Физико-химические и иммунобиологические свойства антигенов туляремийного микроба

• Автор: Николаев, Валерий Борисович
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Саратов
• Количество страниц: 154 с. : 15 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

ПЕРЕЧ ЕЛЬ СОКРАЩЕНИЙ, УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ, Стр.

СИМВОЛОВ, ЕДИНИЦ, ТЕРМИНОВ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Молекулярноиммунологические свойства поверхностных структур и антигенов РгстсЬеИа Ш1агет1
1.2. Характеристика современных иммунологических методов обнаружения антигенов франциселл и антител к ним

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЙ МАТЕРИАЛ

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Микробиологические методы штаммы, получение бактериальной массы

2.2. Методы препаративной биохимии

2.3. Иммунохимические и иммунологические методы.
2.3.1. Метода обнаружения антигенов в выделенных препаратах.
2.3.2. Получение экспериментальных гипериммунных кроличьих сывороток.
2.3.3. Твердофазный иммуноферментный метод ИФА
2.4. Иммунобиологические методы исследования
2.4.1. Определение острой токсичности.
2.4.2. Определение аллергенных свойств
2.4.3. Определение протективной активности
2.5. Аналитические методы.
2.5.1. Электрофоретические методы.
2.5.2. Методы химического анализа.
2.6. Радиоизотопные методы
2.6.1. Изучение перераспределения нуклеиновых кислот и ЛПС в двухфазной системе вода детергент Тритон Х4.
2.6.2. Реакция бласттрансформации лимфоцитов РБТЛ.
2.7. Статистическая обработка.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.
ГЛАВА 3. ПОЛУЧЕНИЕ АНТИГЕНОВ ТУЛЯРЕМИЙНОГО МИКРОБА И ХАРАКТЕРИСТИКА ИХ ФИЗИКОХИМИЧЕСКИХ И ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ.
ГЛАВА 4. УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕТОДОВ ОЧИСТКИ И КОЛИЧЕСТВЕННОГО АНАЛИЗА ЛПС К ТиЬАЯЬ
4.1. Разработка новых способов выделения и очистки ЛПС
4.2. Взаимодействие ЛПС тулярсмийного микроба с карбоцианиновым красителем
и усовершенствование спектрофотометрического метода его определения.
ГЛАВА 5. КОНСТРУИРОВАНИЕ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ТЕСТСИСТЕМ
5.1. Получение гиперим.мунных кроличьих сывороток против изолированных антигенов туляремийного микроба и оценка их пригодности для получения диагностических тестсистем
5.2. Получение эритроцитарного туляремийного антигенного диагностикума.
5.3. Разработка дотиммуноанализа с частицами коллоидного серебра для обнаружения антигенов Г. i и антител к ним
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Текст работы изложен на 9 страницах машинописного текста, иллюстрирован таблицами, рисунками. Список цитированной литературы содержит 5 отечественных и 2 иностранных источника. Глава 1. Возбудитель туляремии внутриклеточный паразит теплокровных с приуроченностью размножения, главным образом, в паренхиматозных органах и способностью вызывать у чувствительных к инфекции животных геморрагическую септицемию. Возбудитель туляремии относиться к генетически обособленному роду i . В соответствии с Правилами Международного Кодекса Номенклатуры Бактерий была создана унифицированная классификационная схема внутривидовой таксономии . . i . v v голарктический, . i неаркгический и . iiv v v среднеазиатский, а также 3 биовара, выделенные внутри голарктического подвида . I эритромициночувствительный, . II эритромицинорезистеитиый и . iv японский , . В настоящее время . . i . Клетки . По строению клеточной стенки КС туляремийиый микроб относится к грамотрицательным бактериям ГОБ. В иммунологическом и патогенетическом аспектах первой структурой клетки, вступающей в контакт с иммунной системой хозяина, является капсула. Известно, что капсула увеличивает устойчивость бактерий к сывороточному комплементу иили фагоцитирующим клеткам и определяет их вирулентные свойства , , 6. Клетки всех штаммов туляремийного микроба обладают капсулой слизистой консистенции с четкими краями , 5. Толстая капсула 0,0, мкм встречается наиболее часто у бактерий вирулентных штаммов, а тонкий покров 0,0, мкм встречается у вакцинных и авирулситных штаммов . Капсульное вещество плохо растворимо в водных растворах 3, 5. Впервые на гидрофобные свойства поверхностных структур туляремийного микроба обратили внимание, когда выяснилось, что вирулентные штаммы Г. Позже было выявлено необычно высокое содержание липидов в слизистой оболочке возбудителя и получены данные, указывающие на роль этой оболочки в вирулентности туляремийного микроба 3, 5, 6. По данным химического анализа внешний покров тулярсмийного микроба практически лишен нуклеиновых кислот, но содержит в 24 раза больше аминосахаров, чем микробная клетка. В составе преобладают углеводы ,6 и высвобождаемые при кислотном гидролизе липиды , включая жирные кислоты и фракцию сфингозиновых оснований 3. Капсульное вещество вирулентных штаммов Т7. Шгетк содержит Л ПС 5 и гликолигшды, три из которых А, , С специфичны для вирулентной формы микроба 0, 1, 2, 3. Сантиген отличается от А и Пантигена тем, что схожие эпитопы обнаруживаются также у бруцелл и Т7. Ша 2. Клеточная оболочка. Бактерии, входящие в род i, в том числе и . КО, состоящей из КС и цитоплазматической мембраны. В i КС входит гладкоконтурная наружная мембрана НМ, иептидогликановый слой и периплазматичсская зона. У вакцинных штаммов . КС имеет широкий компактный слой пептидогликана толщиной от 6 до нм. Псптидогликан ПГ связан поперечными липопротеидпыми мостиками с НМ и у вирулентных штаммов полностью заполняет иериплазмагическую зону , . Заметных различий в субмикроскопической структуре изученных штаммов голарктической и нсарктической географических рас . Недавно при изучении улыраструктуры вакцинного штамма на поверхности клеток были выявлены нитеподобные структуры, схожие с пилями IV типа, в то же время у высоковирулентного штамма 4 были идентифицированы гены, ответственные за их синтез, и был сделан вывод о том, что обнаруженные структуры являются продуктом их экспрессии 3. Как КС, так и НМ туляремийного микроба обладают выраженным протсктивным действием в опытах на лабораторных животных , , , , 9, 0, 8. Установлено, что препараты НМ, в тесте защиты белых мышей, более эффективны, чем убитые целые клетки , 0. Однократная иммунизация препаратами ИМ вакцинного штамма обеспечивала защитный эффект для мышей, инфицированных вирулентным штаммом туляремийного микроба .