалась в течение 1. Следует также отметить, что при дальнейшей работе с таким препаратом амплитуда ЭОГ была неустойчивой и быстро уменьшалась. Опыты, проводимые на свежеприготовленны. С, характеризуются стабильностью амплитуды, которая сохраняется примерно на одном уровне колебания составляют в среднем в течение 1. При этом нахождение электрода в одной точке приводит к снижению амплитуды ответа через мин, что может быть связано с механическим повреждением эпителия. Однако при незначительном смещении электрода в сторону регистрируется ответ прежней амплитуды. Таким образом, работа с изолированным препаратом обонятельного органа млекопитающих возможна в течение 1. Изменчивость высоты эпителия и амплитуды электроольфактограммы у лабораторных мышей. При выполнении экспериментов на изолированном обонятельном органе взрослых месячных самцов белых беспородных мышей нами была отмечена значительная и своеобразная вариабельность в амплитуде ответов обонятельного эпителия на запаховую стимуляцию. Рис. Электроольфактограммы взрослых лабораторных беспородных мышей. Ответы животных А 1 группы, Б И группы. В этих опытах ЭОГ отводили от изолированного препарата обонятельного органа по методике, описанной выше, а в качестве запахового стимула использовали 0. ИА. На основании предварительного тестирования всей доступной поверхности препарата были зыбраиы четыре точки, находящиеся на завитках решетчатой кости, где амплитуда ЭОГ достигала максимальных или близких к ним значений. ЭОГ регистрировали в этих точках. По характеру ответов всех исследованных животных можно было разделить на две группы первая, у которой средняя амплитуда ЭОГ у каждого животного колебалась приблизительно от 0. В, и вторая от 2. В. Соотношение животных по этому параметр в исследованных группах было примерно соответственно. На рис. В том случае, когда для исследования были взяты взрослые самцы генетически чистой линии линия АК Я значения амплитуд ЭОГ у различных животных были более однородными и такого группирования не наблюдалось табл. В каждой группе было протестировано от 7 до животных. Известно, что существует корреляция между амплитудой ЭОГ при стимуляции эпителия и числом рецепторных клеток в точке регистрации ответа. В работах с экспериментальным повреждением обонятельных рецепторов и их последующей регенерацией было продемонстрировано параллельное уменьшение амплитуды ЭОГ, а затем ее восстановление Троицкая, . При этом наиболее информационно значимым для оценки степени восстановления клеточных элементов в обонятельном эпителии, в том числе и рецепторных, является такой морфометрический показатель, как высота эпителиального слоя. Вероятно, и у интактных животных существует зависимость между, амплитудой ответа и высотой эпителия. Поэтому мы исследовали этот параметр у тех животных, которые использовались в электрофизиологических экспериментах. Измерение высоты обонятельного эпителия проводили на серийных срезах мкм, с шагом мкм, окрашенных гематоксилинэозином в точках регистрации электрической реакции.