Тамм-Хорсфалл протеин у детей, страдающих сахарным диабетом 1-го типа с сопутствующей кандидозной инфекцией

• Автор: Миленина, Ольга Евгеньевна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 0 с. : 102 ил.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Общая характеристика ТаммХорсфалл протеина

1.2. Структура ТаммХорсфалл протеина.

1.3. Способы идентификации и выделения ТаммХорсфалл протеина

1.4. Роль ТаммХорсфалл протеина в развитии восходящей уроинфекции.

1.5. Перекрстные реакции между ТаммХорсфалл протеином и бактериальными антигенами

1.6. Биологическая роль ТаммХорсфалл протеина

1.7. Исследование ТаммХорсфалл протеина на мышиных моделях

1.8. Патогенетическое значение ТаммХорсфалл протеина

1.8.1. Количественное содержание ТаммХорсфалл протеина в норме и при патологии.

1.8.2. Антителопродукция к ТаммХорсфатл протеину.
1.8.3. Возрастная зависимость антителообразования к ТаммХорсфалл протеину
1.8.4. Антителопродукция к ТаммХорсфалл протеину при патологических состояниях почек
1.9. Иммуностимулирующая активность ТаммХорсфалл протеина
1 Поражение почек при сахарном диабете 1 типа.
1 i i как условнопатогенный микроорганизм.
1 Сахарный диабет как фактор риска развития кандидозной инфекции
1 Феномен транслокации и его место в патогенезе кандидозной инфекции.
1 Антигены i i.
1 Методы выделения поверхностных антигенов i i белковой природы.
1 Проблемы диагностики кандидоза на современном этапе
ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Объект исследования
2.1.1. Общая характеристика наблюдавшихся больных
2.1.2. Характеристика больных сахарным диабетом 1 типа.
2.1.3. Характеристика детей групп сравнения
2.1.4. Экспериментальные животные
2.2. Материалы
2.2.1. Реактивы
2.2.2. Характеристика используемого в работе штамма С. i
2.2.3. Питательные среды.
2.2.4. Оборудование
2.3. Методы
2.3.1. Получение ТаммХорсфалл протеина из мочи
2.3.2. Получение иммунной сыворотки на ТаммХорсфалл протеин.
2.3.3. Получение эритроцитарного диагностикума на ТаммХорсфалл протеин.
2.3.4. Культивирование С. i
2.3.5. Изучение морфологических и культуральных свойств С. i
2.3.6. Получение антигенов С. i.
2.3.7. Получение иммунных сывороток на антигены С. i
2.3.8. Получение диагностикумов на основе антигенов С. i
2.3.9. Реакция пассивной гемагглютинации
2.3 Реакция торможения пассивной гемагглютинации.
2.3 Реакция нейтрализации антител РНАТ.
2 3 Реакция преципитации в геле
2.3 Иммуноэлектрофорез
2.3 Статистическая обработка полученных данных
Глава Ш. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Клиническое обследование детей, страдающих сахарным диабетом I типа на этапе отбора
3.2. Клиническое обследование детей групп сравнения на этапе отбора
3.3. Изучение специфичности сывороток на ТаммХорсфалл протеин
3.4. Исследование диагностической тестсистемы для определения ТаммХорсфалл протеина
3.5. Изучение специфичности сывороток на поверхностный и секретируемый антигены .i
3.6. Исследование активности тестсистемы на основе поверхностного и секретируемого антигенов .i
3.7. Исследование перекрестных реакций между ТХП и антигенами .i
3.8. Изучение антителопродукции к ТаммХорсфалл протеину у детей в исследуемых группах
3.9. Изучение иммунного ответа на белковые антигены .i у детей, страдающих сахарным диабетом 1 типа
3 Изучение корреляции между титрами антител к ТаммХорсфалл протеину и уровнем антител к белковым антигенам .i в исследуемых
группах
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Большая социальная значимость сахарного диабета состоит в том. Среди поздних осложнений сахарного диабета первое место по частоте занимают сосудистые ангиопатии, в частности, диабетическая нефропатия Современные методы исследования позволяют диагностировать диабетическую нефропатию только на стадии микроальбуминурии. Однако, по всей видимости, микроальбуминурия не относится к числу самых ранних симптомов, свидетельствующих о поражении почек. Основанием для такого предположения является указание на существование у больных сахарным диабетом гиперфильтрации и гиперперфузии, предшествующих микроальбуминурии, которые, как известно, сопровождаются повышением внутриклубочкового давления Дедов И. И., Шестакова М. В., . Внутриклубочковая гипертензия способна привести к поражению эпителия клубочков, а в последующем, и эпителия канальцев. В настоящее время поражение почки на стадии гиперфильтрации может документироваться данными, полученными только при биопсии почки. Поэтому, крайне актуальным является создание малоинвазивных методов и тестсистем ранней диагностики поражения почек при сахарном диабете на доклинической стадии заболевания. В этом плане внимание привлекает белок ТаммаХорсфалла, представляющий собой гликопротеин, синтезирующийся эпителиальными клетками проксимальных канальцев восходящей петли Генле и являющийся специфическим почечным антигеном. Майданник В. Г., Дранник Г. Н., . Превышение концентрации антител фонового уровня к указанному протеину может свидетельствовать о вовлечении в патологический процесс почечных канальцев. Белок ТаммаХорсфалла у больных сахарным диабетом, особенно у больных сахарным диабетом 1 типа, привлекает внимание и в связи с имеющимся предположением возможности существования перекрстных реакций этого протеина с антигенами i i, поскольку указанный контингент пациентов склонен к развитию кандидозной инфекции. Возможность развития перекрстных реакций ТаммХорсфалл протеина с антигенами С. С. i. Хотя физиологическая роль ТаммХорсфалл протеина до конца не ясна, наличие в его составе высокоманнозных остатков способствует связыванию ТаммХорсфалл протеина с пнлями первого типа ii , чем он препятствует распространению восходящей уроинфекции Рак . Это обстоятельство, а также существование перекрстных реакций между Оантигеном Е. И и ТаммХорсфалл протеином представляет интерес для исследования ТаммХорсфалл протеина у больных острым и хроническим пиелонефритом. Цель исследования выяснение роли ТаммХорсфалл протеина у детей, страдающих сахарным диабетом 1 типа с сопутствующей кандидозной инфекцией. Разработать диагностические тсстсистемы для выявления антител к ТаммХорсфалл протеину и к антигенам С. В связи с тем, что С. Провести сопоставление общности антигенной структуры ТаммХорсфалл протеина и кандидозных антигенов. Изучить специфичность разработанных тестсистем и определить диагностический титр антител. Провести сравнительное изучение синтеза антител к ТаммХорсфапл протеину, поверхностным и секретируемым антигенам С. Создана диагностическая тестсистема для определения ТаммХорсфалл протеина и антител к этому белку, по специфичности превышающая зарубежные аналоги. Предложен комплекс диагностикумов, позволяющий контролировать изменение популяции грибов рода i в динамике микотической инфекции. Впервые установлено, что у детей при сахарном диабете 1 типа возрастает уровень антител к почечноспецифическому антигену ТаммХорсфалл протеину и определн уровень антител, который следует рассматривать как маркр доклинической стадии диабетической нефропатии. Выявлена общность антигенов С i и ТаммХорсфалл протеина. Исследование иммунного ответа на антигены агрессии С. Разработанная нами тестсистема для определения уровня антител к ТаммХорсфалл протеину может быть использована для ранней диагностики поражения почек у детей при сахарном диабете 1 типа. Повышение титра антител к ТаммХорсфалл протеину у детей с пиелонефритом следует считать показателем поражения канальцевого аппарата почек, что может использоваться при дифференциальной диагностике пиелита и пиелонефрита.