Разработка и экспериментально-клиническое изучение двухфазной питательной среды для выделения гемокультуры

• Автор: Горелова, Виктория Геннадьевна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 115 с. : 14 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. ЭТИОЛОГИЧЕСКАЯ СТРУКТУРА БАКТЕРИЕМИИ И СЕПСИСА И МЕТОДЫ ИХ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ

Особенности современной этиологической структуры бактериемии и сепсиса

Современные методы выделения гемокультуры

Питательные среды в лабораторной диагностике

бактериемии и сепсиса

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

МАТЕРИАЛЫ
МЕТОДЫ.
КОНСТРУИРОВАНИЕ ДВУХФАЗНОЙ ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЫ ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ ГЕМОКУЛЬТУРЫ
Экспериментальное обоснование состава жидкой питательной среды обогащения гемокультуры жидкая фаза Подбор источников азотистого питания Изучение влияния различных стимуляторов роста на накопление микроорганизмов
Обеспечение энергетических потребностей микробов и подбор сорбентов для продуктов их метаболизма.
Изучение влияния различных антикоагулянтов и инактиваторов бактерицидных субстанций крови на рост тестштаммов
Определение оптимальной буферной системы среды
обогащения
3.1.6. Изучение чувствительности жидкой среды обогащения и скорости роста тест штаммов
3.1.7. Изучение показателей эффективности накопления тест штаммов в жидкой среде обогащения
3.1.8. Изучение качества разработанной жидкой среды обогащения
в модельных опытах
3.2. Разработка плотной питательной среды для выделения гемокультуры твердая фаза
3.3. Определение оптимального соотношения жидкой и твердой фаз в двухфазной среде
3.4. Определение величины посевной дозы тестштаммов для двухфазной среды
4. РАЗРАБОТКА ПРОМЫШЛЕННОЙ ТЕХНОЛОГИИ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ДВУХФАЗНОЙ СРЕДЫ ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ ГЕМОКУЛЬТУРЫ
5. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОКЛИНИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ ДВУХФАЗНОЙ ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЫ ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ ГЕМОКУЛЬТУРЫ
5.1. Изучение биологических свойств двухфазной питательной среды в модельных опытах
5.2. Клинические испытания двухфазной питательной среды
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Разработанная среда обеспечивала высокую скорость роста, а также накопление при минимальных концентрациях клинически значимых возбудителей бактериемии и сепсиса. Получено положительное решение по заявке о выдаче патента на среду обогащения для выделения гемокультур. На основе сконструированной среды обогащения впервые создана двухфазная питательная среда, увеличивающая высеваемость микроорганизмов в 2 раза при ускорении роста гемокультур на ч . Получено положительное решение по заявке о выдаче патента на двухфазную среду для микробиологического исследования крови. Практическая значимость. Впервые в России разработана и апробирована на производстве предприятия НПО Питательные среды ФГУП НПО Микроген М3 и СР РФ двухфазная питательная среда для выделения гемокультуры. Внедрение среды в практику позволит обеспечить лабораторную службу страны стандартными препаратами для бактериологического исследования крови и будет способствовать снижению межлабораторных вариаций результатов исследований, сокращению времени проведения анализа и установления диагноза при подозрении на бактериемию и сепсис. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. Известно, что в ряду инфекционных заболеваний заметное место занимает сепсис, являющийся тяжелым общим инфекционным заболеванием, вызванным проникновением и распространением микробов из местного очага инфекции в кровяное русло, лимфатические пути, органы и ткани больного. Ежегодно в мире отмечают не менее одного миллиона клинически проявляющихся случаев проникновения бактерий в кровоток, от до которых заканчиваются летально Покровский В. И., г. Руднов В. А. 1. Котлярова А. Н., г. Бактериемия как общее понятие, обозначающее присутствие микроорганизма в крови гемокультура, может сопровождаться клиническими проявлениями лихорадка, озноб, либо протекать1 бессимптомно, когда микроорганизмы, проникающие в кровь, немногочисленны и их уничтожают клеточные и гуморальные защитные механизмы. С развитием патологического процесса в кровь поступает все большее количество микроорганизмов, они проникают в органы и ткани, где происходит их размножение. В этой стадии клинические симптомы бактериемии уже выражены. Если не остановить развитие процесса, защитные механизмы перестают действовать, бактерии стойко задерживаются в крови, начинают в ней размножаться и происходит переход в септическое состояние. Бактериемия может протекать и без перехода в септическое состояние, что имеет место, как известно, при ряде инфекционных заболеваний тиф, паратифы, бруцеллез, менингит, листериоз, лептоспироз и др. Известно, что бактериемия может возникать и на короткое время, т. Этот тип бактериемии обусловлен, в основном, комменсалами и всегда купируется спонтанно, в результате фагоцитоза бактерий в печени и селезенке. Бактериемия и сепсис, как инфекционная патология, формируется часто как в больнице, так и вне ее. Этиологическая структура внутрибольничного сепсиса и бактериемии в конкретном лечебном учреждении во многом определяется составом нозологических форм заболеваний контингента больных. Необходимость разграничения внебольничных и нозокомиальных бактериемий и сепсиса связана со спецификой спектра возбудителей и уровня их антибиотикочувствительности. Так, возбудители тяжелых внебольничных инфекций обладают существенно большей чувствительностью к антибиотикам пенициллинам, гентамицину, чем госпитальные бактериальные штаммы Зуева Л. П., г. Меньшиков Д. Д., г. Руднов В. А., г. Коршунова Г. С., г. Известно, что возбудителями бактериемии и сепсиса могут являться бактерии, грибы, простейшие и вирусы. Однако на долю бактерий приходится более случаев и, в основном, это условнопатогенные микроорганизмы Бондарев Л. С., г. Покровский В. И., г. Акимкин В. Г., Покровский В. И., г. Савицкая К. И., г. Руднов В. А., г. Равваго Э. Меркушев Н. В. с соавт. В1Ьез В. Различают бактериемию, вызванную грамотрицательными и грамположительными микроорганизмами. По данным ряда отечественных и зарубежных авторов в х годах прошлого века доминирующая роль в этиологической структуре бактериемии и сепсиса в специализированных стационарах принадлежала грамотрицательным микроорганизмам.