Гематогенный путь распространения C.trachomatis у пациентов с урогенитальным хламидиозом

• Автор: Пашко, Юлия Петровна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 102 с. : 23 ил.

Оглавление

Список сокращений

I. ВВЕДЕНИЕ.

. ОБЗОР ЛИТЕРА ТУРЫ.

1 Эпидемиология урогенитального хламидиоза

2 Биологическая характеристика хламидий.

2.1 Развитие классификации

2.2 Таксономия СлгасИотаТк

2.3 Строение и жизнедеятельность хламидий.

2.4 Жизненный цикл СЛгасйопиНЬ. .

2.4.1 Ранний этап внутриклеточной стадии жизненного цикла хламидий

2.4.2 Средний этап внутриклеточной стадии жизненного цикла хламидий.
2.4.3 Поздний этап внутриклеточной стадии жизненного цикли хламидий.
2.5 Строение клеточной оболочки и антигенные детерминанты .хламидий.
2.6 Секретируемые факторы хламидий
2.7 Чувствительность к антибиотикам.
2.8 Пути передачи хламидий
3 Клинические проявления хлам иди иной инфекции.
3.1 Поражения нижнего отдела урогенитального тракта.
3.2 Восходящая хламидийная инфекция.
3.3 Внутриутробное инфицирование и патология беременности, обусловленные
СлгасйотаТт
3.4 Экстраген итачьная хламидийная инфекция.
4 Данные исследований о возможности гематогенного пути распространения СЛгасНотаСк.
5 Персистенция хламидий.
6 Диагностика урогенитального .хламидиоза.
III. МАТЕРИАЛЫ
IV. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВА ПИЯ
V. РЕЗУЛЬТАТЫ.
1 Глава 1.
Выявление СЛгас1ютаГ в сыворотке крови больных
1.1. Микробиологическое выделение СЛгасютайх
1.2. Детекция ДНК Слгасютайх в культуре клеток, инфицированных образцами
сывороток больных.
1.3. Электронномикроскопическая характеристика циркулирующих в крови хламидий
1.4. Иммуноцитохимическая детекция ретикулярных и элементарных тел в препаратах
сыворотки крови больных.
1.5. Опсопизация внеклеточных форм хламидий в сыворотке
1.6. Культивирование толятов .i из сыворотки крови.
2 Глава 2.
Разработка нового подхода к диагностике хронических хламидиозов с использованием сыворотки крови
2.1 Подбор наиболее эффективного метода выделения ДНК из сыворотки крови
2.2 Отработка метода выделения и детекции .i в сыворотке крови на клиническом материале.
2.3 Параллельное выявление .i в соекобах и сыворотке крови методом ПЦРу
больных с различными формами урогенитальной и экстрагснитальной патологии .
3 Глава 3.
Изучение тропизма .i к гепатоцитам в условиях i vi.
3.1 Изучение связывания .i сЛППП.
3.2 Изучение тропизма .i к клеткам печени
3.3 Доказательство липопротсип опосредованного транспорта .i в генатоциты в условиях i vi.
3.4 Влияние инфекции на экспрессию генов эукариотических меток
4 Глава 4.
Выявление i в тканях печени
VI. ОБСУЖДЕНИЕ.
VI. ВЫВОДЫ.
VII. СПИСОК ЛИТЕРА ТУРЫ.
Список сокращений
БР болезнь Рейтера
ВОЕ включения образующие единицы
ИППГ1 инфекции, передаваемые половым путем
ЛПНП липопротеины низкой плотности
ЛПС липополисахарид
ПИФ прямая иммунофлюоресценция
ПЦР полимеразная цепная реакция
ПЦР РВ полимеразная цепная реакция в реальном времени
РТ ретикулярное тельце
УГИ урогенитальные инфекции
УГХ урогенитальный хламидиоз
УГТ урогенитальный тракт
ХИ хламидийная инфекция
ЭТ элементарное тельце
С. i i i
I интерферон
I иммуноглобулин
I интерлейкин
главный белок наружной мембраны хламидийный протеазоподобный фактор
I. ВВЕДЕНИЕ
АКТУАЛЬНОСТЬ


Однако именно для внутриклеточных патогенов за последние годы появилось много данных о том, что вызываемые ими хронические инфекции лежат в основе ряда серьезных соматических патологий. К настоящему времени проблема диагностики хронической хламидийной инфекции определяется несколькими факторами. Вопервых, персистирующие формы хламидий, ответственные за развитие хронических инфекций, плохо детектируются с помощью классических микробиологических и иммунологических тестов, вследствие нарушения их метаболизма и антигенной структуры . Вовторых, при осложненных формах, связанных с восходящей и экстрагенигальной инфекцией, возбудитель мало доступен для анализа. Втретьих, иммунный ответ при хронической хламидийной инфекции подавлен, что ограничивает возможность использования серологической диагностики. При этом постановка диагноза урогенитального хламидиоза возможна только при обнаружении . В связи с этим, разработка новых методов детекции возбудителя на основе понимания механизмов распространения . Исследование гематогенного пути распространения i i и механизма инфицирования печени, разработка метода диагностики хронических форм хламидиоза экстрагенитальной локализации. Изучить возможность гематогенного пути распространения С. УГХ. Разработать метод диагностики хронических хлам идиозов на основе ПЦРРВ с использованием сыворотки крови в качестве материала для исследования. Определить диагностическое значение выявления С. Изучить тропизм С. Оценить последствия циркуляции С . Впервые доказан гематогенный путь распространения С. УГХ. С.i, выделяемая из сыворотки крови, может быть определена как внеклеточная инфекционная форма персистируюгцих i viv хламидий. Впервые обнаружено, что у пациентов с хроническими и осложненными формами заболеваний урогенитального тракта УГТ . УГТ. С.i к клеткам печени гепатоцитам и изучен механизм адгезии и интернализации за счет связывания патогена с белком АпоВ липопротеинов с последующим взаимодействием данного комплекса с рецепторами гепатоцитов для ЛГПГП. Было выявлено, что инфекция С. ЛПНП. Впервые показана возможность инфицирования клеток печени возбудителем урогенитального хламидиоза. При исследовании клинического материала от больных с острыми и хроническими холециститами в сыворотке крови и биоптатах печени и желчного пузыря была обнаружена С. Выявлено, что циркулирующие в крови больных хламидии в значительном проценте случаев могут диссеминировать в печень. Выявление С. Разработан метод прямого выявления хламидий с использованием сыворотки крови. Его основой является оптимизированная методика выделения ДИК патогена из сыворотки крови и детекция . ПЦРРВ. Этот метод может быть использован для диагностики хронических и экстрагеиитальных форм хламидийной инфекции. Отдельные положения работы включены в Методические рекомендации Метод детекции ДНК i i в сыворотке крови количественным методом ПЦРРВ, утвержденных февраля Юг на совете по внедрению научных достижений в практику НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН выписка из протокола . II. Возбудителем хламидиоза является С. Этот патоген один из самых распространенных возбудителей бактериальных инфекций, передаваемых половым путем 7. Урогенитальная хламидийная инфекция является актуальной проблемой для изучения как для практических врачей, так и для ученыхисследователей уже в течение многих лет, т. XX века, когда для изучения биологии хламидий была предложена техника культуры клеток, что послужило началом совершенно нового периода изучения хламидийных болезней человека. Тем не менее, заболеваемость хламидиозом продолжает повсеместно увеличиваться 1. Последствия невыявленной и нелеченной инфекции наносят экономический и демографический ущерб обществу и оцениваются астрономическими суммами 7. По данным ВОЗ, в мире ежегодно регистрируются около миллионов больных урогенитальным хламидиозом. В США, например, ежегодно регистрируется около 5 миллионов новых случаев хламидиоза, в том числе у 0 тысяч новорожденных, в Европе около миллионов случаев. В РФ ежегодно выявляется более 1 млн.