Разработка лабораторных экспресс-методов и технологии производства иммунодиагностических препаратов для выявления возбудителей листериоза и кампилобактериоза

• Автор: Алиева, Елена Васильевна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 237 с. : 7 ил.

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. КИШЕЧНЫЕ ЗООАНТРОПОНОЗЫ

КАМПИЛОБАКТЕРИОЗ И ЛИСТЕРИОЗ СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ ПРОБЛЕМЫ обзор литературы

1.1. Камиилобактериоз и кампилобактерии.

1.2. Листериоз и листерии.

1.3. Экология кампилобакгерий и листерий и пути их передачи

1.4. Современное состояние лабораторной диагностики листериоза и кампилобактериоза и е особенности .
1.5. Заболеваемость острыми кишечными инфекциями и листсриозом на территории Ставропольского края

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Штаммы микроорганизмов, использованные в опытах.

2.2. Питательные среды

2.3. Химические реактивы, использованные в опытах
2.4. Аппаратное оснащение исследований
2.5. Объекты исследований.
2.6. Лабораторные животные, использованные в экспериментах
2.7. Методы контроля антигенов и сывороток
2.8. Выделение иммуноглобулинов.
2.9. Получение и контроль иммунофлуоресцирующих конъюгатов.
2 Получение и контроль иммуноферментных конъюгатов
2 Физикохимические методы.
2 Лиофилизация биологического материала
2 Характеристика реагентов, используемых для получения магноиммуносорбентов
2 Методы математической и статистической обработки материалов
Глава 3. РАЗРАБОТКА ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД ДЛЯ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ КАМПИЛОБАКТЕРИОЗА И ЛИСТЕРИОЗА.
Глава 4. РАЗРАБОТКА БИОТЕХНОЛОГИИ ПОЛУЧЕНИЯ ЛИСТЕРИОЗНЫХ И
КАМПИЛОБАКТЕРИОЗНЫХ ДИАГНОСТИКУМОВ ДЛЯ РЕАКЦИИ АГГЛЮТИНАЦИИ РА И РЕАКЦИИ
ГЕМАГГЛЮТИИАЦИИ РИГА
4.1. Получение диагностических поливалентных агглютинирующих сывороток
4.2. Получение ди агностику мов полигрупповых цветных листериозного и кампилобактериозного для реакции агглютинации
4.3. Разработка биотехнологии приготовления эритроцитарных листериозного и кампилобактериозного ди агностику мов.
Глава 5. КОНСТРУИРОВАНИЕ И ХАРАКТЕРИСТИКА ЛИСТЕРИОЗНЫХ И КАМПИЛОБАКТЕРИОЗНЫХ ПОЛИГРУППОВЫХ ИММУНОГЛОБУЛИНОВЫХ КОНЪЮГАТОВ
5.1. Получение гипериммунных сывороток и специфических иммуноглобулинов
5.2. Получение диагностических флуоресцирующих иммуноглобулинов.
5.3. Получение диагностических иммуноглобулинов
для иммунофермеитного анализа.
Глава 6. РАЗРАБОТКА ТЕСТСИСТЕМ МАГНОИММУНОСОРБЕНТНЫХ ДЛЯ ЭКСПРЕССДИАГНОСТИКИ КАМПИЛОБАКТЕРИОЗА И ЛИСТЕРИОЗА В ИММУНОФЕРМЕНТНОМ АНАЛИЗЕ И КОЛИЧЕСТВЕННОЙ РЕАКЦИИ ИММУНОФЛУОРЕСЦЕНЦИИ .
6.1. Разработка биотехнологии кампилобактериозных
и листериозных магноиммуносорбентов.
6.2. Конструирование магноиммуносорбентных тестсистем для ИФА.
6.3. Разработка метода селективного концентрирования возбудителей кампилобактериоза и листериоза на магноиммуносорбенте с последующей постановкой количественного иммунофлуоресцснтного анализа КИФА
Глава 7. СТАБИЛИЗАЦИЯ СВОЙСТВ БИОЛОГИЧЕСКОГО СЫРЬЯ И ИММУНОГЛОБУЛИНОВЫХ ПРЕПАРАТОВ. РАЗРАБОТКА СИСТЕМЫ КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВА СЫРЬЯ И ГОТОВОЙ ПРОДУКЦИИ. ИЗУЧЕНИЕ ДИАГНОСТИЧЕСКОЙ ЦЕННОСТИ МИБП
7.1. Сублимация Иммунобиологических препаратов и биологического сырья для их производства
7.2. Разработка системы контроля качества сырья и
готовой продукции при производстве МИБП
7.3. Изучение диагностической ценности сконструированных МИБП ,
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
выводы
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Хотя некоторыми авторами камнилобактериозные энтериты у женщин регистрировались в 1,5 раза чаще, чем у мужчин, большинство исследователей отмечают заметное преобладание среди больных этой патологией лиц мужского пола в 1, раза, причм наиболее отчтливо эта закономерность проявляется именно в младшей возрастной группе дети до 3 лет. Как многим кишечным заболеваниям, кампилобактериозам свойственна выраженная летнеосенняя сезонность с почти полным отсутствием случаев инфекции в зимние месяцы. Пик заболеваемости приходится на июльавгуст. Так, наибольшее число больных этими энтеритами было зарегистрировано в летние месяцы в Великобритании, Швеции, Испании, Малайзии, а также на территории России. В среднем, частота выделения данных возбудителей от больных ОКИ, по результатам различных исследований, увеличивается в этот период года в 2, раз. Из общего числа выявленных больных с кампилобактериозными энтеритами доля лиц, заболевших в период сезонного подъма, составляет ,5 Горелов А. В., Черкасский Б. Л., Минаев В. И., Александрова Н. Горелов , Воротынцева Н. В., . Однако, некоторые авторы отмечают наличие и так называемых зимних пиков инфекции, особенно в крупных городах. В.И. Минаевым и Б. Л. Черкасским с соавт. Москве и Московской обл. Камиилобактериозная инфекция по своим характеристикам относится к зооантропонозам. Возбудители стабильно обнаруживаются практически у всех видов теплокровных животных. Многие из них являются естественными резервуарами этих микроорганизмов. Данные многих исследований, в том числе и отечественных, однозначно подтверждают роль домашних животных крупного рогатого скота, свиней и, особенно, птицы в качестве источников камиилобактериозной инфекции i I. Особенно обсеменены этими микроорганизмами крупные животноводческие и птицеводческие комплексы. И хотя показатели поражнности популяций значительно варьируют, их уровень остатся высоким от до ,5 Кирик Д. Л., Шабловская Е. А., Кролевецкая . М. и соавт. Минаев В. И., Николаева Т. Смирнов В. Н. и соавт. Минаев В. И., Черкасский Б. Л., Волоховпч Т. Т. и др. Кирик Д. Л., Шабловская Е. А, Пинчук И. В. и соавт. Наиболее частым путм передачи кампилобактериозов общепризнанно считается пищевой, который реализуется посредством разнообразных факторов передачи. При изучении этого вопроса оказалось, что преобладание одних факторов над другими имеет довольно выраженные особенности в зависимости от региона. Ряд авторов i I. I . М., i. Другие исследователи наибольшее значение придают молочному фактору, особенно в случаях возникновения заболеваний у детей до 2 лет. Англии , М. Ы., , , США i М. Московской обл. Минаев В. И., Черкасский Б. Л., Волохович Т. Т. и др. Как фактор передачи данных возбудителей выступают также овощи и фрукты. Водный путь передачи инфекции реализуется сравнительно редко, именно им обусловлено возникновение в ряде стран крупных вспышек ОКИ данной этиологии . М., К. По поводу роли контактнобытового пути передачи этого возбудителя среди учных нет единого мнения, что частично объясняется трудностями в его доказательстве. Некоторые исследователи отводят этому пути даже меньшее значение, чем водному. Другие, наоборот, ставят его на второе место после пищевого по частоте возникновения заболеваний, особенно в случаях внутрисемейных вспышек . В целом, необходимо отметить, что возбудители кампилобактериозов играют важную роль в общей структуре ОКИ, и это диктует необходимость более пристального изучения данной инфекции. А поскольку диагностика кампилобактериозных диарей основывается исключительно на выделении культур микроорганизмов, важной задачей является широкомасштабное внедрение методик идентификации этих возбудителей. В настоящее время однозначно доказано, что в тех регионах, где проблеме кампилобактериозных инфекций уделяется достаточное внимание, где этот вопрос включн в национальные программы здравоохранения, а диареи данной этиологии подлежат обязательной официальной регистрации, ежегодно фиксируются десятки тысяч случаев этой инфекции. В том числе в нашей стране, на территориях, где проводится динамический мониторинг кампилобактериозной патологии, постоянно увеличивается число выявленных случаев этого заболевания. Так, в г. Москве и Московской обл. Вологде с 2,9 до 8.