Роль перекисного окисления липидов в регуляции систем поддержания клеточного гомеостаза у растений при стрессовых воздействиях

• Автор: Лихачева, Алла Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.12
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Нижний Новгород
• Количество страниц: 152 с. : ил

Оглавление.
Введение.

1. Обзор литературы

1.1. Активные формы кислорода как инициаторы

перекисного окисления липидов

1.2. Антиоксидантная система защиты

2. Постановка опыта и методика анализов

2.1.1 Остановка опыта

2.2. Методика анализов.

2.2.1. Выделение хлоропластов

2.2.2.0ценка структурных особенностей хлоропластов

выделенной фракции.
2.2.3. Выделение плазмалеммы.
2.2.4. Определение содержания диеновых конъюгатов ДК
2.2.5. Определение активности глутатионредуктазы ГР.
2.2.6. Определение активности супероксидцисмутазы СОД.
2.2.7. Определение активности НАТФазы.
2.2.8. Выделение хроматина и определение
протеинкиназной активности.
2.2.9. Определение белка.
2.2 Математическая обработка полученных результатов
3. Результаты и их обсуждение
3.1. Влияние теплового шока на перекисный гомеостаз мембран
и его роль в регуляции активности Н АТФазы плазмалеммы.
3.2. Влияние низкомолекулярных антиоксидантов на перекисное окисление липидов мембран
и активность РГАТФазы плазмалеммы.
3.3. Влияние параквата как модели действия теплового шока на перекисиый гомеостаз мембран и активность
ЬГАТФазы плазмалеммы
3.4. Возможное участие продуктов перекисного окисления в салицилатиндуцированной устойчивости растений
к тепловому шоку
Заключение
Список литературы


Ломоносов0Г Москва, , Ii i i i i v, , 2ой международной научной конференции студентов и молодых ученых Актуальные проблемы современной науки Самара, , 6й нижегородской сессии молодых ученых Нижний Новгород, , международной конференции Актуальные вопросы экологической физиологии растений в XXI веке Сыктывкар, , Ii i vi , , VI международной конференции Биоантиоксидант Москва, . Публикации. Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, методов исследований, результатов исследований и их обсуждения, заключения, выводов и списка литературы 9 наименований, в том числе 3 иностранных. Работа изложена на 2 страницах, содержит рисунка. Обзор литературы. Активные формы кислорода как инициаторы перекисного окисления липидов. Термин активные формы кислорода АФК обозначает совокупность короткоживущих взаимопревращающихся и относительно реакционноспособных форм кислорода, возникающих в результате его электронного возбуждения или окислительновосстановительных превращений. Они образуются в организме в реакциях одно, двух и трехэлектронного восстановления кислорода в результате самоиэнзиматического окисления соединений, а также в фотоиндуцированных реакциях Мерзляк, Зенков, Меньшикова, Красновский, V, К. Лег, ТуггеП, Кулинский, Мерзляк, . Среди АФК различают свободнорадикальные частицы супсроксидный анионрадикал О2 , гидроксильный радикал ОН, перекисные радикалы И и др. Н2О2, синглетный кислород СУ, озон Оз и др. Таким образом, термин активные формы кислорода шире, чем свободные радикалы кислорода. Возникновение активированного кислорода в клетке удобно рассматривать как последовательные этапы восстановления кислорода до воды рис. Продукты одноэлектронного восстановления супероксидный анионрадикал и гидропсрскисный радикал Н. О2 не обладает сильными окислительными свойствами, но представляет большую опасность, так как является источником образования более активных АФК. С. Рис. Схема образовании активных форм кислорода. Ре2 при непосредственном взаимодействии с Бе2 Владимиров, Арчаков, НаШуе, ЗиКепсе, 1. Мерзляк, Аверьянов, Зенков, Меньшикова, Мерзляк, Аверьянов, . Н более сильный окислитель, чем , и может вызывать перекисное окисление липидов ПОЛ, что вероятно обусловлено его большей гидрофобностью. Он возникает при протонировании в кислой среде, взаимодействии Н2 с органическими радикалами или , при радиолизе воды Владимиров, Арчаков, Мерзляк, УоЗШБгек, . Н быстро протонируются в кислой среде, но могут вступать в реакции с органическими радикалами. Н2 окислитель средней силы, сам по себе он не инициирует ПОЛ, но служит источником образования гидроксильного радикала Мерзляк, Зенков, Меньшикова, V, Весапа ег а1. Мерзляк, . Оксильный анионрадикал О и гидроксильный радикал О Г прое кты трехэлектронного восстановления. При физиологических значениях О существует в виде ОН, который является самым реакционноспособным из АФК время жизни 9с. Он разрушает практически любую встретившуюся ему молекулу. Действуя на 8Нгруппы, гистидиновые и другие аминокислотные остатки белков, ОН вызывает денатурацию последних и инактивирует ферменты. В нуклеиновых кислотах ОН разрушает углеводные мостики между нуклеотидами и, таким образом, разрывает цепи ДНК и РНК. Владимиров, , I, II. Также, образование ОН происходит при взаимодействии Н2 с ферредоксином, убихиноном и при радиолизе воды Мерзляк, Зенков, Меньшикова, V, Весапа е1 а1. Синглетный кислород о2 генерируется при изменении спина одного из электронов, находящихся на лорбиталях . Это одна из наиболее реакционноспособных форм активированного кислорода. Установлено, что способен окислять различные органические молекулы, включая липиды, белки, аминокислоты, нуклеотиды, карбогидраты, тиолы, фенолы и другие, внедряясь по двойной связи с образованием различных гидропероксидов. Возникновение происходит в основном в фотоиндуцированных реакциях при участии хлорофиллов, других порфиринов, флавинов. Причем, мономерные молекулы хлорофилла являются более эффективными фотогенераторами о2, чем их агрегаты. Образование Н2 Н,0 о.