Экспериментальные подходы к разработке противотуберкулезной вакцины на основе дендритных клеток

• Автор: Петровская, Светлана Николаевна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 101 с. : 5 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1. Введение

2. Типы современных противотуберкулезных вакцин, их преимущества 14 и недостатки.

2.1. Вакцина BCG

2.2. Цельноклеточные вакцины

2.3. Субъединичные вакцины

2.4. ДНК-вакцины

3. Дендритные клетки и их роль в иммунитете против туберкулёза

3.1. Фагоцитоз и размножение М. tuberculosis в дендритных клетках
3.2. Распознавание М. tuberculosis Toll-like рецепторами
3.3. Влияние М. tuberculosis на созревание дендритных клеток
3.4. Роль ДК в индукции адаптивного иммунного ответа на 28 М. tuberculosis.
3.5. Изучение роли ДК при туберкулёзе in vivo. ЗО
4. Разработка новых противотуберкулёзных вакцин на основе ДК

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
1. Выращивание дендритных клеток in vitro
2. Способность дендритных клеток, выращенных in vitro, 51 стимулировать пролиферативный ответ Т-клеток.
3. Сравнение функциональной активности дендритных клеток, 53 выращенных в присутствии эмбриональной телячьей сыворотки
(ЭТС) и мышиной сыворотки (МС), in vivo.
4. Сравнительная фенотипическая характеристика дендритных клеток, 56 выращенных в присутствии мышиной (МС) и эмбриональной телячьей (ЭТС) сыворотки.
5. Продукция цитокинов дендритными клетками, выращенными в 64 присутствии мышиной сыворотки (МС) и эмбриональной телячьей сыворотки (ЭТС).
6. Протекция против туберкулёзной инфекции при вакцинации ДК
ОБСУЖДЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ
АПК - антигенпрезентирующая клетка
БСА - бычий сывороточный альбумин
ВИЧ - вирус иммунодефицита человека
ДК - дендритные клетки
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
ИЛ - интерлейкин
ИФН-у - интерферон гамма
КИ - клеточный иммунитет
КОЕ - колониеобразующая единица
ЛАМ - липоарабидоманнан
ЛПС - липополисахарид
МС - мышиная сыворотка
мРНК - матричная рибонуклеиновая кислота
ЭДТА - этилендиаминтетраацетат
ЭТС - эмбриональная телячья сыворотка
ABTS - 2,2’ -азино-бис(3-этилбензотиазолин-6-сульфоновая кислота) диаммония соль (2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt)
Ag - антиген (antigen)
APC - аллофикоцианин (allophycocyanin)
BCG - бацилла Кальметта-Герена (bacillus Calmette-Guerin)
CCL - хемокин (chemokine ligand)
CCR - рецептор хемокинов (chemokine receptor)
CD - дифференцировочный антиген лейкоцитов (cluster of differentiation)

клетками требует на порядок меньше времени для индукции эффективной защиты.
С другой стороны, вакцинация ДК, нагруженными антигенами микобактерий, даёт менее впечатляющие результаты. В одной из работ были синтезированы пептиды, соответствующие N-концам восьми белков М. tuberculosis и начинающиеся с остатков формил-метионина [Dow S. W. et al., 2000]. Этими пептидами, связывающимися с мышиными неклассическими молекулами MIIC I класса Н-2МЗа, были нагружены ДК, которые затем ввели в нормальную мышь. Была показана индукция специфического цитотоксического Т-клеточного иммунного ответа, а также задержка роста микобактерий после аэрозольного заражения. McShane и др. иммунизировали мышей внутривенно ДК, нагруженными СЕ)4+-рестриктированным, С08+-рестриктированным и обоими эпитопами белка М. tuberculosis (антиген 85 A) [McShane Н. et al., 2002]. Интересно, что при последующем внутривенном заражении вирулентными М. tuberculosis, для защиты была необходима одновременная презентация обоих эпитопов. Также была проведена вакцинация через слизистые оболочки мышей: ДК, выделенные из легких, нагружали антигеном 85 и вводили животным интраназально [Gonzalez-Juarrero М. et al., 2002]. После вакцинации спленоциты таких животных продуцировали ИФН-у при инкубации клеток ex vivo с нагруженными М. tuberculosis ДК. При изучении гистологии лёгких этих животных был обнаружен ярко выраженный воспалительный ответ с инфильтрацией большим числом макрофагов, ДК, CD4+- и С08+-Т-клеток. Не смотря на способность нагруженных антигенами ДК вызывать сильный Т-клеточный ответ in vivo, протективный эффект при экспериментальной туберкулезной инфекции отсутствовал совсем [Gonzalez-Juarrero М. et al., 2002],