Действие синтетических ауксинов на рост, цитоморфологию и синтез гинзенозидов в суспензионных культурах клеток двух видов рода Panax

• Автор: Смирнова, Юлия Николаевна
• Шифр специальности: 03.00.12
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 107 с. : ил.

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1 Ареал распространения рода Рапах, биология видов . i и

. i.

1.2 Ценность растений рода Рапах для медицины

1.3 Гинзенозиды химическая принадлежность, структурные формулы

1.4 Биологическая активность индивидуальных гинзенозидов.

1.5 Биосинтез гинзенозидов ключевые ферменты, предшественники.

1.6 Накопление гинзенозидов в растениях видов . i

и . i

1.7 Накопление гинзенозидов в культуре клеток растений рода Рапах

1.8 Влияние условий культивирования па биомассы и синтез гинзенозидов в культурах клеток растений рода Рапах.
1.9 Связь роста, дифференцировки и биосинтеза гинзенозидов в культурах клеток растений рода Рапах
Глава 2. Материалы и методы исследования
2.1 Объекты исследования.
2.2 Условия культивирования
2.3 Определение ростовых и цитофизиологических параметров суспензионных культур клеток женьшеня.
2.4 Измерение количества ДНК.
2.5 Анализ количества и состава гинзенозидов методом ВЭЖХ
2.6 Статистическая обработка материала.
Результаты исследований
Глава 3. Характеристика роста и биосинтеза гинзенозидов суспензионных культур клеток . i v. и Р. i, культивируемых на стандартных питательных средах
3.1 Ростовые и цитофизиологическис параметры суспензионной культуры
клеток Р. i v. .
3.2 Биосинтез гинзенозидов в суспензионной культуре клеток . i v.
3.3 Ростовые и цитофизиологические параметры суспензионной культуры клеток . i.
3.4 Биосинтез гинзенозидов в суспензионной культуре клеток . i
Глава 4. Цитофизиологические параметры и биосинтез гинзенозидов при длительном выращивании суспензионных культур клеток . i v. и . i на средах с различными сочетаниями регуляторов роста
4.1. Влияние сочетаний синтетических ауксинов и цитокининов на рост и цитофизиологические характеристики суспензионной культуры
. i v. .
4.2. Влияние сочетаний ауксинов и цитокининов на биосинтез гинзенозидов в суспензионной культуре . i v. .
4.3. Влияние сочетаний синтетических ауксинов и цитокининов на рост и цитофизиологические характеристики суспензионной культуры
. i
4.4. Влияние сочетаний ауксинов и цитокининов на биосинтез гинзенозидов
в суспензионной культуре . i.
Обсуждение результатов.
Выводы.
Список литературы


Поэтому, эффективность применения в лечебных целях препаратов женьшеня, в большей степени, зависит от композиции гинзенозидов, что подтверждается обоснованностью дифференцированного применения отдельных частей корня . С.А. Меуег в традиционной китайской медицине. В связи с тем, что количество растений рода Рапах в природе крайне ограничено, широко исследуется возможность получения гинзенозидов биотехнологическим путем, используя культуру i vi. Большинство из полученных линий клеток женьшеня отличаются от натуральных корней меньшим количеством и ограниченным составом гинзенозидов Ходаковская и др. В настоящее время активно проводятся работы по получению высокопродуктивных штаммов представителей рода Рапах, а также по исследованию их роста и биосинтеза гинзенозидов. При этом большое внимание уделяется оптимизации условий выращивания клеток, прежде всего составу питательных сред , , . Хорошо известно, что регуляторы роста и их соотношение важнейшие факторы, определяющие возможность существования популяций изолированных клеток. Эффект определяется не только спецификой самого фитогормона, но также зависит от природы вторичных соединений, а подчас от вида растения и даже от штамма культивируемых клеток. Изучение в сравнительном аспекте цитофизиологических характеристик суспензионных культур клеток Р. Кроме того, влияние регуляторов роста на биосинтез гинзенозидов у разных видов женьшеня в условиях i vi до сих пор окончательно не выяснено. В связи с этим были поставлены следующие задачи . Изучить ростовые, цитофизиологические и цитогенетические характеристики суспензионных культур клеток двух видов женьшеней. Определить накопление гинзенозидов в отдельных циклах субкультивирования суспензионных культур клеток Р. Изучить влияние типа синтетического ауксина на ростовые и цитофизиологические характеристики суспензионных культур клеток женьшеней. Изучить влияние типа синтетического ауксина на накопление гинзенозидов в суспензионных культурах . Рассмотреть возможную связь между ростовыми, цигофизиологическими характеристиками и синтезом тритерпсновых гликозидов в суспензионных культурах клеток . Научная новизна работы. Проведено сравнительное изучение длительно культивируемых суспензионных культур клеток двух видов женьшеня. Установлены различия ростовых, цитофизиологичсских и биосинтетических показателей суспензионных культур . Показано, что основное влияние на накопление биомассы, агрегировашюсть, эндоредупликацию ядерной ДНК, содержание и качественный состав гинзенозидов исследуемых культур оказывает химическая природа синтетического ауксина. У обеих суспензионных культур женьшеня НУК вызывает цитодифференцировку, проявляющуюся в увеличении доли крупных многоклеточных агрегатов, увеличении объма клеток, возрастании числа клеток с удвоенным количеством ядерной ДНК, а также приводит к повышению синтеза гинзенозидов. Установлено, что между уровнем синтеза гинзенозидов и цитофизиологическими характеристиками суспензий клеток существует зависимость повышение синтеза гинзенозидов связано с процессами цитодифференцировки. Впервые экспериментально показано, что в случае активного биосинтеза соотношение индивидуальных гинзенозидов, следовательно, и соотношение содержания гинзенозидов и групп достаточно стабильно. Практическая значимость работы. В результате проведенных исследований, получены данные по гормональной регуляции роста и накопления тритерпеновых гликозидов даммаранового ряда в суспензиях клеток двух видов Рапах. Охарактеризованы высокопродуктивные штаммы суспензионных культур Р. Результаты исследований дополняют данные о взаимосвязи цитодифференцировки клеток и уровня синтеза гинзенозидов в условиях i vi. Глава 1. Ареал распространения рода ах, биология видов . Все представители рода Рапах уникальные реликтовые растения семейства . Грушвицкий, Малышев, Журавлев, Коляда, , однако, в исследованиях последних лет , i, . Подобное несоответствие в количестве видов Рапах объясняется длительностью изучения этого рода и большим количеством исследователей, разрабатывавших эту проблему, при отсутствии четких критериев различия таксонов.