Природная и экспериментальная вариабельность антибиотикорезистентности у штаммов холерного вибриона 01 и 0139 серогрупп и обоснование выбора средств этиотропной терапии холеры

• Автор: Дудина, Надежда Александровна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Ростов-на-Дону
• Количество страниц: 152 с. : 22 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

1 ЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 .Современное состояние заболеваемости холерой

1.2. Этиотропная терапия холеры.

1.3. Антибиотикорезистентность эпидемически значимых штаммов холерного вибриона.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ.

2.1. Штаммы

2.2. Питательные среды.

2.3. Антибактериальные препараты.

2.4. Определение чувствительности к антибактериальным препаратам.

2.5. Получение антибиотикорезистентных .мутантов холерного вибриона.
2.6. Индукция т vi устойчивости к антибактериальным препаратам.
2.7. Изучение стабильности экспрессии антибиотикорезистентности.
2.8. Изучение способности маркеров антибиотикоустойчивости к самопереносу другим хозяевам.
2.9. Использование экспериментальных моделей холеры на животных.
2 Статистическая обработка результатов экспериментов ГЛАВА 3. ИЗУЧЕНИЕ АНТИБИОТИКОЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ РЕЗИСТЕНТНОСТИ У ШТАММОВ ХОЛЕРНОГО ВИБРИОНА
И СЕРОГРУПП, ВЫДЕЛЕННЫХ ОТ ЛЮДЕЙ В РАЗНЫХ РЕГИОНАХ МИРА В ПЕРИОД С ПО ГГ
3.1. Антибиотикограммы штаммов холерного вибриона биовара , вьдслс и ьх от людей в период с по гг. 5 О
3.2. Антибиотикограммы штаммов холерного вибриона биовара , выделенных от людей в период с по гг.
3.3. Антибиотикограммы штаммов холерного вибриона серогруппы, выделенных от людей в гг.
3.4. Частота встречаемости штаммов холерного вибриона, резистентных к различным антибактериалььм препаратам,
в разные годы и вариабелыюсть маркеров устойчивости
ГЛАВА 4. ОЦЕНКА ВОЗМОЖНОСТИ ИНДУКЦИИ ЭКСПРЕССИИ МАРКЕРОВ АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНГНОСТИ I VI И ПОЛУЧЕНИЯ МУТАНТОВ V. И СЕРОГРУПП, УСТОЙЧИВЫХ К РИФАМПИЦИНУ И ХИНОЛОНАМ
4.1. Нестабильность проявления антибиотикорезистентности как одна из причин вариабельности маркеров устойчивости у холерного вибриона
4.2. Индукция i vi устойчивости к тетрациклину, левомицетину, ампициллину, стрептомицину у штаммов
V , выделенных от людей в гг.
4.3. Перекрестная устойчивость к хинолонам у штаммов холерного вибриона г.Казань, г. после селективного давления i vi налидиксовой кислотой и фторхинолонами.
4.4. Получение рифампицино и хинолонорезистентных мутантов холерного вибриона и ссрогрупп.
4.4.1. Частота появления i, мутантов холерного вибриона и их антибиотикограммы.
4.4.2. Изучение токсигенности i, мутантов холерного вибриона на модели внутрикишечного заражения изолированных петель тонкого кишечника взрослых кроликов
4.4.3. Оценка влияния субингибирующих концентраций антибактериальных препаратов на частоту появления мутантов УсИо1егае еИог, устойчивых к рифам
пицину и налидиксовой кислоте.
ГЛАВА 5. ИЗУЧЕНИЕ СПОСОБНОСТИ РАЗЛИЧНЫХ МАРКЕРОВ АНТИБЙОТИКОРЕЗИСТЕНТИОСТИ У КЛИНИЧЕСКИХ ИЗО
ЛЯТОВ V. И СЕРОГРУПП К ТРАНСМИССИВНОМУ САМОПНРННОСУ ДРУГОМУ ХОЗЯИНУ
5.1. Использование в качестве доноров штаммов холерною вибриона и серогрупп, выделенных от людей
в период с по гг
5.2. Использование в качестве доноров штаммов холерного вибриона гг. с индуцированной i vi устойчивостью к тетрациклину, левомицетину, ампициллину, стрептомицину
ГЛАВА 6. ОЦЕНКА СПОСОБНОСТИ К ЭКСПРЕССИИ ЯПЛАЗМИД РАЗЛИЧНЫХ ГРУПП НЕСОВМЕСТИМОСТИ В ЭПИДЕМИЧЕСКИ ЗНАЧИМЫХ ШТАММАХ ХОЛЕРНОГО ВИБРИОНА И В ИХ I И МУТАНТАХ.
6.1. Изучение экспрессии Яплазмид i С, , , , М, 1,
i, , К в клетках V. Р и его i и мутантах
6.2. Изучение экспрессии Яплазмид i С, , рупп несовместимости в клинических изолятах холерного вибриона с трансмиссивными и нетрансмиссивными маркерами устойчивости к антибактериальным препаратам.
ГЛАВА 7. ОЦЕНКА СООТВЕТСТВИЯ ДАННЫХ АНТИБИОТИКОГРАММ ШТАММОВ ХОЛЕРНОГО ВИБРИОНА И ЭФФЕКТИВНОСТИ
АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫХ ПРЕПАРАТОВ I VIV
7.1. Эффективность неэффективность антибактериаль
ных препаратов при генерализованной форме холеры у мышей, вызванной антибиотикочувствительным штаммом V. Р и его вариантами,
устойчивыми к антибактериальным препаратам
7.2. Изучение эффективности антибактериальных препаратов i viv при инфекции, вызванной клиническими
изолятами возбудителя холеры гг.
ГЛАВА 8. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ V. К АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫМ ПРЕПАРАТАМ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ


Оценить возможность появления устойчивости к тетрациклинам, лсвомицетину, ампициллину, стрептомицину, гентамицину у штаммов холерного вибриона биовара при индукции антибиотиками i vi с оценкой способности гдетерминант резистентности к трансмиссивной передаче другому хозяину. Изучить характер трансмиссивный, нетрансмиссивный антибиотикорезистентности у экспериментальных штаммов и клинических изолятов холерного вибриона и серогруппы. Изучить способность к экспрессии Яплазмид различных групп несовместимости в эпидемически значимых штаммах холерного вибриона . Оценить соответствие данных антибиотикограмм у коллекции штаммов холерного вибриона и серогрупп с результатами эффективности антибактериальных препаратов на модели генерализованной инфекции у белых мышей. Разработать подходы к оптимизации методов определения антибиотикограммы холерного вибриона и интерпретации е результатов для выбора средств этиотропной терапии холеры. Научная новизна работы. МЛК препаратов 0 штаммов холерного вибриона и серогрушт, выделенных от людей в период с по гг. МПК и диаметров зон подавления роста для чувствительных и устойчивых штаммов холерного вибриона на трех питательных средах агар МюллераХинтона 7,,2, агар Хотгингера 7,,1, АТВ 7,,2. Практическая значимость работы. Сравнительная оценка активности антибактериальных препаратов i vi и i viv показала, что наличие антибиотикорезистентности мутационной, трансмиссивной к разным препаратам у штаммов холерного вибриона эльтор и приводит к неэффективности беталактамов ампициллин, цефтриаксон, цефотаксим и др. Снижение эффективности i viv фторхинолонов наблюдается уже при значениях МПК0,2 мгл, фуразолидона при значениях МТЖ мгл, доксициклина при значениях МПК4 мгл и это необходимо учитывать при назначении препаратов для экстренной профилактики и лечения холеры на основании оптимизированных подходов к определению антибиотикограммы возбудителя и е интерпретации. МюллераХинтона 7,,2, агаре Хоттингера 7,,1, АГВ 7,,2 Методические рекомендации по определению чувствительности устойчивости холерного вибриона к антибактериальным препаратам методом серийных разведений и дискодиффузионным методом. Интерпретация результатов исследования протокол 8 от . Анализ антибиотикограмм 0 штаммов холерного вибриона и i, выделенных от людей за период с по гг. У изученных штаммов возбудителя холеры обнаружена нетрансмиссивная резистентность к рифампицину, хинолонам, фуразолидону и трансмиссивная к стрептомицину, триметопримусульфаметоксазолу, тетрациклинам, левомицетину, ампициллину, гентамицину, канамицину, амикацину в разных сочетаниях. Лплазмид 9 групп несовместимости с разным набором маркеров устойчивости. На основе сопоставления данных антибиотикограмм штаммов холерного вибриона, полученных с использованием контрольного антибиотикочувствительного референсштамма V. Апробация работы. Основные положения диссертации были доложены на научных конференциях ФГУЗ РостНЙПЧИ Ростпотребнадзора в гг. Холера и патогенные для человека вибрионы. РостовнаДону, гг. Ставропольского НИПЧИ, Эпидемиологическая безопасность на Кавказе. Итоги и перспективы. Ставрополь, г. Окружающая среда и здоровье. Саратов, г. VIII съезде Всероссийского общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов. Москва, г. IV Общероссийской конференции Гомеостаз и инфекционный процесс. Сочи ОК Дагомыс, г. VIII Российской научнопрактической конференции по проблеме Холера РостовнаДону, г. VII и VIII Международных конференциях МАКМАХА8М по антимикробной терапии. Москва, , г. Диссертационная работа выполнена в рамках двух государственных тем ГР . Экспериментальное обоснование рациональных подходов к этиотропной терапии холеры, где автор являлась исполнителем и ГР . Разнообразие спектра маркеров антибиотикорезистентности у эпидемически значимых штаммов холерного вибриона, где автор является ответственным исполнителем. Публикации. Основные материалы диссертации опубликованы в научных работах, из которых 5 в центральной и 8 в региональной печати. Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 4 машинописных страницах, содержит таблицы, 3 рисунка, 8 литературных источников 4 отечественных и 5 иностранных.