Научно-производственная разработка новых препаратов-синбиотиков и клинико-лабораторная оценка их эффективности

• Автор: Амерханова, Аделаида Михайловна
• Шифр специальности: 03.00.07, 03.00.23
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 280 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.
ГЛАВА 1. Роль микрофлоры ЖКТ в жизнеобеспечении человека и методы коррекции ее нарушений в свете современных знаний обзор
литературы.
1.1 .Качественный и количественный состав микрофлоры ЖКТ и функции, которые она выполняет.

1.2.Последствия нарушений микробиоты ЖКТ и способы ее

коррекции.

1.3. Свойства бифидобактерий и процесс становления бифидофлоры ЖКТ в онтогенезе.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Материалы.

2.1.1. Штаммы микроорганизмов, используемые в работе.

2.1. 2. Питательные среды
2.2. Методы исследования.
2.2.1. Метод выделения чистой культуры бифидобактерий
2.2.2. Метод биохимической идентификации бифидобактерий
2.2.3. Молекулярно генетическое типирование бифидобактерий
2.2.4. Определение чувствительности к антибиотикам дискодиффузионным методом
2.2.5. Определение антагонистической активности
2.2.6. Определение безвредности бактериальных культур штаммов бифидобактерий и лактобацилл.
2.2.7. Активация культуры при подготовке к культивированию.
2.2.8. Метод глубинного культивирования
2.2.9. Определение числа жизнеспособных бифидобактерий и лактобацилл методом конечных разведений
2. 2 Количественное определение ацидофильных лактобацилл
2.2 Контроль микробной культуры препарата на наличие посторонней микрофлоры.
2.2 Изучение морфологии клеток
2.2 Определение активности кислотообразования.
2.2 Сушкагранулирование в псевдоожиженном слое ПС.
2.2 Распылительная сушка с низкой температурой
теплоносителя
2.2 Статистические методы обработки материалов исследований
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.
ГЛАВА 3. Выделение, изучение и отбор производственноперспективных штаммов
3.1. Изучение морфологических свойств.
3.2.Изучение биохимических свойств
3.3 Идентификация молекулярнобиологическими методами
3.4. Изучение чувствительности к антибиотикам
3.5. Изучение антагонистических свойств.
3.6.Изучение культуральных свойств
ГЛАВА 4. Изучение динамики глубинного культивирования бифидобактерий с целью их производственного использования
4.1.Изучение динамики культивирования отдельных культур.
4.2.Изучение динамики культивирования бифидобактерий в составе многовидовой ассоциации
4.3. Изучение пребиотических свойств растворимых пищевых волокон
4.3.1. Изучение пребиотических свойств топинамбура.
4.3.2. Изучение пребиотических свойств цикория и смолы
акации.
ГЛАВА 5. Разработка режимов новых методов обезвоживания бифидобактерий распылительного высушивания при низкой температуре теплоноситеноеителя и сушкигранулирования в исевдоожиженном слое.
5.1. Изучение отдельных технологических параметров распылительной сушки при низкой температуре теплоносителя
5.1.1. Изучение влияния фазы развития культуры на качество целевого продукта
5.1.2. Изучение влияния состава питательной среды на качество целевого продукта
5.1.3. Оценка выживаемости бифидобактерий в сухих препаратах
5.1.4. Влияние пектина на результаты хранения препаратов
5.2. Разработка методических подходов к высушиванию пробиотических микроорганизмов сушкойгранулирования в псевдоожиженном слое
5.2.1. Влияние состава среды на процесс сушки и качество конечного продукта
5.2.2. Влияние защитных сред на эффективность процесса сушки и качество конечного продукта
5.2.3. Сравнительное изучение влияния различных носителей на процесс сушки и качество конечного продукта.
ГЛАВА 6. Разработка рецептуры и технологической документации препаратов еннбиотиков.
6.1. Серия биологически активных добавок к пище БифидумМульти.
6.2.Серия биологически активных добавок к пище Нормоспектрум
ГЛАВА 7. Результаты изучения эффективности препаратовеннбиотиковбиологически активных добавок к пище БифидумМульти и Нормоспектрум при использовании в профилактической и восстановительной медицине
7.1. Изучение эффективности и безопасности Нормоспектрум и БифидумМульти3 у взрослых с вторичными дисбиозами
7.2. Изучение корригирующего влияния на микрофлору ЖКТ детей сиибиотиков БифидумМульти1 и ЬифидумМульти2.
7.3. Изучение корригирующего влияния па микрофлору ЖКТ детей синбиотика Нормоспектрум для детей.
7.4. Результаты применения БАД БифидумМульти1 у детей первого года жизни с нарушениями микроэкологического и функционального состояния ЖКТ.
7.5. Применение БАД БифидумМульти2 и Нормоспектрум для детей в детских дошкольных учреждениях с целью профилактики заболеваемости у часто болеющих детей
7.6. Результаты профилактики эндогенных и экзогенных инфекций в неонатологии с применением БифидумМульти
7.7. Использование БАД Нормоспектрум для взрослых для профилактики госпитальных гнойносептических осложнений у больных с колоректальным
раком.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ


Вот неполный перечень известных и потенциальных аутоиндукторов пробиотических бактерий лактоны, пептидные феромоны, индукторы I включая фураноны, летучие жирные кислоты и другие органические кислоты, определенные группы ферментов лактоназы, гликозидазы, стрессовые белки, белки и пептиды, имитирующие сигнальные молекулы эукариотических клеток, некоторые аминокислоты глутамат, бетааланин, витамины биотин, амины гистамин, серотонин и полиамины спермин, спермилин, некоторые полисахариды, пептидогликаньт, липотейхоевая кислота, антимикробные агенты бактериоцины, оксид азота, лектины, биосурфактанты 7, 8, 9, 8. Характеризуя действие некоторых из приведенного перечня классов веществ, можно сказать, что к ведущим факторам регуляции взаимоотношений микробиотамакроорганизм относятся короткоцепочечные или летучие жирные кислоты. Это продукт микробной ферментации углеводов, жиров и белков анаэробными бактериями индигенной микрофлоры человека 8,. Эффекты от их действия представлены в таблице 1. В.М. В адгезию, колонизацию, образование микробиоценозных пленок нередко вовлекаются лектины, а также внутри и внеклеточные лектины и лектиноподобные белки и их комплексы. Они могут вовлекаться в узнавание Тлимфоцитов, взаимодействуют с тромбоцитами крови, макрофагами, в результате чего могут запускаться механизмы иммуномодуляции, регуляции свертывания крови, митогенеза клетокмишеней, других каскадных систем крови, тканей, органов и организма с вовлечением сети цитокинов. Регуляция роста микроорганизмов в организме хозяина также регулируется белокуглеводными взаимодействиями лектинового и лектиноподобного типов. К лектинам относятся, например, компоненты лактобацилл и бифидобактерий в составе их клеточных стенок 7, 8. Наиболее значимыми для реализации антагонистической активности считаются бактериоцины и бактериоциноподобные вещества, продуцируемые бифидо и лактобактериями, стрептококками и другими представителями нормофлоры. Механизм их действия напоминает таковой для многих антибиотиков от ограничения синтеза белков до лизиса клеточных стенок , 9, 5, 8. При этом бактериоцины отличает избирательность действия они не задерживают рост и развитие лактобацилл, сапрофитных кишечных палочек и бифидобактерий. Основным продуктом метаболизма лактобацилл является молочная кислота, а бифидобактерий уксусная и молочная. Было показано, что антимикробная активность зависит не столько от величины , сколько от совместного присутствия молочной, уксусной и пропионовой кислот, вырабатываемых бифидо и лактобактериями 5. УБ, но и некоторых видов дрожжей и патогенных грибов. При этом не затрагивается кислотоустойчивая микрофлора. Микробиота имеет множество составляющих биотопов. Под биотопом принято понимать участок слизистой оболочки, кожи или органа макроорганизма с однотипными условиями существования микроорганизмов , , , , 0, 4, 3, 1. Микробные сообщества совокупность микроорганизмов разных родов и видов образуют биоценоз определенного биотопа и вместе с орпшизмом хозяина формируют постоянные или временные микроэкосистсмы . При такой множественности и видимой самостоятельности нормофлора человеческого организма единая система и входящие в нее экосистемы кожи, дыхательных путей, пищеварительной, мочевыводящей и половой систем находятся во взаимодействии и в то же время в соподчинении с главным звеном этой системы микробиоценозом желудочнокишечного тракта 1 . Микроэкологическая система желудочнокишечного тракта является открытой микроэкологической нишей организма, играет роль биосорбснта, поддерживая постоянную связь с внешней средой 4. В результате как филогенетического развития, так и в онтогенезе все его отделы колонизированы различными микроорганизмами. Это наиболее сложная по составу составляющая микроэкологической системы человеческого организма 4, , , , , , 1 , 1, 4, 9, 5. Согласно современным представлениям, основу нормальной микрофлоры человека составляют облигатные анаэробные бактерии 8, 9. Соотношение анаэробной и аэробной частей составляет 1 7. Концентрация микробных клеток, их состав и соотношение меняется в зависимости от отдела кишечника. У здоровых людей в двенадцатиперстной кишке количество бактерий составляет не более КОЕ в мл содержимого.