Разработка и экспериментально-клиническое изучение микротестсистем для биохимической идентификации холерных вибрионов

• Автор: Матинова, Зумрият Гаджиевна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Махачкала
• Количество страниц: 181 с. : ил

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
1. Обзор литературы. СОВРЕМЕННЫЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ О БИОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВАХ ХОЛЕРНЫХ ВИБРИОПОВ И ИХ ИДЕНТИФИКАЦИИ

1.1. Таксономическое положение и биологические свойства

вибрионов

1.2. БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА

1.3. ТЕСТСИСТЕМЫ ДЛЯ БИОХИМИЧЕСКОЙ ИДЕНТИФИКАЦИИ

МИКРООРГАНИЗМОВ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ ПО ОБЗОРУ ЛИТЕРАТУРЫ

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ. РАЗРАБОТКА И ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОКЛИНИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ МИКРОТЕСТСИСТЕМ ДЛЯ УСКОРЕННОЙ БИОХИМИЧЕСКОЙ ИДЕНТИФИКАЦИИ ХОЛЕРНЫХ ВИБРИОНОВ

2.1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.2. ОБОСНОВАНИЕ НАБОРА БИОХИМИЧЕСКИХ ТЕСТОВ,
ВКЛЮЧЕННЫХ В МИКРОТЕСТСИСТЕМУ
2.3. РАЗРАБОТКА РЕЦЕПТУРНОГО СОСТАВ А
СУБСТРАТНОИНДИКАТОРНЫХ СРЕД ДЛЯ МИКРОТЕСТСИСТЕМ
2.4. ПОДБОР ОПТИМАЛЬНОЙ МИКРОБНОЙ НАГРУЗКИ
2.5. ИЗУЧЕНИЕ БИОХИМИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ХОЛЕРНЫХ
ВИБРИОНОВ С ПОМОЩЬЮ РАЗРАБОТАННЫХ МИКРОТЕСТСИСТЕМ
3. ИСПЫТАПИЕ МИКРОТЕСТСИСТЕМ НА ШИРОКОМ НАБОРЕ МУЗЕЙНЫХ и СВЕЖЕВЫДЕЛЕННЫХ ШТАММОВ ХОЛЕРНЫХ ВИБРИОПОВ
3.1. ОЦЕНКА ДИАГНОСТИЧЕСКОЙ ЦЕННОСТИ РАЗРАБОТАННЫХ
МИКРОТЕСТСИСТЕМ
3.2. ИЗУЧЕНИЕ БИОХИМИЧЕСКИХ СВОЙСТВ СВЕЖЕВЫДЕЛЕННЫХ
ШТАММОВ ХОЛЕРНЫХ ВИБРИОНОВ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ
МТСУ И МТСХ
4. РАЗРАБОТКА ПРОМЫШЛЕННОЙ ТЕХНОЛОГИИ ИЗГОТОВЛЕНИЯ МИКРОТЕСТСИСТЕМ
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Дифференциация бактерий семейства Vii, и i может быть осуществлена с помощью признаков, представленных в таблице 1. Для дифференциации родов семейства Vii наибольшее значение имеют декарбоксилазы лизина и орнитина и дигидролаза аргинина. Представители рода в отличие от вибрионов неактивны в отношении первых двух аминокислот, но расщепляют аргинин. i ii единственный представитель соответствующего рода утилизирует все три аминокислоты, хотя описаны варианты, неотличимые от вибрионов по набору декарбоксилаз, и поэтому их дифференцируют также по отношению к манниту, инозиту, крахмалу и желатине. Признаки Роды сем. Vii, в т. Мол. Патогенные для человека виды входят в состав родов Vii, , i ,6, 6, дифференциальнодиагностические признаки которых представлены в табл. Надо отметить, что в таблице имеется неточность, т. V и Vii не нуждаются в . Классификация семейства еще не закончена. Есть предложения выделить род в семейство , а бактерии рода i в семейство i 7. В настоящее время род Vii широко распространен и представлен видами микроорганизмов. Являясь составной частью аутохтонной микрофлоры, они играют важную роль в экологии водоемов. V.iiii, V, Vvii, Viii, Vi, Vivii, V. Vi, Vvii 6,8,1. Типовой вид рода Vii Vii , был обнаружен в г. Р.Кохом и вплоть до начала 7 пандемии считался единственным возбудителем холеры. Холерный вибрион, так же как и другие вибрионы, представляет собой короткую изогнутую палочку, спор не образует и капсул не имеет. Наличие жгутика обуславливает очень большую подвижность вибриона. Тинкториальные свойства аналогичны таковым у энтеробактерий, вибрионы хорошо окрашиваются многими анилиновыми красками. Колонии маслянистые, легко снимаются со среды и эмульгируются, давая феномен тяжа. Старые культуры несколько грубеют и приобретают желтоватокоричневый оттенок. На скошенном агаре через ч холерный вибрион образует блестящий желтоватый налет. На агаре с тиосульфатом, цитратом, солями желчных кислот и сахарозой ТСВБагар УсИоегае ферментирует сахарозу и образует желтые колонии. На пластинках желатины через ч вырастают беловатые зернистые колонии, окруженные зоной разжижения. При посеве уколом через ч вызывает воронкообразное разжижение, его верхняя часть при просматривании сбоку представляется пузырьком воздуха позднее разжижение увеличивается, и полость заполняется белесой массой вибрионов. Также образуются неровные, мутные колонии бактерии из них утрачивают чувствительность к бактериофагам, антибиотикам и не агглютинируются Осыворотками. Игнорирование этого факта может привести к диагностическим ошибкам, так как такие неагглютинабельные штаммы могут восстановить свою агглютинабельность при пассировании через организм человека . На жидких средах вызывает помутнение и образование нежной голубоватой пленки на поверхности, ее края приподняты вдоль стенок пробирки при встряхивании она легко разрушается и оседает на дно. На 1 пептонной воде 8,89,0 холерные вибрионы растут, опережая бактерии кишечной группы, и образуют нежную голубоватую пленку и муть. Температурный оптимум для роста С, хотя размножение вибрионов возможно и при более низкой температуре. У холерных вибрионов выделяют термостабильные О и термолабильные Нантигены. Нантигены общие для большой группы бактерий, разделенной на А и В группы в группу А входят холерные вибрионы в группу В вибрионы, биохимически отличные от холерных. Установлено 6, что ОАг группы холерных вибрионов неоднороден и включает А, В и С компоненты, различные сочетания которых присущи разным сероварам , паЬа, НИссута табл. Серовары V. УсИоегае еог с антигеном отличается по ряду признаков от классического холерного вибриона табл. Признаки, дифференцирующие биовары V. Изучение 7 штаммов У. Северном Кавказе и в Закавказье от больных холерой и вибрионосителей выделялись 2 варианта V.