Протективные свойства мелиоидозных моноклональных антител

• Автор: Дрефс, Наталья Михайловна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Волгоград
• Количество страниц: 124 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Механизмы иммунитета при мелиоидозе

1.2. Роль антител в защите макроорганизма от ме

лиоидозной инфекции

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Штаммы микроорганизмов.

2.2. Экспериментальные животные.

2.3. Клеточные линии

2.4. Питательные среды
2.5. Антигены.
2.6. Сыворотки интактных и иммунных животных
2.7. Моноклональные антитела
2.8. Тестсистема для скрининга МКА.
2.9. Получение поли и моноклональных иммуноглобулинов
2 Методы контроля серологической активности антител
2 Определение бактериостатической активности
антител
2 Опсонофагоцитарная реакция
2 Оценка протективности иммуноглобулинов i
2 Статистические методы обработки результатов
опытов.
Глава 3. Серологическая и бактериостатическая активность мелиоидозных поли и моноклональных иммуноглобулинов.
3.1. Специфическая активность мелиоидозных иммуноглобулинов
3.2. Бактериостатические свойства поли и моноклональных антител
Глава 4. Изучение характера взаимодействия опсонизированных
антителами бактерий с мышиными фагоцитами.
Глава 5. Эффективность применения мелиоидозных МКА различной эпитопной направленности для защиты от инфекции .
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ


Предметом обсуждения специалистов все чаще становятся вопросы использования иммуноглобулиновых препаратов для профилактики мелиоидоза , , 2. Сведения о протективном потенциале мелиоидозных антител ограничены, а их роль в защите от инфекции до конца не определена , , 0. МКА узкой специфичности , , , , , , 4, 3. Применение таких препаратов расширяет представление о результативности блокирования тех эпитопов антигенных комплексов, которые обладают антифагоцитарной функцией и обеспечивают микробной клетке уклонение от механизмов защиты макроорганизма. Анализ этих данных открывает новые возможности для совершенствования схем патогенетического лечения мелиоидоза. Принимая во внимание важность проблемы защиты от мелиоидоза, в том числе вопросов серопрофилактики и серотерапии этой инфекции, было определено направление исследований по изучению роли антител в защите макроорганизма от В. Тиражирование i vi и i viv гибридомпродуцентов МКА к антигенам В. МКА, их характеристика. Получение высокоактивных поликлональных кроличьих антител к антигенам В. Оценка бактериостатических свойств мелиоидозных поли и моноклональных антител различной эпитопной направленности и разработка теста задержки роста В. Оптимизация условий постановки опсонофагоцитарной реакции на этапах оценки протективного потенциала МКА различной эпитопной направленности, изучение влияния опсонизации В. Изучение протективных свойств мелиоидозных МКА i viv. Получены новые данные о роли гуморальных антител в защите макроорганизма от возбудителя мелиоидоза. Проведено комплексное исследование протективных свойств поликлональных и моноклональных иммуноглобулинов, взаимодействующих с антигенами, локализованными на поверхности В. Впервые определены оптимизированные условия оценки бактериостатического потенциала мелиоидозных антител в тесте задержки роста бактерий на плотной питательной среде. Показано, что предварительная опсонизация В. Оптимизированы условия постановки опсонофагоцитарной реакции с применением широкого набора МКА различной эпитопной направленности, позволяющей исследовать один из механизмов иммунного фагоцитоза при экспериментальном мелиоидозе. Установлено, что предварительная опсонизация В. Определена сравнительная эффективность различных типов МКА в блокировании эпитопов, экспонированных на поверхности микробных клеток В. МКА, использование которых в данной реакции, обеспечивает завершенность процесса поглощения бактерий фагоцитами мыши в первые три часа после заражения. Показано, что превентивное введение моноклональных иммуноглобулинов различной эпитопной направленности оказывает существенное влияние на течение экспериментального мелиоидоза. Эффективность превентивного введения i viv моноклональных иммуноглобулинов в режиме экстренной профилактики зависит от особенностей штамма В. Установлено, что ряд МКА, взаимодействующих с эпитопами Аг 6, Аг 8 и эпитопами, экспонированными как на Аг 6, так и Аг 8, достоверно увеличивают сроки средней продолжительности жизни экспериментальных животных и повышают показатели выживаемости особей до 0 . Полученные данные представляют интерес для сотрудников специализированных лабораторий, занимающихся вопросами иммунопрофилактики особо опасных инфекционных заболеваний, и могут быть использованы в научноисследовательской работе при разработке профилактических средств защиты от В. Тест задержки роста бактерий, предварительно опсонизированных антителами, адаптирован к работе с возбудителем мелиоидоза. Условия проведения исследования, направленного на оценку бактериостатического потенциала МКА различной эпитопной направленности, отражены в Методических рекомендациях по оценке бактериостатических свойств мелиоидозных моноклональных антител i vi рассмотрены ученым советом Волгоградского НИПЧИ г. Предлагаемый способ рекомендован в качестве дополнительного метода исследования, позволяющего достаточно просто произвести отбор различных типов МКА, взаимодействующих с эпитопами, экспонированными на поверхности микробных клеток В. В. i i vi.