Биологические свойства штаммов Bacillus anthracis, выделенных в очагах сибирской язвы Ставропольского края

• Автор: Лысогора, Елизавета Вильевна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Ростов-на-Дону
• Количество страниц: 236 с.

СОДЕРЖАНИЕ стр.

1дси

ГЛАВА I. Обзор литературы

1.1. Микробиология и лабораторная диагностика i i

1.2. Эпизоотология сибирской язвы

1.3. Эпидемиология сибирской язвы

1.4. Сибирская язва на Северном Кавказе

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ГЛАВА .Материалы и методы

2.1. Штаммы микроорганизмов

2.2. Экспериментальные животные

2.3. Химические реактивы, питательные среды

2.4. Методы, используемые для характеристики сибиреязвенных штаммов
2.4.1. Методы выделения и культивирования сибиреязвенного микроба на дифференциальнодиагностической питательной среде
2.4.2. Тест с сибиреязвенным бактериофагом
2.4.3. Капсулообразование i vi
2.4.4. Тест жемчужное ожерелье
2.4.5. Гемолиз эритроцитов барана
2.4.6. Тест на лецитинаэу
2.4.7. Определение протеолитической и гемолитической активности
2.4.8. Определение питательных потребностей
2.4.9. Определение токсинообразования и капсулообразования на
среде СОПЭК
2.4 Определение чувствительности сибиреязвенного
микроба к антибиотикам
2.4ПЦР
2.5. Методы статистической обработки
ГЛАВА III. Эянэоотологичсские и эпидемиологические особенности сибирской изны и Ставропольском крае
3.1. Краткая климатогеографическая характеристика и
экономика Северного Кавказа и Ставропольского края
3.2. Заболеваемость животных сибирской язвой в Ставропольском крае 3.3 Заболеваемость людей сибирской язвой в Ставропольском крае
ГЛАВА IV. Характеристика штаммов В. алкгасз, выделенных в
очагзх сибирской язвы в Ставропольском крае
4.1. Выделение штаммов сибиреязвенного микроба в очагах
сибирской язвы в Ставропольском крае
4.2. Характеристика основных биологических свойств сибиреязвенных штаммов
4.3.Чувствительность сибиреязвенных штаммов, выделенных в
Ставропольском крае, к различным антибиотикам
4.4. Изучение факторов патогенности штаммов сибиреязвенного микроба, выделенных в Ставропольском крае, с помощью ГИДР
4.4.Разработка нового метода определения токсино и капсулообразования у сибиреязвенного микроба
ГЛАВА V. Характеристика стационарно неблагополучных
по сибирской язве пунктов и отдельных вспышек сибирской язвы на территории Ставропольского края
5.1. Стационарно неблагополучные по сибирской язве пункты
5.2. Вспышки сибирской язвы в Ставропольском крае и
проводимые в них профилактические мероприятия
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ


На протяжении многих десятилетий отсутствие гемолитической активности у сибиреязвенного микроба считалось классическим дифференциальнодиагностическим признаком, отличающим его от близкородственных салрофитов Груз Е. В., . А.И. Ипатенко Н. Г. с соавт. Однако все чаще обнаруживались штаммы, вырабатывающие ферменты группы гемолизинов, активность которых, по мнению ряда исследователей, проявлялась в разной степени и зависела от характера питательных сред и видовой принадлежности используемых в опытах эритроцитов Груз Е. В., Цыганкова О. И., Вигоп К. Ь., и др. Высказывалось безоговорочное признание гемолитических свойств, предполагалась их роль в проявлении патогенных свойств сибиреязвенного микроба. Представляется возможным участие гемолитических факторов сибиреязвенного микроба в развитии патологического процесса при сибирской язве xi Б. Ткаченко В. В., Колесов С. В., . О.И. Цыганковой, Н. П. Буравцевой были разработаны методы определения гемолитической и протеолитической активности штаммов сибиреязвенного микроба. В результате было выявлено, что такие белки, как желатин и казеин очень активно расщепляют все без исключения штаммы. Яичный альбумин не разлагал ни один из исследуемых штаммов. По отношению к гемоглобину и бычьему сывороточному альбумину все штаммы делятся на две группы штаммы, расщепляющие оба белка, и штаммы, не расщепляющие ни один из них. Способность расщеплять указанные белки совпадает со способностью этих штаммов лизировать отмытые эритроциты барана. Это характерно дзя большинства типичных вирулентных штаммов, особенно свежевыделенных. Лишены гемолитической и протеолитической активности атипичные штаммы I типа, а также штаммы II и 1 типов по Торну. Таким образом, нарушение гемолитической и протеолитической активности, как правило, свойственно штаммам с низкой вирулентностью, обусловленной атипичным капсуло и токсинообразован нем, имеющим дополнительные питательные потребности. В.А. Ярощук с соавт. КарачаевоЧеркессии. Популяция этих штаммов отличалась по капсуло и токсинообразованию, а два штамма, в отличие от типичных, не лизировали отмытые эритроциты барана и не расщепляли альбумин и гемоглобин. С середины х годов интенсивно вводятся молекулярногенетические методы исследования В. X и рХ привело к созданию новых высокоэффективных методов и средств диагностики и дифференциации Степанов . Исследования по изучению генетики сибиреязвенного микроба, интенсивно проводимые зарубежными и отечественными авторами, сводятся к разрешению двух основных вопросов это определение места сибиреязвенного микроба в роде i и определение внутривидовых различий среди сибиреязвенных штаммов. Некоторые данные генетических исследований позволяют считать, что В. В. i и В iii являются разновидностями одного вида . .В. . . . Современные генетические методы исследования, такие как определение плазмидного профиля, ГПДР с различными праймерами, позволяют вплотную подойти к разрешению этой проблемы. Однако существующая тесная связь сибиреязвенного микроба с другими представителями спорообразуюших сапрофитов в значительной степени затрудняет лабораторную диагностику, особенно при выделении возбудителя сибирской язвы из объектов внешней среды. Наиболее очевидными являются различия в плазмидном составе. Так, если сибиреязвенный микроб имеет только две собственные плазмиды X и рХ, В. В iii имеют большее количество внехромосомных элементов . В последнее десятилетие для целей идентификации бактерий применяют метод генетического зондирования с использованием специфических ДНКзондов. Конструирование ДНКзондов основано на том предположении, что в геноме любого микроорганизма содержатся уникальные нуклеотидные последовательности, которые являются видоспецифическими для данного организма, а значит, могут применяться в качестве мишени для гибридизации с целью установления видовой принадлежности v . Для специфического определения В. ДНК и олигонуклеотидные зонды.