Разработка микробиологической питательной среды из утильного мясного сырья

• Автор: Калягина, Светлана Юрьевна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 133 с. : ил.

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Классификация питательных сред. Применение питательных сред со сниженным количеством белка.
1.2. Питательные среды, используемые для культивирования энтеробактерий, стафилококков, коринебактерий и дрожжевых грибов
1.3. Зависимость антигенного строения прихотливой культуры С. сНрЫИепае от состава питательного субстрата и других условий культивирования

1.4. Свойства бактериальных гидроксиламиновых антигенов

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Приготовление вариантов экспериментальной питательной среды из утильного мясного сырья, сред сравнения и изучение их физикохимических свойств

2.2. Изучение ростовых свойств экспериментальной и контрольной питательных сред.

2.3. Периодическое культивирование тестштамма С. сИрЫИа ше 9ох в экспериментальной среде
2.4. Получение гидроксиламинового дифтерийного антигенного препарата и
изучение его физикохимических и биологических свойств.
ГЛАВА 3. ПРИГОТОВЛЕНИЕ ВАРИАНТОВ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЫ ИЗ УТИЛЬНОГО МЯСНОГО СЫРЬЯ И ИЗУЧЕНИЕ ИХ ФИЗИКОХИМИЧЕСКИХ СВОЙСТВ.
3.1. Зависимость количества осаждаемых балластных веществ от времени аутолиза сырья.
3.2. Количественные изменения общего и аминпого азота в вариантах экспериментальной среды в зависимости от времени аутолиза.
3.3. Физикохимические характеристики трех вариантов экспериментальной
питательной среды
ГЛАВА 4. СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ РОСТОВЫХ СВОЙСТВ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ И КОНТРОЛЬНОЙ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД
4.1. Морфологические, тинкториальные, физиологобиохимические свойства тестштаммов при культивировании на экспериментальной и контрольной средах.
4.2. Токсигенные свойства штаммов С.сИрШИспае, пассированных на экспериментальной и контрольной средах
ГЛАВА 5. ПЕРИОДИЧЕСКОЕ КУЛЬТИВИРОВАНИЕ ТЕСТШТАММА С. ШРНТНЕШЛЕ 9ТОХ В ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ СРЕДЕ И ПОЛУЧЕНИЕ ГИДРОКСИЛАМИНОВОГО ДИФТЕРИЙНОГО АНТИГЕННОГО ПРЕПАРАТА
5.1. Выбор оптимального режима периодического культивирования тестштамма С сИрЫИепае 9ох в экспериментальной среде.
5.2. Периодическое культивирование тестштаммов дифтерийных бактерий в оптимальных условиях и получение из клеток антигенных препаратов с помощью гидроксиламина гидрохлорида
ГЛАВА 6. ИЗУЧЕНИЕ ФИЗИКОХИМИЧЕСКИХ И БИОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ АНТИГЕННОГО ПРЕПАРАТА, ПОЛУЧЕННОГО ИЗ БИОМАССЫ ТЕСТШТАММА С. В1РНТНЕШАЕ 9ТОХ .
6. 1. Физикохимические свойства дифтерийного антигенного препарата
6.2. Биологические свойства дифтерийного антигенного препарата.
ГЛАВА 7. СХЕМА ПРИГОТОВЛЕНИЯ И КОНТРОЛЯ РАЗРАБОТАННОЙ
ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЫ
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


О. , минимальные потребности в субстратах для роста П. Шйетические среды широко используют при исследованиях в области физиологии микроорганизмов. Так, выращивая i Ту2 на синтетической глюкозосолевой среде, изучали фазы роста в процессе периодического культивирования. Установлено, что во время экспоненциальной фазы при постоянной скорости роста изменяются физиологические свойства клеток, их размер и содержание в них макромолскулярных соединений. Во время экспоненциальной фазы при нарастании плотности популяции происходит значительное снижение удельной скорости потребления глюкозы и интенсивности потребления кислорода микробными клетками 7. Жданова Л. Г. с соавторами определила также условия формирования наиболее выраженных иммуногенных свойств и максимального синтеза антигенов . Изучение процессов глубинного культивирования ii iiii на синтетической питательной среде позволило установить закономерности потребления аминного азота и глюкозы, а также накопления белка и группоспецифического полисахарида 2, , . Сконструированная среда содержала набор основных солей, витамины, цистеин, глутатион и смесь из дополнительных аминокислот. Установлено, что легионеллы не используют глюкозу и полисахариды источниками энергии служат аминокислоты серии, треонин, гистидин, тирозин и триптофан. Хелаторы, тиогликолят, Твин полностью подавляли рост микроорганизмов. Морфология и продукция антигенов . Однако не всегда при выращивании па синтетических средах сохраняются типичные морфологические и физиологобиохимические свойства микроорганизмов. Так, при изучении влияния условий культивирования на рост и пигментацию i экспериментально установлено, что культуры 5. Наибольший прирост биомассы и максимальное образование пигмента отмечено на среде с пептоном и глицерином 4. Кроме того, на син тетических средах часто не удается получить достаточный выход биомассы микроорганизмов. Б этих случаях прибегают к использованию полусинтетических и сложных сред. Полусинтетические среды состоят из определенных химических компонентов с добавлением различных факторов роста, которые могут представлять собой витамины, пептиды, экстракты, аутолизаты, пуриновые и пиримидиновые основания 1. Показана возможность культивирования i i серогипа на полусинтетической пи тательной среде. Единственным источником аминокислот и нуклеозидов служил аминопептид, источником углерода глюкоза, факторами роста витамины . Количество антигена, выделенного в среду, не отличалось от его количества на контрольной среде. Грубер И. М., Королвой И. С., Мельниковой В. Л. и др. ЭКД . Интересно отметить, что надлежащее качество среды обеспечивает только гидролизат казеина средней степени расщепления. Микробиологические среды, питательной основой которых служат белковые гидролизаты, обеспечиващие приемлемые условия выращивания микроорганизмов, могут содержать сниженное количество аминного азота от 0,4 до 1, 6. При изучении возможности культивирования i на средах с ферментативным гидролизатом ФГ хлореллы установлено, что существует зависимость накопления биомассы Р. В то же время, образование пигмента пиоцианина было более эффективным на экспериментальных средах при сниженном количестве аминного азота по сравнению с контрольными средами. В качестве контроля применяли бульон и агар Хоггингера с содержанием аминного азота 1,,5 . При получении антигенов состав питательной среды оказывает существенное влияние на качество препаратов. Поэтому с помощью режимов биотехнологии можно проводить направленный синтез ан тигенных комплексов 1. Например, при изготовлении вакцинных препаратов против бактериальной дизентерии применяли штамм . КЗ, с учетом трофических особенностей которого конструировали питательную среду, обогащенную пептидами и олигосахаридами со сниженным содержанием аминного азота 0,8. Экспериментальную среду использовали для стандартизации посевного материала, затем для периодического культивирования и получения биомассы. Авторами установлено, что среда Хогтингсра и среда на основе поджелудочной железы менее эффективны для подготовки инокулята.