Анализ антигенной структуры Helicobacter pylori и разработка тест-системы для неинвазивной диагностики хеликобактериоза

• Автор: Вахрамеева, Мария Сергеевна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 108 с.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Введение

Обзор литературы

Глава 1. Некоторые данные о биологических и эпидемиологических

особенностях i vi

Глава 2. Антигены i i и их роль в патогенезе и иммунитете

2.1. Антигеныый состав i i

2.1.1. Токсины i i

2.1.2. Оантиген i i, химическая структура, серотипы

2.2. Роль антигенов i i в патогенезе и иммунитете

Глава 3. Современная диагностика инфекций, ассоциированных с i

i
Собственные исследования
Глава 4. Материалы и методы исследования
Глава 5. Иммуноэлектрофоретический анализ антигенного состава i
i
Глава 6. Разработка и применение тестсистем для определения Оантигена
маркера i i
6.1. Тестсистема для реакции коагглютинации на стекле
6.2. Закономерности циркуляции Оантигена i i при
инфекционном процессе
6.3. Частота выявления антигена i i при кишечных
инфекциях
6.4. Высокочувствительный способ выявления Оантигена i
i в биологическом материале в реакции коагглютинации
на иммунологических планшетах
6.5. Мультианализ кишечных инфекций на планшетах
Глава 7. Разработка тестсистемы для выявления патогенетически
значимых высокомолекулярных белков i i
7.1. Конструирование диагностикума для выявления
высокомолекулярных белков i i в реакции коагглютинации
на планшетах
7.2. Определение высокомолекулярных белков i i в биологических жидкостях больных и здоровых ЛИЦ
7.2.1. Выявление высокомолекулярных антигенов i i
у больных в ходе проспективных исследований
7.2.2. Использование диагностикума для определения высокомолекулярных белков i i у больных язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки
Заключение
Выводы
Благодарность
Список литературы


Ключевым вопросом в этих и других мало изученных разделах хеликобактериоза является отсутствие быстрых, чувствительных и простых диагностических методов, необходимых для скрининга, длительного мониторирования и многократных неинвазивных исследований, которые позволили бы определять не только наличие Н. Необходимы также неинвазивные методы оценки эффективности антихеликобактерной эрадикационной терапии. Накопленные к настоящему времени данные литературы и многолетний опыт работы лаборатории иммунологии энтеральных инфекций ГУ НИИЭМ им. Н. Ф. Гамалеи РАМН по изучению антигенной структуры возбудителей и антигенодиагностики кишечных инфекций , , , , , , , , позволяют определить основные патогенетически значимые антигены Н. Методом выбора в настоящем исследовании явилась реакция коагглютинации РКА в двух основных модификациях для определения термостабильного специфического алгигена липополисахарида ЛПС и термолабильных высокомолекулярных белков ВМБ Н. Актуальность выбранной темы и своевременность ее разработки позволяет сформулировать цель и задачи нашей работы. Изучение антигенного состава Н. Изучить антигенный состав Н. Выделить Оантигены и высокомолекулярные белки Н. Изучить закономерности циркуляции антигенов Н. Разработать и испытать тестсистемы для выявления специфических Оантигена и высокомолекулярных белков Н. Изучить частоту встречаемости антигенов Н. Получены новые данные об антигенной структуре Н. При исследованиях методом иммуноэлектрофореза в агаре установлено, что Н. Среди них обнаружены и охарактеризованы термостабильный Оантиген с компонентами анодной и катодной подвижности и специфический относительно термолабильный кислый полисахаридный антиген, который по своим свойствам может быть отнесен к группе Кантигенов. Установлено, что иммунофореграммы Н. относятся к одному иммунофоретипу, однако, полисахаридные О и Кантигены этих возбудителей четко отличаются по своей специфичности. Показано, что Оантиген Н. Специфический Оантиген Н. ОКИНЭ в случаев. Установлена высокая частота одновременного выявления антигенов Н. Оантигенов других возбудителей кишечных инфекций , при этом Н. Впервые в ходе проспективных многолетних исследований на добровольцах 7 человек прослежена частота встречаемости антигенов Н. Впервые определена динамика наличия высокомолекулярных белков, являющихся маркерами цитотоксинпродуцирующих штаммов Н. Установлено, что в период обострения заболевания наблюдается увеличение титров этих белков Н. Дополнительно к разработанным ранее в лаборатории диагностикумам ти наименований для определения маркеров возбудителей основных кишечных инфекций впервые разработана специфическая и чувствительная тестсистема для определения Оантигена Н. На основе результатов работы утверждено Наставление по применению реакции коагглютинации для неинвазивной экспрессдиагностики хеликобактерной инфекции ГУ НИИЭМ им. Н. Ф. Гамалеи РАМН, г. Сконструированы диагностикумы для выявления Оантигеновмаркеров возбудителей кишечных инфекций нозологических групп, в том числе Н. Показана принципиальная возможность и целесообразность использования этого метода для мультианализа с целью этиологической и дифференциальной диагностики кишечных инфекций в течение часов полуколичественным способом выявления антигенов возбудителей в биологических жидкостях больных. Разработан диагностикум для реакции коагглютинации на планшете с целью выявления в биологическом материале больных комплекса высокомолекулярных белков с молекулярной массой кД и выше. Реакция коагглютинации с ВМБдиагностикумом позволяет выявлять белковые антигенымаркеры цитотоксинпродуцирующих штаммов Н. Н. i, но и способность штамма продуцировать токсины. Этот метод позволяет в более ранние сроки оценивать эффективность эрадикационной терапии. Способ получения диагностикума для выявления антигенов Н. Дальнейшие расширенные клинические испытания диагностикумов для выявления Оантигенов и высокомолекулярных белков, являющихся маркерами цитотоксинпродуцирующих штаммов Н. РКА позволят определить возможности использования их для скрининга лиц и определения инфицирования Н.