Механизмы гемолитической активности холерных вибрионов

• Автор: Телесманич, Наталья Робертовна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Ростов-на-Дону
• Количество страниц: 256 с. : ил.

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ГЕМОЛИТИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ХОЛЕРНЫХ

ВИБРИОНОВ. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Гемолитическая активность в эволюции возбудителя холеры

1.2. Проблемы очистки и характеристики препаратов гемолизинов.

1.2.1. Методы очистки гемолизинов холерных вибрионов.

1.2.2. Механизм действия гемолизинов холерных вибрионов как токсинов канал оформеров.

1.2.3. Организация и экспрессия генов, детерминирующих синтез гемолизина

холерных вибрионов

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

ГЛАВА 2. ФЕРМЕНТЫ В ГЕМОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ

ХОЛЕРНЫХ ВИБРИОНОВ.
2.1. Компьютерный анализ нуклеотидных и аминокислотных последовательностей структурных генов, составляющих область генома холерных вибрионов и их продуктов.
2.1.1. Компьютерный анализ аминокислотной последовательности полипептида, продукта гена А
2.1.2. Компьютерный анализ аминокислотной последовательности полипептида, продукта гена 1ес
2.1.3. Компьютерный анализ аминокислотной последовательности полипептида, продукта гена .
2.1.4. Компьютерный анализ аминокислотной последовательности
полипептида, продукта гена
2.2. Детекция ферментативных активностей в препаратах гемолизинов, полученных с помощью многоэтапных схем очистки
2.3. Двухэтапная схема очистки гемолизина холерных вибрионов, детекция
ферментативных активностей фракций препарата.
ГЛАВА 3. РОЛЬ ТРИАЦИЛГЛИЦЕРОЛЛИПАЗЫ И ЛЕЦИТИНАЗЫ В ГЕМОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ХОЛЕРНЫХ ВИБРИОНОВ.
3.1. Разработка питательной среды для выявления триацилглицероллипазной активности холерных вибрионов.
3.2. Конструирование антилипазного полимерного иммуноглобулинового диагностикума на основе коммерческого препарата липазы . фирмы i для изучения липазной активности холерных вибрионов.
3.3. Роль лецитиназы в гемолитической активности холерных вибрионов.
ГЛАВА 4. БИОЛОГИЧЕСКАЯ ФУНКЦИЯ ГЕНА НЬУ А,
ДЕТЕРМИНИРУЮЩЕГО ПРОДУКЦИЮ ЛЕКТИНА.
4.1. Общие сведения о лектинах.
4.2. Углеводная специфичность лектина Н1у А, выявленная в реакции торможения гемолиза
4.3. Участие галактозоспецифичного лектина в агглютинации эритроцитов токсигенными и атоксигенными штаммами холерных вибрионов.
4.4. Метод осмотической протекции в изучении механизма действия
гемолизинов
4.5. Углеводная специфичность некоторых лектиновых рецепторов холерных
вибрионов в процессе адгезии на модели эритроцитов
ГЛАВА 5. ДЕЙСТВИЕ ГЕМОЛИЗИНА НА КЛЕТКИ
МИКРООРГАНИЗМОВ
5.1. Изучение влияния препаратов гемолизина на рост клеток грам, грам бактерий.
5.2. Ультраструктурные изменения холерных вибрионов при действии
I гемолизина из штамма V. сЬоегае не Р 2.
ГЛАВА 6. ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ И МЕХАНИЗМЫ р ГЕМОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ХОЛЕРНЫХ
ВИБРИОНОВ
6.1. Гемолитическая активность холерных вибрионов эльтор .
6.2. Гемолитическая активность классических холерных вибрионов
6.3. Гемолиз и биологические мембраны
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
ЛИТЕРАТУРА


Вместе с тем при определенных условиях гемолитические холерные вибрионы эльтор могут стать причиной эпидемиологических осложнений. Так, в году в Донецке возникла вспышка холеры, этиологическим агентом которой явились гемолитичные холерные вибрионы эльтор, попавшие в молоковозы Донецкого молкомбината. Продукция этого комбината молоко послужила причиной заболевания и вибриононосительства у 9 человек. Болезнь протекала легко, заболеваемость характеризовалась как вспышечная с множественными случаями по городу и области единым фактором заражения было молоко. Летальных исходов не было Савельев В. Н., . Роль гемолитичных и негемолитичных холерных вибрионов эльтор в патологии человека, а именно, в способности данных микроорганизмов вызывать диарейные заболевания, не однозначна первые являются этиологическим фактором спорадических случаев, вторые возбудителями холеры. Учитывая сказанное, . Кроме того, сложилась точка зрения, что гемолитические вибрионы эльтор являются аутохтонными обитателями естественных поверхностных водоемов , . Считалось, что данные микроорганизмы могут вызывать единичные случаи диарейных заболеваний на фоне циркуляции их в воде поверхностных водоемов . Изучая зависимость характера эпидемических проявлений холеры от свойств циркулирующих штаммов Подосинникова Л. С., Савельев В. Н. с соавт. Вышеизложенное позволяет сделать вывод о том, что представления о возбудителе холеры в период VII пандемии претерпели серьезные изменения. Холерные вибрионы, обнаруженные в году Р. Кохом, вплоть до начала VII пандемии считались единственными возбудителями холеры. Однако года спустя от паломников, возвращавшихся из Мекки, были выделены вибрионы эльтор i . В августе года на заседании Всемирной Ассамблеи здравоохранения была внесена резолюция, предлагающая официально считать вибрион эльтор возбудителем холеры ВОЗ, , . Так, в шестидесятые годы двадцатого столетия стало известно о двух биотипах возбудителя холеры, относящихся к одной серологической группе, которые получили название Vii вызывает классическую или азиатскую холеру и Vii вызывает холеру эльтор . Вместе с тем следует отметить, что когда ВОЗ август года признала холеру эльтор, то под этим названием подразумевалась холера, этиологическим агентом которой является гемолитический вибрион эльторВагиа . Развивающиеся события С. Е., показали, что именно негемолитические вибрионы эльтор явились этиологическим фактором холеры, получившей пандемическое распространение. В дальнейшем было установлено, что в геноме негемолитического варианта холерного вибриона эльтор присутствует ген токсинообразования, экспрессия которого в организме человека и приводит к заболеванию холерой, способной к эпидемическому и пандемическому распространению . Гинцбург . I. с соавт. Власов В. П. с соавт. Подосинникова Л. С., . Покровский В. И., Малеев В. В., Вертиев Ю. В., Езепчук Ю. В., Покровский В. И. с соавт. К настоящему времени холерный энтеротоксин изучен довольно полно. Установлено Езепчук Ю. В., Покровский В. И. с соавт. Асубъединицы м. Да и пяти Всубъединиц м. Да. Субъединица А содержит 2 пептида А и А 2, а субъединица В состоит из пяти ковалентно связанных цепей и имеет высокую степень сродства с олигосахаридньши остатками ганглиозида . Т., . Холерные вибрионы классического биовара несут не менее двух копий оперона x, расположенных в различных участках хромосомы, а биотипа эльтор содержат одну или две копии x оперона Гинцбург АЛ. В дальнейшем установлено, что экспрессия x АВ регулируется геном x С. С., , . Ген x входит в состав фага СТХф, который присутствует у всех эпидемических штаммов холерных вибрионов эльтор и Бенгал Осин А. В., Костромитина Е. А.,
Анализируя эволюцию возбудителя холеры, необходимо определить роль гемолитической активности в этом процессе. Можно сказать, что гемолитическая активность является определенным индикатором эволюционной смены возбудителя и одним из критериев оценки появления вирулентных форм холерных вибрионов. Смена возбудителя на протяжении VII пандемии сопровождалась изменением его гемолитических свойств. Гемолитическая активность штаммов холерных вибрионов эльтор, выделенных на о.