Стимуляция иммуногенных и протективных свойств антигенов возбудителя мелиоидоза цитокинами

• Автор: Демьянова, Ольга Борисовна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Саратов
• Количество страниц: 108 с. : 8 ил.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 Антигены ВигкскоШепа ряеис1ота и перспективы разработки на их основе препаратов для специфической профилактики мелиоидоза .
1.2 Общее представление в системе цитокинов. Цитокины в патогенезе мелиоидозной инфекции

1.3 Рекомбинантные цитокины применение в инфекционной патологии

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1 Штаммы буркхольдерий, питательные среды.

2.2 Антигенные комплексы

2.3 Экспериментальные животные

2.4 Перевиваемые клеточные линии, инфузории.
2.5 Методы получения лимфокинов и монокинов.
2.6 Методы изучения биологической активности лимфокинов и монокинов.
2.7 Препараты рекомбинантных цитокинов1
2.8 Оценка иммуногенности и протсктивности антигенов
2.9 Статистическая обработка результатов
Глава 3. ЦИТОКИНИНДУЦИРУЮЩАЯ АКТИВНОСТЬ АНТИГЕННЫХ КОМПЛЕКСОВ ВОЗБУДИТЕЛЯ МЕЛИОИДОЗА.
3.1 Тестирование токсичности антигенов на разных типах клеток
3.2 Биологическая активность монокинов и лимфокинов.
3.3 Иммуногенные, иммунотропные и цитокининдуцирующие свойства антигенов и их взаимосвязь с протективностью
Глава 4. ВЛИЯНИЕ МОНОКИНОВ И ЛИМФОКИНОВ НА ИММУНОГЕННЫЕ И ПРОТЕКТИВНЫЕ СВОЙСТВА МЕЛИОИДОЗНЫХ АНТИГЕНОВ.
4.1 Динамика иммунного ответа на мелиоидозные антигены при совместной иммунизации с лимфокинами и монокинами
4.2 Протективные свойства мелиоидозных антигенов при изолированном и совместном с лимфокинами и монокинами применении
Глава 5. СТИМУЛЯЦИЯ ИММУНОГЕННЫХ И ПРОГЕКТИВНЫХ СВОЙСТВ МЕЛИОИДОЗНЫХ АНТИГЕНОВ РЕКОМБИНАНТНЫМИ ЦИТОКИНАМИ.
5.1 Влияние рекомбинантных цитокинов на первичный и втори
ный иммунный ответ к мелиоидозным антигенам.
5.2 Воздействие рекомбинантных цитокинов на иммунотропные свойства мелиоидозных антигенов
5.3 Протективность мелиоидозных антигенов при их совместном применении с рекомбинантными цитокинами
5.4 Подбор оптимальной схемы стимуляции иммуногенных и протективных свойств мелиоидозных антигенов коммерческими препаратами рекомбинантных цитокинов.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Изучены количественные показатели различных цитокинов при остром и хроническом экспериментальном мелиоидозе у мышей, показана взаимосвязь высоты бактериемии с пиком продукции цитокинов. Многие исследователи указывают на важную роль цитокинов, отвечающих за формирование клеточного иммунитета, в патогенезе мелиоидоза 4, 0, а также ранних провоспалительных цитокинов 2, 7. Однако, следует заметить, что все имеющиеся работы по изучению цитокинов при мелиоидозе посвящены их значению в инфекционном процессе, в то время как публикаций о влиянии цитокинов на иммуногенные и протективные свойства мелиоидозных антигенов в процессе иммунопрофилактики инфекции в доступной литературе нам обнаружить не удалось. Кроме того, достаточно важным, с научной и практической точки зрения, является изучение корреляционных связей между способностью мелиоидозных антигенов индуцировать продукцию определенных цитокинов и их протективными свойствами. Данное направление в изучении свойств антигенов В. Цель работы повышение иммуногенных и протективных свойств антигенов В. Разработать схему применения рекомбинантных цитокинов для стимуляции первичного и вторичного иммунного ответа к антигенам В. Впервые определена взаимосвязь между цитокининдуцирующей активностью антигенов буркхольдерий и их защитными свойствами, которая позволяет проводить скрининг протективных антигенов в клеточной системе i vi по биологической активности лимфокинов и монокинов, индуцированных антигенами. На основе выявленных закономерностей разработан новый способ оценки уровня протективности мелиоидозных антигенов на культуре клеток 9 по степени цитотоксической активности ФНОа монокинов, индуцированных антигенами i vi. Разработан новый чувствительный метод оценки токсичности мелиоидозных антигенов па инфузориях i по угнетению их выделительной функции, который характеризуется высокой чувствительностью, простотой, быстротой исполнения и возможностью регистрации токсического эффекта на физиологическом уровне. Данный метод позволяет быстро определять оптимальные дозы антигенов для индукции цитокинов i vi. Впервые показана возможность усиления иммуногенных и протективных свойств мелиоидозных антигенов с помощью лимфокинов и монокинов. Определена целесообразность применения монокинов для стимуляции первичного иммунного ответа, а лимфокинов вторичного, что обеспечивает адекватную стимуляцию механизмов неспецифической резистентности и специфического Тклеточного иммунитета. Впервые показана возможность повышения иммуногенных и протективных свойств мелиоидозных антигенов при их совместном применении с рекомбинантными цитокинами. Тклеточный иммунный ответ. Разработан новый способ повышения протективности мелиоидозных антигенов рекомбинантными цитокинами, основанный на применении ИФНу при первичной иммунизации антигенами и ИЛ2 при вторичной. Способ оценки токсичности бактериальных антигенов авторы Жукова С. И., Адельшин Ф. К., Храпова Н. П., Пивень . ., Прошина О. Б., Засядкина . ., Плеханова Н. Способ оценки уровня протективности мелиоидозных антигенов авторы Прошина О. Б., Жукова С. И., Храпова Н. П., Авророва И. В., Пивень . ., Ломова Л. В.. По матералам диссертации направлена в Роспатент заявка на изобретение Способ повышения протективности мелиоидозных антигенов цитокинами от 7 г. Жукова С. И., Демьянова О. Б., Авророва И. В., Алексеев В. В., Храпова Н. П., Ломова Л. В.. Методические рекомендации по изучению цитокининдуцирующей активности мелиоидозных антигенов утверждены директором института г. рецепторов на поверхности нейтрофилов под действием монокинов и уровень цитотоксической активности ФНОа монокинов на перевиваемой клеточной линии мышиных фибробластов 9. Предложенные методы позволяют проводить скрининг мелиоидозных антигенов на протективность без значительных временных и материальных затрат, связанных с иммунизацией и заражением животных при определении протективности в стандартном тесте активной зашиты на животных.