Биологические эффекты пептидных фрагментов фактора дифференцировки лейкоцитов HLDF

• Автор: Ржевский, Дмитрий Иванович
• Шифр специальности: 03.00.13
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Пущино
• Количество страниц: 136 с. : ил.

ВВЕДЕНИЕ.

Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1. Фактор дифференцировки ЬОР

1.1. Выделение, химический синтез, активный центр фактора.

1.2. Противоопухолевая активность пептида IШЗРб.

1.3. Адаптогенные, антиоксидантныс и радиопротекторные свойства пептида

V6.И

1.4. Влияние пептида НЫЭРб на эндогенную ашгиноцицептивную систему.

1.5. ДИКгидролизующий фрагмент НЫЖ8.

1.6. Участие фактора НЬБР в процессах апоптоза.

2. Общая характеристика системы половых стероидов

2.1 Пути биосинтеза половых стероидов
2.2. Анаболический эффект половых стероидов, влияние андрогенов на массу
тела и придаточных половых желез.
2.3. Участие половых гормонов в регуляции поведенческих реакций, уровня агрессии и болевой чувствительности.
2.4. Роль эстрогенов у самцов
2.5. Участие половых гормонов в поддержании артериального давления,
симпатического и парасимпатического тонуса автономной нервной системы
3. Общая характеристика гииоталамогипофизарноадреналовой системы
3.1. Гормоны гипоталамогипофизарноадрсналовой системы
3.2. Физиологические эффекты кортикостероидов
3.3. Взаимосвязь гипофизарноадреналовой и гипофизарногонадной систем, половые различия в функционировании гипофизарноадреналовой системы.
4. Взаимосвязь системы стероидных гормонов с эндогенной антиноцицептивной
системой.
4.1. Пути проведения болевых импульсов, механизм действия опиоидов, их
метаболизм.
4.2. Взаимосвязь опиатной системы с системой кортикостероидных гормонов.
5. Участие факторов дифференцировки и апоптоза в развитии патологий сердечнососудистой системы
5.1. Апоптоз, морфологические и биохимические критерии апогттоза
5.2. Значение факторов дифференцировки и апоптоза при ишемических кардиальных нарушениях
5.3. Свободные радикалы и их участие в развитии патологий сердечнососудистой системы
6. Представления о функционально непрерывной совокупности регуляторных
пептидов
Глава И. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
1. Объект исследования.
2. Методы исследования.
2.1. Исследование поведения животных в тесте открытое ноле
2.2. Определение уровня болевой чувствительности в тесте горячая
пластина.
2.3. Определение уровня агрессии у самцов мышей.
2.4. Изучение половой активности самцов мышей.
2.5. Гистологические и морфологические исследования.
2.6. Количественное определение уровня стероидных гормонов в крови
2.7. Хирургические процедуры гонадэктомия, гипофизэктомия, имплантация
артериальных и венозных катетеров.
2.8. Регистрация артериального давления и частоты сердечных сокращений, тестирование чувствительности барорефлекса
3. Протоколы исследования
4. Статистическая обработка результатов
Глава III. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.
1. Изучение андрогенной активности пептида НЫЭРб
1.1. Влияние пептида Н1ЛЭР6 на поведение мышей ИМТП в тесте открытое поле.
1.2. Влияние пептида ШЛЖб на болевую чувствительность мышей в тесте горячая пластина
1.3. Влияние.пептида НЬОРб на половую активность у мышей 1.
1.4. Влияние пептида Н1ЛЖ6 на уровень агрессивности у мышей 1. .
1.5. Влияние пептида НЫЛ на массу тела и придаточных половых желез у
гонадэктомированных мышей
1.6. Влияние пептида Н1ЛР6 на гистологическое строение простаты и семенных пузырьков у гонадэктомированных мышей
1.7. Влияние пептида НЬ1Р6 на уровень тестостерона, кортикостсрона и эстрадиола в крови у мышей 1.
1.8. Влияние пептида Н1ЛР6 на параметры системной гемодинамики у гонадэктомированных мышей 1 при хроническом введении.
2. Изучение адрснокортикотропной активности пептида НЫЗРб.
2.1. Влияние пептида ШЛЖб на массу надпочечников у гонадэктомированных мышей .
2.2. Влияние пептида НЬПРб на уровень кортикостероидов в крови у гипофизэкгомированных самцов и самок крыс i.
2.3. Влияние пептида НОЛб на массу надпочечников у гипофизэкгомированных самцов и самок крыс Vi.
2.4. Влияние пептида НЬОР6 на поведение гипофизэкгомированных крыс бз1аг в тесте открытое поле
2.5. Влияние пептида Н1ЛЗР6 на уровень болевой чувствительности в тесте горячая пластина у гипофизэкгомированных крыс Vi.
3. Изучение гемодинамической активности пептидов НЫЛ
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Одним из таких перспективных белков является II i iii , небольшой белок с молекулярной массой 8,2 кДа, выделенный в лаборатории белков гормональной регуляции ИБХ РАН из культуральной среды клеток промиелоцитарного лейкоза человека , обработанных полностыотранс ретиноевой кислотой, и индуцирующий дифференцировку исходных клеток но гранулоцитарному пути . Костанян и др. Попытки продуцировать зрелый фактор дифференцировки в различных прокариотических системах не увенчались успехом, что, повидимому, связано с высокой ДНКРНКгидролизующсй активностью фактора Драницына и др. Поскольку фактор дифференцировки состоит всего из а. Показано, что эти свойства 6, не имеющего специфических рецепторов на поверхности клеток , определяются способностью пептида взаимодействовать с липидным компонентом клеточных мембран, что сказывается на связывании цитокинов, задействованных в процессе пролиферации и дифференцировки, с клеточной поверхностью Костанян и др. Противоопухолевая активность пептида 6. Поскольку пептид 6 обладал ярко выраженными дифференцирующими и ангиростовыми свойствами, было проверено его противоопухолевое действие i viv. Для этого была получена биологическая модель, морфологически адекватная весьма распространенной человеческой онкопатологии, известной под названием синдрома РустицкогоКалера, или миеломной болезни, относящейся к группе опухолей кроветворной ткани, или гематобластозам Костанян и др. В ходе экспериментов на мышах было показано, что по мере увеличения числа инъекций пептида у всех подопытных животных наблюдалось постепенное уменьшение размеров опухолей с полным распадом опухолевой ткани после инъекций. У контрольных мышей в эти же сроки отмечался прогрессирующий рост опухоли, заканчивавшийся летальным исходом. В случае применения пептида 6 на стадии нсобластичсского ростка установлено полное купирование развития онкопроцссса без возникновения рецидива в течение полугода. Полученные в ходе дальнейших исследований поликлональные антитела против фактора дифференцировки и его фрагмента 8 обладали способностью в различной степени связываться со злокачественными и доброкачественными клетками. Было показано, что фактор дифференцировки можно использовать как иммуногистохимический маркер ранних неопластических процессов Драницына и др. В ходе предварительных экспериментов была показана его чрезвычайно высокая эффективность по сравнению с ныне используемыми маркерами в выявлении ранних стадий неопластических трансформаций. Неспецифический характер взаимодействия 6 с биолипидами даст основания предположить, что этот пептид может изменять физикохимические свойства мембран не только клеток , но и других клеток, модифицировать чувствительность их липидного компонента к пероксидации, а также влиять на связывание различных биологически активных соединений с биомембранами. Не исключено, что подобным образом 6 может модулировать течение важных физиологических и адаптационных процессов, как на клеточном, так и на организмениом уровне, а также изменять устойчивость биологических объектов к воздействиям, вызывающим нарушения процессов пролиферации и дифференцировки клеток или интенсификацию процессов перекисного окисления липидов в организме. При изучении влияния пептида 6 на раннее доимплантационное развитие эмбрионов мышей i viv было обнаружено, что пептид благотворно влияет на зародыши, находящиеся в процессе дробления, но не оказывает никакого воздействия на их дифференцировку. Эти результаты позволили предположить, что пептид может выполнять роль своеобразного фактора выживания Сахарова и др. Для проверки этого предположения было исследовано влияние 6 и его 7членного Туганалога на жизнеспособность клеток в условиях холодового шока. Инкубация клеток линии при пониженной температуре приводит к достоверному понижению числа жизнеспособных клеток. Известно, что в условиях холодового стресса индуцируется апоптоз клеток , сопровождающийся фрагментацией ядерной ДНК i, , и избирательным окислением фосфатидилсерина, локализованного с внутренней стороны мембранного бислоя и ответственного за взаимодействие мембраны с элементами цитоскелета ii .