Особенности экспериментальной инфекции, вызванной вариантами вируса клещевого энцефалита с высокой и низкой нейроинвазивностью

• Автор: Кондратьева, Ярослава Юрьевна
• Шифр специальности: 03.00.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Московская обл.
• Количество страниц: 138 с. : 11 ил.

СОДЕРЖАНИЕМ АНТИТЕЛ К БЕЛКАМ ВКЭ В СЫВОРОТКАХ КРОВИ ЛЮДЕЙ, БОЛЬНЫХ КЛЕЩЕВЫМ ЭНЦЕФАЛИТОМ
3.7. ПРОТЕКТИВНЫЙ ИММУНИТЕТ ПРИ ИНАППАРАНТНОЙ ФОРМЕ КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА, ВЫЗВАННОЙ ВАРИАНТОМ М
3.9. Протективная активность бактериальной плазмиды, несущей ген НЕСТРУКТУРНОГО БЕЛКА I ВКЗ.

3.9. Молекулярнобиологическая характеристика белка Е вариантов вируса

КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА С ВЫСОКОЙ И НИЗКОЙ НЕЙРОИНВАЗИВНОСТЬЮ

4. ОБСУЖДЕНИЕ

выводы.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Синтез белков ВКЭ в зараженной клетке идет на фоне клеточного синтеза, ингибирования которого не происходит. Обнаруживаемый в инфицированных флавивирусами клетках набор вирусспецифических белков не всегда соответствует тому, который можно предположить на основе анализа нуклеотидной последовательности геномной РНК вируса. У ряда вирусов некоторые белки могут совсем не обнаруживаться, либо отличаться по электрофоретической подвижности в полиакриламидном геле ПААГ от расчетных. Принято считать, что в зараженных вирусом клегках продуцируются следующие белки структурные белки С, Е, ргМ предшественник обнаруживаемого только в составе вириона белка М, крупные неструктурные белки 1, 3, 5 и набор мелких мембрансвязанных белков, обозначаемых как 2, 2, 4, 4 i, . Согласно общепринятой модели, трансляция полипротеина происходит на поверхности шероховатого эндоплазматического ретикулума ЭР и протекает таким образом, что структурные белки ргМ и Е, а также неструктурный белок 1 оказываются на внутренней стороне мембраны, в то время как остальные на цитоплазматической. В разрезании полипротеина на отдельные белки участвуют как клеточные, так и вирусные протеазы. С внутренней стороны мембраны ЭР в этом процессе участвует клеточная протеаза сигналаза i, . На концах белков ргМ, Е, 1 и 4 участки, богатые гидрофобными аминокислотами, являются сигнальными последовательностями для сигналазы. Участки гидролиза другого типа, имеющие в своем составе два остатка основных аминокислот или , могуг узнаваться вирусспецифической сериновой протеазой i . В результате такого гидролиза образуются белки С, 2, 3, 4, 5. Нарушение протеазных функций белка 3 или внесение мутаций в определенные сайты гидролиза приводят к нежизнеспособности вируса i, . Расщепление белка ргМ осуществляется в процессе созревания вириона под действием клеточного фуринподобиого фермента i, . Как уже отмечалось выше, в состав вириона ВКЭ входят три структурных белка белок нуклсокапсида С, мембранный белок М и белок внешней оболочки Е. Белок С небольшой М. Д белок, формирующий нуклеокапсид вириона. Он содержит большое число основных аминокислот, что необходимо для нейтрализации кислого заряда РНК в составе нуклсокапсида. Общая гомология его аминокислотной последовательности среди флавивирусов невысока, однако, отдельные гидрофобные и гидрофильные участки высококонсервативны I . Кроме структурной роли, повидимому, этот белок может быть вовлечен в регуляцию репликации вирусной РНК . Основные остатки концентрируются на и С концах белка и, вероятно, действуют кооперативно, специфически связывая геномную РНК. Центральная часть этого белка содержит гидрофобный домен, который взаимодействует с клеточной мембраной и может играть роль в сборке вириона i, i i, . Белок М М. Д, как уже говорилось ранее, появляется в результате разрезания гликопротсина ргМ М. Д, после чего образуется белок М и концевой сегмент, который выходит во внеклеточное пространство . Белок М состоит из короткого внешнего домена а. С и обеспечивает связь вирусной мембраны с нуклеокапсидом i, . В аминокислотной последовательности, определенной для белка М, нет сайтов гликозилирования Плетнев и др. Отрезаемый внешний домен белка ргМ гидрофилен и несет от одного до трех сайтов гликозилирования по типу, а также имеет жесткую структуру за счет имеющихся в его составе трех дисульфидных связей i, . Полагают, что белок ргМ играет важную роль в созревании вирионов флавивирусов, так как расщепление ргМ в М связано с изменением инфекционности вируса , и способности к слиянию вирусной оболочки с клеточной мембраной i . ЛТ к белку ргМ могут опосредовать иммунный ответ, возможно, благодаря нейтрализации вирионов, которые на своей поверхности содержат некоторое количество непроцессированного ргМ i i, . Белок Е М. Д основной гликопротеин оболочки, играющий ключевую роль в процессах адсорбции, взаимодействия со специфическим рецептором, слияния с мембранами, во взаимодействии с иммунной системой хозяина, а также определяющий такие важные свойства флавивирусов, как нейроинвазивность и ненровирулентность для экспериментальных животных i, i, i, .