Хронобиологическое исследование кейлонной регуляции синтеза ДНК и клеточного деления в асцитной опухоли Эрлиха мышей

• Автор: Мацак, Наталья Яковлевна
• Шифр специальности: 03.00.11
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 197 c. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ
Введение.

Глава I. Обзор литературы .

I. Биологические ритмы клеточного размножения и их

регуляция.

2. Кейлоны и регуляция ритмов размножения клеток. . .

3. Заключение по литературному обзору и постановка

задач собственных исследований

Глава П. Материал и методы исследования .

I. Объект исследования

2. Методы исследования

2.1. Получение ядерной к цитоплазматической фракций клеток асцитной опухоли Эрлиха
2.2. Получение частично очищенного препарата кейлона
из АОЭ методом спиртовой преципитации.
2.3. Метод культивирования клеток асцитной опухоли Эрлиха в суспензии
2.4. Приготовление гистологических препаратов опухоли
и эпителия тонкого кишечника .
2.5. Авторадиографический метод .
2.6. Анализ гистоавторадиографических препаратов. . .
2.7. Статыокинетический метод .
2.8. Определение параметров ритмов пролиферации клеток и ритмов кейлонной системы
2.9. Определение концентрации белка .
2 Гельфильтрация кейлонсодержащего спиртового преципитата экстракта клеток АОЭ.
2 Статистическая обработка результатов
2 Обозначения.
3. Серии экспериментов
Стр.
Глава Ш. Результаты исследования.
I. Локализация Р2нейлона в клетке.
2. Зависимость действия цитоплазматической и ядерной
фракций клеток АОЭ на митотическую активность в ней i vi от дозы фракций
3. Исследование тканевой специфичности действия цито
плазматической и ядерной фракций клеток АОЭ на митотическую активность.
4. Влияние адреналина на ыитозингибирующую активность
цитоплазматической фракции и митозстимулирующую активность ядерной фракции клеток АОЭ.
5. Влияние различных доз КСП, выделенного из АОЭ ме
тодом спиртового фракционирования, на митотическую активность и синтез ДНК в этой опухоли
6. Тканевая специфичность действия кейлонсодернащего
препарата, выделенного из клеток АОЭ методом спиртового фракционирования, на митотическую активность и синтез ДНК в этой опухоли.
7. Изучение суточного ритма митотической активности и
ритмов функционирования а2кейлонной системы .
8. Изучение суточных колебаний числа ДНКсинтезирующих клеток и закономерностей действия на радиоактивный индекс .кейлонной системы.
9. Изучение суточных колебаний интенсивности мечения ядер клеток АОЭ и закономерностей действия на нее кейлонной системы
. Изучение влияния кейлонсодержащего препарата на
продолжительность митоза в АОЭ.
II. Изучение влияния различных фракций, полученных при гельфильтрации кейлонсодернащего препарата АОЭ, на митотическую активность и синтез ДНК в
этой опухоли
Глава 1У. Анализ результатов.
Выводы.
Практические рекомендации
Литература


И. Епифанова, , ii, , что находит отражение в ступенчатом типе синтеза ферментов на протяжении митотического цикла. Таким образом, митотический цикл представляет собой строго согласованную во времени последовательность сложных процессов, включая механизмы их регуляции, среди которых важнейшая роль принадлежит регуляции в самом цикле Последнее может выражаться, в частности, зо взаимодействии между клетками различных фаз митотического цикла ЮА. Романов, . О характере этих взаимодействий можно судить исходя из опытов по гибридизации клеток, взятых из различных фаз митотического цикла Нао, , , i . , i, . Как оказалось, эти взаимодействия могут носить положительный либо отрицательный характер, либо не наблюдаться вообще На взаимодействие между клетками в митотическом цикле указывают и другие литературные данные. Например, результаты, полученные Дэви и соавт . фазы и вступление в фазу. Очевидно, во время движения по митотическому циклу клетки могут выделять в межклеточную среду факторы, способные влиять на кинетику клеток в других фазах митотического цикла. О возможности взаимодействия клеточных популяций внутри митотического цикла свидетельствуют и данные Гиакомони и франкешини ii, ii, об укорочении продолжительности 2 фазы в клетках культуры i после торможения в них синтеза ДНК. Некоторые авторы считают, что суточный ритм митозов обусловлен изменениями длительности Мфазы, так как показали увеличение Ти на максимуме митотического индекса . i, , . Однако в работах других исследователей установлено, что изменения длительности митоза в течение суток существуют, но наибольшее время митоза, как правило, приходится на период минимальной митотической активности и наоборот И. В. Маркелова, С. Г. Мамонтов, В. В. Синелъщикова, , . В настоящее время можно считать доказанным, что суточный ритм МИ определяется колебаниями количества клеток, входящих в митоз, а не изменениями длительности митоза Ю. А. Романов, В. П. Рыбаков, , С. Г. Мамонтов, Л. Н. Иванова, . Длительность периода также может изменяться в течение суток довольно значительно иногда в 3 раза v, . ДНКсинтетической активности наблюдается наименьшая длительность периода и наоборот Ю. А. Романов, Т. Е. Савченко, , vi, . Очень интересны данные, касающиеся, изменений скорости движения клеток по циклу в регенерирующих органах. Например, по данным . I час, соответственно. Для регенерирующего эпителия хрусталика мышей показано, что в условиях его регенерации параметры митотического цикла не изменяются вообще , i, . Таким образом, очевидно, что значимые колебания уровня пролиферации как в норме, так и при регенерации могут достигаться только за счет увеличения количества клеток в митотическом цикле, а не вследствие изменения скорости их движения в нем. Б настоящее время представления о митотическом цикле значительно расширены и дополнены. Оказалось, что часть клеток может выходить из митотического цикла на неопределенно длительное время, сохраняя при этом способность к пролиферации независимо от степени своей функциональной нагрузки О. И. Епифанова, . Эти клетки составляют резервную часть пролиферативной системы. Лайта обнаружил выход клеток из спериода митотического цикла , , I. Он предложил обозначать период, в котором клетки находятся вне митотического цикла, но потенциально способны войти в него, как 0период. Эти клетки, по его мнению, имеют неограниченные способности к пролиферации, способность возмещать в случае необходимости потери клеток т. Гельфант i, , показал, что часть клеток может покидать митотический цикл и в а2периоде. О.И. Епифанова и В. Б. Терских предложили схему клеточного цикла, состоящего из митотического цикла и двух периодов покоя, которые они предложили обозначать 1 резервный период и 2 2резервный период.