Факторы патогености Klebsiella pneumoniae и их роль в патогенезе острой кишечной инфекции у детей первого года жизни

• Автор: Мартыненко, Людмила Дмитриевна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 1996
• Место защиты: Ростов-на-Дону
• Количество страниц: 398 с. : ил

1.1 Клебсиеллез и факторы патогенности клебсиелл

1.2 Механизмы антибактериальной защиты детей первого

года жизни .

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Глава 2. Материалы и методы

2.1. Объекты и объем исследований

2.2. Микробиологические методы

2.3. Определение факторов и признаков патогенности

2.4. Биологические методы исследования

2.5. Методы изучения фимбрий

2. 6. Биохимические исследования.

2.7. Молекулярнобиологические методы.
2. 8. Иммунологические методы
2. . Фагоцитарные реакции.
2Получение антигенов, антител и диагностических препаратов.
2 Получение конъюгатов.
ГЛАВА 3. Биологические свойства штаммов . i, выделенных от детей первого года жизни
3.1. Роль клебсиелл в этиологии ОКИ у детей раннего возраста.
3.2. Характеристика биохимических свойств штаммов
3.3. Капсулы и капсульные антигены штаммов.
3.4. Состав высших жирных кислот липидов.
3.5. Чувствительность к антибактериальным препаратам.
3.6. Плазмидный спектр штаммов И
ГЛАВА 4. Факторы и признаки патогенности К. i
4.1. Адгезивные свойства, поверхностные структуры
и факторы адгезии
4.2. Ферменты патогенности.
4.3. Факторы патогенности с функцией поражения.
4.5. Признаки патогенности.
4.6. Массивность выделения.
4.7. Вирулентность.
4.8. Взаимосвязь факторов и признаков патогенности
ГЛАВА 5. Взаимосвязь патогенных свойств штаммов и клинических проявлений при остром кишечном клебсиеллезе
5.1. Клинические формы кишечного клебсиеллеза
5.1.1 Кишечный клебсиеллез при спорадической заболеваемости.
5.1.2 Клебсиеллез при вспышке острой кишечной инфекции
5.2. Биологопатогенетические свойства клебсиелл
5.3. Дисбиотические показатели кишечника
ГЛАВА 6. Бактериальные антигены и иммунобиохимические показатели при кишечной клебсиеллезной инфекции.
6.1. Бактериальные антигены
6.2. Факторы неспецифической защиты
6.3. Локальная иммунная защита.
6. 4. Гуморальный иммунитет.
ГЛАВА 7. Экспериментальное изучение механизмов патогенеза острого кишечного клебсиеллеза
7.1. Экспериментальная модель для изучения механизмов
патогенеза ОКИ у детей раннего возраста
7.2. Влияние биологических свойств штаммов и их факторов
патогенности на динамику клинических проявлений и
исход инфекции
7.3. Динамика перекисного окисления липидов при острой
кишечной клебсиеллезной инфекции.
ГЛАВА 8. Роль фимбрий I и III типов, липополисахарида и термолабильного энтеротоксина . i в патогенезе инфекции.
8.1. механизм взаимодействия фимбрий и фимбриальных адгезинов I и III типов с клетками макроорганизма.
8.2. Роль липополисахарида в активации свободнорадикального окисления.
ГЛАВА 9. Экспериментальное обоснование разработки диагностических препаратов на основе факторов патогенности . i
9.1. Разработка технологии получения антигенов
9.1.1 Получение и характеристика ФА1, ФАШ
9.1.2 Разработка технологии получения ТЛЭТ.
9.1.3 Разработка технологии получения ЛПС.
9.2. Диагностические иммуноферментные тестсистемы для тестирования факторов патогенности и антител к ним
9.3. Принципы разработки набора питательных сред для дифференциации патогенных и непатогенных энтеробактерий, в том числе и . i
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ .
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Несомненный теоретический и практический интерес вызывают исследования по изучению фосфатаз микроорганизмов, а также других биологически активных веществ, продуцируемых клебсиеллами 4. Определение ведущего значения энтеротоксинов в диарейном синдроме кишечного клебсиеллеза, как и установление Степени антигенного родства и механизма биологического действия, относится к середине годов. ТЛЭТ . ТЛЭТ и термостабильному энтеротоксинам ТСЭТ Е. Последующими исследованиями было установлено, что ТЛЗТ по целому ряду антигенных свойств и механизму биологического действия имеет сходство с ТЛЗТ . ТЛЭТ связан с нарушением регуляции циклического адено
зин3 ,5 монофосфата 6. По данным Р i i 1, 2 3 . Д., устойчив к нагреванию до 0С в течение мин. ТСЭТ . Рядом исследователей отмечена высокая частота продукции ТЛЭТ и ТСЭТ штаммами . Зз. Для определения энтеротоксинов используют биологические пробы, модель мышисосунка для ТСЗТ 3, изолированной петли кишечника кролика 9 или теста отека лапки белой мыши для ТЛЭТ. Разработанные в последнее десятилетие иммунологические методы, основанные на достаточно высокой степени антигенного родства энтеротоксинов кишечных бактерий, позволяют обнаруживать их у штаммов, даже слабопридуцирующих. Наиболее перспективными зарекомендовали себя методы, основанные на коагглютинации , латексагглютинации 6, преципитации в агаре, i 3 и радиального гемолиза 9 иммуноферментного анализа 1 и ДНКгибридизации , , 5. Несмотря на имеющиеся теоретические разработки, отсутствуют масштабные технологии получения иммунохимически чистых токсинов и антитоксинов, определяющих чувствительность и специфичность диаг
ностических препаратов. Кроме энтеротокеинов к факторам патогенности с токсической функцией относятся липополисахаридэндотоксин ЛПС, гемолизины и другие. Очевидно их действие взаимосвязано, но этот механизм практически не исследован. По современным представлениям, ЛПС, являясь структурным компонентом клеточной стенки, образует с белками и липидами сложный макромолекулярный комплекс, обозначенный как иантиген , , 0, 2. А. Полисахаридная часть определяет серологическую специфичность 0антигена, а липид А токсическую. ЛПС энтеробактерий токсичен для живых организмов и обозначаем как эндотоксин, поскольку освобождается из клеток только после их разрушения . В организме животных и человека ЛПС вызывает лихорадку, агрегацию тромбоцитов, лейкоцитоз, эндотоксический шок, а при высоких концентрациях смерть. Большинство исследователей полагают, что в основе воздействия ЛПС всех видов грамотрицательных микроорганизмов на макроорганизм, лежат одни и те же механизмы. Наиболее изучен механизм токсического действия ЛПС сальмонелл, с которым связывают патогенез сальмонеллезной инфекции. Установлено, что развитие диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови следствие воздействия эндотоксина на свертывающую систему крови 3. Полагают, что наиболее выраженное действие ЛПС на секрецию электролитов и жидкости в тонкой кишке, ее резкое усиление является одним из основных клинических признаков сальмонеллеза 9, 6. Исследованиями Ii М. КАТРазы. Высказано предположение, что ЛПС оказывает воздействие почти на все механизмы регуляции гомеостаза 9, , 7. Я Серов с соавт. ЛПС приводит к медиаторному хаосу. Последний способствует нарушению кровообращения тканей, повышению проницаемости капилляров, клеточной гипоксии и нарушениям метаболизма. Не исключено, что такие,или подобные проявления эндотоксинемии, или действия ЛПС могут наблюдаться и при клебсиеллезной инфекции. По имеющимся данным штаммы К. Суммируя сведения о гемолизинах грамотрицательных бактерий, их необходимо расценивать как факторы вирулентности бактерий 9, 7. Са , ведущие к повышению внутриклеточной концентрации этого иона 6, 8, 0. Показано, что продукция гемолизина стимулируется Са и Сг2. Механизм этого явления пока не расшифрован, однако известно, что Са2 активизирует сам токсин, а не удаляют какойлибо ингибитор из инкубационной смеси . Отличительной особенностью К. Выделен гемолизин К. ММ 8,4 и кД. Однако механизм его действия пока не изучен 5. В последние годы сведения о токсинах пополнились новыми данными о вероцитотоксинах или шигаподобных токсинах Е.