Выявление и характеристика легионелл в потенциально опасных водных системах и модельных биопленках

• Автор: Дронина, Юлия Евгеньевна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 92 с. : 5 ил.

Содержание.
Содержание.

Г лава 1. Введение.

Г лава 2. Обзор литературы.

2.1. Современные представления о легионеллезной инфекции и е возбудителе.

2.1.1. Современные представления о легионеллезной инфекции.7

2.1.2 Общая характеристика легионелл.

2.2. Особенности экологии легионелл и их значение в распространении легионеллеза.

2.2.1. Взаимодействие легионелл с простейшими и другими микроорганизмами.

2.2.2. Биопленки легионелл

2.3. Методы выявления и идентификации легионелл в объектах окружающей среды.

2.3.1. Бактериологический метод выделения легионелл.
2.3.2. Другие методы выявления легионелл в объектах окружающей среды.
2.3.3. Методы идентификации и типирования легионелл.
Глава 3. Материалы и методы.
3.1. Использованные в работе штаммы легионелл.
3.2. Методы культивирования легионелл.
3.3. Получение биоплнок
3.3.1. Получение биоплнок легионелл
3.3.2. Получение биоплнок других микроорганизмов.
3.4. Бактериологическое выделение легионелл.
3.5. Определение легионелл методом ПЦРРВ.
3.5.1. Определение легионелл с помощью тестсистемы Кваити i
. и Кванти i i.
3.5.2.Определение легионелл с помощью тестсистемы АМГ1ЛИЛЕГРВ
3.6. Определение чувствительности легионелл к действию
дезинфицирующих препаратов.
3.7. Статистические методы обработки результатов
Г лава 4. Результаты
4.1. Выделение легионелл из объектов окружающей среды.
4.2. Выявление легионелл в объектах окружающей среды с помощью
П1Ц в реальном времени
4.2.1. Отработка методики ПЦР в реальном времени в модельных системах.
4.2.2. Применение ПЦР в реальном времени для выявления легионелл в воде и биоплнках потенциально опасных водных систем.
4.3. Формирование биопленок легионелл.
4.3.1. Формирование моиовидовых биоплнок легионелл.
4.3.2. Биоплнки легионелл в ассоциации с другими микроорганизмами.
4.4. Изучение эффективности действия дезинфицирующих
препаратов на легионеллы.
4.4.1. Изучение действия дезинфицирующих препаратов на модели биопленок легионелл
4.4.2. Изучение действия препарата СаносилСупер на легионеллы в градирне промышленного предприятия.
Глава 5. ОБСУЖДЕНИЕ.
Глава 6. ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


В этом отношении, экспериментальное изучение процесса образования биоплнок и анализ эффективности на данной модели различных методов ускоренного выявления возбудителя и оценка действия дезинфекционных средств является одним из наиболее перспективных подходов. Цель работы разработать методы выявления и количественного определения легионелл в потенциально опасных водных системах и модельных биопленках. Получить коллекцию отечественных штаммов легионелл, выделенных из потенциально опасных водных объектов окружающей среды. Разработать и внедрить в практику алгоритм количественного выявления легионелл в модельных и природных образцах воды и биоплепок с помощью сочетания бактериологического метода и ГТЦР в реальном времени. Изучить способность к формированию биопленок у различных видов и штаммов легионелл при различных условиях культивирования, выявить различия в способности к образованию биопленок у разных штаммов легионелл. Изучить способность легионелл к персистенции в ассоциативных биопленках, образованных другими микроорганизмами. Разработать методику оценки действия дезинфекционных средств. Изучить эффективность действия различных дезинфекционных препаратов против легионелл на модельных биопленках и в водных системах. Создана коллекция отечественных штаммов легионелл, выделенных из потенциально опасных водных объектов окружающей среды градирни промышленных предприятий, система автономного и городского водоснабжения, бассейн. Впервые разработан алгоритм выявления легионелл в потенциально опасных водных системах, основанный на сочетании ПЦР в реальном времени и бактериологических методов. Впервые выявлен различный уровень способности штаммов легионелл к формированию моновидовых биопленок. Разработаны методические подходы к оценке действия дезинфицирующих препаратов на легионеллы на модели биопленок и в водных системах. Разработанный алгоритм определения легионелл в водных системах и биопленках на основе скрининга с помощью ПЦРРВ, с последующим бактериологическим подтверждением, включен в качестве базового метода в методические указания Роспотребнадзора МУК 4. Выявление бактерий i i в объектах окружающей среды. Разработана методика определения эффективности действия дезинфекционных препаратов на модельных биопленках легионелл. Материалы диссертации доложены на IX съезде Всероссийского общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов Москва, апрель и конференции Европейской рабочей группы по легионеллезу Лиссабон, Стокгольм, конгрессе Европейского респираторного общества Берлин, . Г лава 2. Обзор литературы. Современные представления о легионеллезной инфекции. Легиоиеллезная инфекция известна уже более лет. Достаточно хорошо изучены различные аспекты биологии и экологии возбудителя, разработаны методы диагностики и лечения. Тем не менее, легионеллы представляют существенную угрозу общественному здоровью, вызывая крупные эпидемические вспышки в различных странах мира с высоким процентом летальных исходов 5. Болес того, за последние годы значительный интерес к проблеме легионеллеза не только сохранился, но и постоянно растет во всем мире. Хотя в целом уровень заболеваемости легионеллезом относительно, например, пневмококковой инфекции невелик, многочисленные спорадические и групповые случаи, десятки эпидемических вспышек регулярно выявляют в различных странах мира. Наиболее типичные примеры последних лет крупная эпидемия среди посетителей выставки цветов в Голландии г. Австралии г. Мурсия, Испания г. Франции г. Норвегии г. На территории Российской Федерации первые случаи легионеллеза описаны еще в г. В июле г. Свердловской области г. Верхняя Пышма, во время которой заболели 7 человек, 5 из них умерли 2. Возбудитель легионеллеза i i, как и другие виды семейства i более видов, большая часть которых является сапрофитами и не представляет опасности для человека, широко распространены в природе обитая в пресноводных водоемах, где они паразитируют в водных амебах и других простейших 8, .