Усовершенствование методов индикации Francisella tularensis и leptospira interrogans с применением иммобилизованных систем

• Автор: Жарникова, Татьяна Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.07, 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Ставрополь
• Количество страниц: 163 с. : ил.

ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. Микробиологический мониторинг за возбудителями туляремии и лситоснироза, их индикация. Получение и исследование матриц для аффинной хроматографии и твердофазного иммуноанализа обзор литературы
1.1. Микробиологический мониторинг за возбудителями туляремии и лептоспироза, их индикация

1.1.1. Микробиологический мониторинг за возбудителем туляремии и его индикация

1.1.2. Микробиологический мониторинг за возбудителем лептоспироза и его индикация

1.2. Получение и исследование матриц для аффинной хроматографии и твердофазного имхмуноанализа

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

ГЛАВА 2. Материалы и методы

2.1. Штаммы микроорганизмов, взятые в работу

2.2. Питательные среды, условия культивирования микроорганизмов

2.3. Лабораторные животные, использованные в экспериментах

2.4. Получение антигенных комплексов микроорганизмов
2.5. Получение иммунных сывороток крови животных
2.6. Методы контроля антигенов и иммунных сывороток
2.7. Получение аффинных сорбентов и сорбция иммунных сывороток
2.8. Выделение иммуноглобулинов
2.9. Получение и контроль иммунофлуоресцирующих и иммуноферментных конъюгатов
2 Физикохимические методы
2 Лиофилизация биологического материала
2 Характеристика реагентов, используемых для получения иммобилизованных препаратов
2 Методы математической и статистической обработки материалов
ГЛАВА 3. Выявление возбудителен туляремии и лентоспнроза с использованием иммуноглобулинов флуоресцирующих, изготовленных с помощью бифункциональных сорбентов
3.1. Использование гетсрологичных антигенов микроорганизмов, иммобилизованных на различных матрицах, для повышения качества и специфичности лептоспирозных и туляремийных иммуноглобулинов флуоресцирующих
3.2. Приготовление высокоактивных, специфичных иммунофлуоресцирующих препаратов для выявления возбудителей туляремии и лептоспироза и совершенствование способов их очистки от несвязавшегося флуорохрома и гетерологичных антител
ГЛАВА 4. Оптимизация способов выявления возбудителей туляремии и лентоспнроза в реакции суспензионной агглютинации РСА с использованием иммобилизованных иммуноглобулинов
ГЛАВА 5. Совершенствование методов выявления возбудителей туляремии и лентоспнроза в объектах внешней среды е помощью бивалентных магнитоуправляемых твердофазных иммуносорбентов
5.1. Выявление возбудителя туляремии с использованием магнитоуправляемых твердофазных носителей
5.2. Отработка методов одномоментного селективного концентрирования возбудителей туляремии и лептоспироза на магпоиммуносорбентах
с последующей постановкой ИФА
5.3. Изучение диагностической ценности разработанных тестсистем с использованием в качестве твердой фазы бивалентных МИС
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ


Проведены межлабораторные испытания туляремийных МИС совместно с ЛБТК акт от г. ТУ 6. Материалы научных разработок легли в основу трех методических документов, утвержденных на учрежденческом уровне внедрения Лабораторная диагностика возбудителя лептоспироза протокол Учного совета СтавНИПЧИ от г. Индикация и идентификация возбудителя туляремии протокол Учного совета СтавНИПЧИ 5 от г. Критерии контроля качества экспериментальных серий тестсистемы диагностической магноиммуиосорбентной для выявления возбудителя туляремии имму ноферментным методом протокол Учного совета СтавНИПЧИ 5 от г Материалы методических рекомендаций по лабораторной индикации возбудителя лептоспироза вошли в методические документы по санитарноэпидемиологической охране территории Российской Федерации Саратов, . ТУ, лабораторный регламент, инструкция по применению на тестсистему диагностическую магноиммуносорбентную для выявления возбудителя туляремии в ИФА протокол Ученого совета СтавНИПЧИ 4 от г Материалы диссертации используются на курсах первичной специализации и усовершенствования врачей по особо опасным инфекциям, в лекциях и практических занятиях по экспрессиндикации и применению иммуносорбентных препаратов в мониторинге возбудителей туляремийной и лептоспирозной. ФГУЗ СтавНИПЧИ Роспотребнадзора. РСА с иммуносорбентом суспензионнофлуоресцентным позволяет выявлять . Основные результаты диссертационной работы были представлены на Московской международной конференции Биотехнология и медицина Москва, марта г. IV съезде общества биотехнологов России им. Ю.Л. Овчиникова Пущино, декабря г. Современные аспекты эпидемиологического надзора за особо опасными инфекционными заболеваниями на юге России Ставрополь, марта г. IX съезде научнопрактического общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов Москва, апреля г. IX Международной научной конференции и II Международной научной онкологической конференции Пермь. Нидерланды Германия Франция, апреля 2 мая г. VIII Межгосударственной научнопрактической конференции государствучастников СНГ Международные медикосанитарные правила и реализация глобальной стратегии борьбы с инфекционными болезнями в государствах участниках СНГ Саратов, г. Основное содержание диссертации, выполненной в рамках поисковой НИР Подбор новых лабораторных методов и препаратов для использования в мониторинге лентоспирозов в Ставропольском крае гг. ВАК РФ и рекомендованных для публикации основных научных результатов диссертации на соискание искомой научной степени. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, 3 глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка использованной литературы, приложения. Работа изложена на 3 страницах компьютерного текста, содержит таблицы и рисунков. Список использованной литературы включает 3 отечественных и зарубежных источников. ГЛАВА 1. Микробиологический мониторинг за возбудителями туляремии и лептоепироза, их индикация. Туляремия, лептоспироз природноочаговые инфекции, широко распространенные на территории Российской Федерации. РгапачеПа НагетБ представляет собой кокковидную бактерию очень мелких размеров 0,3 0,5 мкм. Хорошо окрашивается анилиновыми красками. При окраске по Граму обесцвечивается. Туляремийный микроб весьма прихотлив к питательной среде. На обычном агаре и бульоне не растет, чем отличается от других микробов. Для размножения нуждается в добавочных факторах роста, поэтому к питательной среде добавляют кровь, лецитин, цистин. Особенности антигенного состава туляремийного микроба являлись предметом внимания многих исследователей. Н.Г. Олсуфьев и И. С. Мещерякова выделили три географических подвида туляремийного микроба. В настоящее время род Ргапсзеа включает два вида Р. Р. рИНотгаа, а вид Г. ШагетБ представлен четырьмя подвидами Р. ШагепБз яиЬ. Неарктический, Р. ШагетБ зиЬяр. Р. Шагетя яиЬзр. РаИса и Р. Нагетх яиЬхр. Неарктические штаммы ферментируют глицерин, обладают цитруллинуреидазной активностью, высоко патогенны для домашних кроликов и человека среднеазиатские штаммы Р.