Лектины Bacillus polymyxa: физико-химические и биологические свойства

• Автор: Мельникова, Ульяна Юрьевна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Саратов
• Количество страниц: 120 с.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1. Общие сведения о пектинах бактерий

1.2. Функции пектинов

2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

2.1. Объект исследования, условия культивирования

2.2. Материалы и методы исследования.

2.2. 1. Выделение, очистка агглютининов бацилл.

2.2. 2. Определение молекулярной массы.

2.2. 3. Определение гемагглютинирующей активности

2.2. 4. Определение углеводной специфичности пектинов
2.2. 5. Определение аминокислотного состава лектинов.
2.2. 6. Определение углеводного состава лектинов.
2.2. 7. Определение локализации лектинов бацилл
2.2. 8. Определение адгезии клеток бацилл на эритроцитах.
2.2. 9. Определение адгезии клеток бацилл на корнях пшеницы
2.2 Выделение фракций корней проростков пшеницы
2.2 Определение углеводного состава фракции экзокомпонентов корней пшеницы
2.2 Метод интерфазных колец преципитации.
2.2 Метод иммунодота.
2.2 Получение антител к пектинам.
2.2 Метод электроблотинга
2.2 Определение протеолитической активности лектинов бацилл
2.2 Измерение выхода из клеток низкомолекулярных компонентов.
2.2 Определение бактерицидных свойств лектинов бацилл
3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Обнаружение, выделение, определение специфичности агглютининов бактерий В.ро1утуха ,
3.2. Физикохимическая характеристика лектинов бацилл
3.3. Изучение локализации лектинов В.ро1утуха
3.4. Изучение адгезивных свойств лектинов бацилл.
3.4. 1. Исследование адгезии бактерий на эритроцитах.
3.4. 2. Исследование адгезии бактерий на корнях проростков
пшеницы
3.5. Исследование взаимодействия лектинов бацилл с компонентами корней проростков пшеницы
3.6. Обнаружение протеолитической активности у лектинов бацилл
3.7. Исследование протеолитической активности лектинов бацилл при взаимодействии с компонентами корней проростков пшеницы
3.8. Изучение взаимодействия лектинов бацилл с полисахаридными компонентами почвенных азотфиксирующих бактерий
3.9. Изменение выхода низкомолекулярных компонентов из клеток азотфиксирующих бактерий под влиянием лектинов В.ро1утуха .
3 Обнаружение бактерицидных свойств лектинов В.ро1утуха .
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ЛИТЕРАТУРНЫХ ИСТОЧНИКОВ
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


Впервые показано участие лектинов бацилл в межбактериальном взаимодействии, которое проявлялось в связывании лектинов бацилл с полисахаридными компонентами почвенных азотфиксирующих бактерий, влиянии лектинов на состояние мембранного аппарата почвенных бактерий и проявлении лекгинами В. Научнопрактическая значимость. Изучение роли бактериальных лектинов во взаимоотношениях микроорганизмов с растениями и бактериями в прикорневой зоне при образовании азотфиксирующих систем важно не только для понимания молекулярных механизмов, лежащих в основе этого процесса, но и дает возможность использования азотфиксирующих микроорганизмов и их ассоциаций при культивировании экологически важных растений с целью уменьшения применения азотных удобрений. Материалы диссертационной работы нашли применение при подготовке программ спецкурсов Методы препаративной биохимии, Взаимоотношение растений и микроорганизмов и Биомембраны для студентов биологического факультета СГУ Саратовского государственного университета им. Н.Г. Чернышевского. Результаты диссертационной работы использовались при подготовке курсовых и дипломных работ студентами биологического факультета СГУ. Полученные препараты лектинов используются при проведении плановых научноисследовательских работ в лабораториях микробиологии и микологии, физиологии растительной клетки ИБФРМ РАН, на кафедре микробиологии и ветсанэкспертизы Саратовского государственного аграрного университета им. Н.И. Вавилова. Карпуниной Л. В., Богатырвым В. А. для практических занятий студентов старших курсов биологического факультета СГУ, специализирующихся в области бактериохимии и микробиологии, рекомендованные Учебнометодической комиссией и одобренные Ученым Советом биологического факультета СГУ протокол 8 от апреля года Методические рекомендации по изучению взаимодействия лектинов бацилл с некоторыми бактериями рода ii в соавторстве с Карпуниной I. ., Дыкманом Л. А., Иващенко С. В., Хапцевым З. Ю., Щербаковым . . для студентов и аспирантов ветеринарного факультета Саратовского государственного аграрного Университета, рекомендованные Учебнометодической комиссией ветеринарного факультета СГАУ им. Вавилова протокол от июня года. Применение и использование материалов диссертации подтверждены соответствующими актами. На защиту выносятся следующие положения. Выделение, определение физикохимических свойств и локализации лектинов бактерий . Определение адгезивной роли лектинов бацилл в процессе прикрепления к корням проростков пшеницы. Изучение взаимодействия лектинов бацилл с фракциями корней проростков пшеницы и выявление растительных рецепторов углеводного и белкового происхождения. Выяснение способности лектинов бацилл проявлять протеолитическую активность и участия углеводов в проявлении ферментативной активности. Изучение взаимодействия лектинов бактерий . Установление влияния лектинов бактерий . Обнаружение способности лектинов бацилл проявлять бактерицидные свойства. Работа выполнена в лаборатории микробиологии и микологии ИБФРМ РАН в соответствии с плановой темой Физиологобиохимическая роль белковагглютининов клеточной поверхности бактерий гос. Апробация работы. Регуляция микробного метаболизма Россия, Пущино, , Ii i i Эстония, Тарту, , Ii i i США, Калифорния, , Ii i i Берлин, , i i ixi Нидерладны, , на отчетных конференциях ИБФРМ РАН. Публикации. По теме диссертационной работы опубликовано работ, 3 в отечественной и 8 в зарубежной печати. Структу ра и объем работы. Диссертация состоит из введения, трех глав, включающих обзор литературы, описание материалов и методов исследования, изложение полученных материалов и их обсуждение, заключения, выводов и списка использованных литературных источников. Работа изложена на 0 страницах, иллюстрирована рисунками и содержит таблиц. Список использованных литературных источников включает 6 наименований, в том числе 5 зарубежных.