Взаимодействие Bifidobacterium bifidum штамм 1 и Escherichia coli штамм М-17 в бификоле, изготовленном при совместном культивировании производственных штаммов

• Автор: Ладыгина, Александра Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 142 с. : 26 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список основных сокращений.

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. Обзор литературы.

1.1 .Современное состояние микроэкологии организма

человека, взаимодействие микроорганизмов друг

с другом и с макроортнизмом

1.2. Роль пробиотиков в нормализации микроэкологического

состояния макроорганизма

ГЛАВА 2. Материалы и методы.

2.1. Материалы

2.1.1. Штаммы микроорганизмов
2.1.2. Фильтраты культуральных жидкостей.
2.1.3. Питательные среды
2.1.4. Препараты.
2.1.5. Отраслевой стандарт бифидумбактерина
2.1.6. Лабораторные животные.
2.2. Методы
2.2.1. Контроль коммерческих препаратов
2.2.2. Изучение взаимодействия штаммов и продуктов их метаболизма.
2.2.3. Оценка морфологической гетерогенности микробной популяции методами позитивного окрашивания и ультратонких срезов.
2.2.4. Морфометрический анализ.
2.2.5. Исследование антагонистической активности препаратов
2.2.6. Изучение безопасности бификола на моделях острой и хронической токсичности.
2.2.7. Патоморфологическое исследование
2.2.8. Статистические методы исследования
ГЛАВА 3. Изучение взаимодействия В. ii шт.1 и . i шт. М, и влияния продуктов их метаболизма на рост каждого при
совместном культивировании штаммов.
3.1 Изучение взаимовлияния бифидобактерий и кишечной
палочки на рост каждого при совместном культивировании
3.2. Влияние продуктов метаболизма бифидобактерий на рост
. i шт. М.
3.3. Влияние продуктов метаболизма кишечной палочки
на рост В. ii шт
ГЛАВА 4. Морфофизиологичсские особенности клеток микробных
популяций в составе бификола и препаратов бифидумбакгерина, колибактерина
4.1. Электронномикроскопическое исследование морфологической гетерогенности микробных популяций
. i шт. М и В. ii шт.1, выращенных в жидких питательных средах
4.2. Электронномикроскопическое исследование бифидумбактерииа производитель ОАО Биомед
им. И.И. Мечникова, с. ПетровоДальнее
4.3. Электронномикроскопическое исследование колибактериа производитель ОАО Биомед
им. И. И. Мечникова, с. ПетровоДальнее.
4.4. Электронномикроскопическое исследование бификола
4.4.1. Морфометрический анализ препарата бификола производитель ОАО Биомед им. И.И. Мечникова, с. ПетровоДальнее, полученного при раздельном культивировании В. ii шт. 1 и . i шт. М
4.4.2. Морфометрический анализ препарата бификола производитель НПО Иммунопрепарат, г. Уфа,
полученного при совместном культивировании
В. ii шт. 1 и . i шт. М.
ГЛАВА 5. Изучение взаимодействия В. ii шт. 1 и . i шт. М
в бификоле при оценке антагонистической активности i vi.
5.1. Характеристика бификола по специфической активности.
5.2. Оценка взаимодействия бифидо и коликомпонентов при контроле антагонистической активности бификола.
5.2.1. Определение количественного содержания бифидобактерий
и кишечной палочки в посеве бификола
5.2.2. Определение антагонистической активности бификола в аэробных условиях и с использованием анаэробной системы x С с концентрацией углекислого газа в среднем
фирма iix Франция
5.2.3. Определение антагонистической активности бификола,
В. ii шт. 1 с использованием анаэробной системы
XI с концентрацией 5 и С фирма
XI, Великобритания
ГЛАВА 6. Изучение взаимодействия культур В. ii шт. 1 и . i шт. М на модели острой и хронической токсичности комплексного препарата бификола и составляющих его монокомпонентов
6.1. Патоморфологическое исследование.
6.1.1. Результаты исследования острой токсичности.
6.1.2. Результаты гистологического изучения внутренних органов мышей после введения . i шт. М.
6.1.3. Результаты гистологического изучения внутренних органов мышей после введения В. ii шт. 1.
6.1.4. Результаты гистологического изучения внутренних органов мышей после введения смоделированного бификола
6.2. Результаты исследования хронической токсичности
6.2.1. Результаты гистологического изучения внутренних органов контрольных мышей.
6.2.2. Результаты гистологического изучения внутренних органов мышей после введения бифидумбактерина.
6.2.3. Результаты гистологического изучения внутренних органов мышей после введения колибактерина
6.2.4. Результаты гистологического изучения внутренних органов мышей после введения смоделированного бификола
ОБСУЖДЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


М наблюдается сложный механизм взаимодействия бифидобактерии и продукты их метаболизма оказывают ингибирующее действие на рост кишечной палочки, а кишечная палочка и продукты ее метаболизма стимулируют рост бифидобактерий, что проявляется в накоплении биомассы. С помощью электронномикроскопических методов исследования моно и комплексного препаратов выявлен антагонистический механизм взаимоотношений двух видов микроорганизмов в смешанной популяции бификола, выражающийся в усилении фрагментации клеток бифидобактерий и появлении электронноплотных гранул, в агрегации клеток кишечной палочки и деструктивных изменений в них. Взаимодействие двух культур в смешанной популяции бификола проявляется поразному при оценке антагонистической активности в аэробных и анаэробных условиях, что диктует целесообразность при наличии в комплексных препаратах представителей аэробных и анаэробных микроорганизмов использования оптимальных условий для культивирования каждого микроорганизма i vi. Апробации работы и публикации. Диссертация апробирована на заседании Ученого совета Федерального государственного учреждения науки Государственного научноисследовательского института стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им. Л. А. Тарасевича Роспогребнадзора ФГУН ГИСК им. Л. А. Тарасевича Роспотребнадзора, протокол от г. Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на Юбилейной научнопрактической конференции НИИЭМ им. Г.Н. Габричевского, Москва, Международной научнопрактической конференции памяти Г. Москва, Международной конференции Пробиотики, пребиотики, синбиотики и функциональные продукты питания. Современное состояние и перспективы, Москва, Всероссийской научнопрактической конференции с международным участием Вакцинология . Всероссийской научнопрактической конференции с международным участием Вакцинология . Москва, . По теме диссертации опубликовано 9 печатных работ, из них 1 в журнале, рекомендованном ВАК РФ. Объем и структура диссертации. Работа изложена на 4 страницах, содержит таблицы и рисунков и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, четырех глав собственных исследований, обсуждения, выводов, списка литературы, включающего 3 источника, из них отечественных и иностранных, приложения. Связь работы с научными программами. НИР ФГУН ГИСК им. Л. А. Тарасевича Договор 4 и договор 9 с Минздравом России Отраслевая научноисследовательская профамма Эпидемиология и микробиология и договор с Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека Д в рамках отраслевой научноисследовательской профаммы Научные аспекты обеспечения санитарноэпидемиологического благополучия в Российской Федерации на годы. С первых дней жизни организм человека соприкасается с окружающей средой, адаптируется к ее условиям и в результате их взаимодействия, происходит заселение соответствующих экологических ниш открытых полостей различными микроорганизмами, формирующими микробиоты человека 1, 2, 9, , , , , . Микробиота это эволюционно сложившееся сообщество разнообразных микроорганизмов, населяющих открытые полости организма человека, определяющее биохимическое, метаболическое и иммунологическое равновесие макроорганизма. Сформированные симбиотические сообщества играют важную роль в жизнедеятельности человека, в поддержании и сохранении его здоровья 8, , , , , 7, 9. С современной позиции нормальную микрофлору человека рассматривают как совокупность микробиоцеиозов, занимающих экологические ниши на коже и слизистых всех открытых внешней среде полостей макроорганизма , , , , , 7. Благодаря наличию сложной и разветвленной системы кооперации между населяющими макроорганизм популяциями микроорганизмов, микроэкологическая система человека выступает, как единое целое, согласованно функционирующее как в интересах всей системы, так и организма хозяина, в котором она локализована , , , ,, 3. Особое внимание в последнее десятилетие уделяется изучению микробиоценоза желудочнокишечного тракта ЖКТ человека, особенно нормальной микрофлоре.