Характеристика вирулентных серотипов энтеровирусов и их роль в генезе серозных менингитов и острых вялых параличей

• Автор: Мурина, Елена Александровна
• Шифр специальности: 03.00.06
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 295 с. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Краткие сведения о классификации, биологии и генетике энтеровирусов .

1.2. Клинические аспекты инфекции

1.3. Методические подходы к лабораторной диагностике энтеровирусных инфекций

1.4. Некоторые сведения о распространении энтеровирусов и связь отдельных серотипов с нозологическими формами инфекции .

1.5. Структура инфекционных заболеваний периферической нервной системы

1.6. Современные аспекты патогенеза и клиники полиомиелита и полиомиелитоподобных заболеваний у детей.

1.7. Заключение.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Глава 3. МЕТОДИЧЕСКИЕ ПОДХОДЫ К РАЗРАБОТКЕ НОВЫХ И
МОДИФИКАЦИИ КЛАССИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ДИАГНОСТИКИ ЭНТЕРОВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ
3.1. Модификации классических методов диагностики энтеровирусов при эпидемических вспышках.
3.2. Модификация классических методов диагностики энтеровирусов при обследовании локализованных вспышек
3.3. Обследование детей для дифференциальной диагностики нейроинфекций различной этиологии.
3.4. Разработка оригинального экспрессного теста обнаружения энтеровирусов
3.5. Методика постановки экспрессдиагностики энтеровирусной
инфекции.
3.6. Заключение
Глава 4. ЦИРКУЛЯЦИЯ ЭНТЕРОВИРУСОВ В САНКТПЕТЕРБУРГЕ В ПЕРИОД ГОДОВ В СВЕТЕ ДИФФЕРЕНЦИРОВКИ ИХ ВИРУСОЛОГИЧЕСКИХ ХАРАКТЕРИСТИК.
4.1. Характеристика энтеровирусных серозных менингитов в СанктПетербурге у детей.
4.2. Вирусологические характеристики доминирующих, сопутствующих и жарких штаммов энтеровирусов, выделенных от детей с диагнозом серозный менингит.
4.3. Характеристика энтеровирусов, выделенных у взрослого контингента больных в СанктПетербурге
4.4. Состояние интерфероногенеза при энтеровирусной инфекции, вызванной вирусами различной степени доминирования
4.4.1. Показатели интерфероногенеза у больных с диагнозом серозный менингит, вызванным доминирующими и сопутствующими энтеро вирусами
4.4.2. Уровень интерферона в крови больных с диагнозом серозный менингит.
4.4.3. Уровень интерферона в ликворе больных с диагнозом серозный менингит, вызванный доминирующими вирусами.
4.4.4. Интерфероновая реакция лейкоцитов по способности выработки альфаинтерферона.
4.4.5. Интерферирующая активность выделенных штаммов энтеровирусов в отношении тествируса Сендай
4.4.6. Интерфероночувствительность выделенных штаммов Энтеровирусов по тестированию ти гра реаферона
4.5. Заключение.
Глава 5. ВИРУСОЛОГИЧЕСКИЙ МОНИТОРИНГ ЭНТЕРОВИРУСНЫХ
СЕРОЗНЫХ МЕНИНГИТОВ
5.1. Вирусологическая характеристика энтеровирусной инфекции в зависимости от доминантности серотипов и особенностей их размножения при различных температурах
5.1.1. Показатели ЯСТмаркера в приложении к доминирующим энтеровирусным штаммам
5.1.2. Характерологические показатели ЯСТмаркера у сопутствующих и жарких энтеровирусных штаммов .
5.2. Изучение вирусологических характеристик доминирующих, сопутствующих и жарких типов энтеровирусов в сопоставлении с клиническими параметрами серозных менингитов в период с по год в СанктПетербурге.
5.3. Заключение
Глава 6. ВИРУСОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ОСТРЫХ ВЯЛЫХ
ПАРЕЗОВ В ПЕРИОД ПОЛИОМИЕЛИТНОЙ ИММУНИЗАЦИИ . .
6.1. Некоторые вирусологические аспекты при инфекционных поражениях спинного мозга у детей
6.2. Значимость латентной формы энтеровирусной инфекции в генсзе инфекционных нейропоражений
6.3. Интерфероновый статус больных с ОВП, поступивших в клинику НИИДИ в период с годов.
6.3.1. Интерфероновый статус у больных с заболеванием острый вялый парез, поступившим до суток после проведения полиомиелитной иммунизации
6.3.2. Интерфероногенез у детей с диагнозом острый вялый парез, заболевших спустя дней после проведения полиомиелитной вакцинации.
6.4. Заключение
Глава 7. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


В настоящее время существует достаточно много методических приемов, позволяющих решать эту проблему. Это и классические методы вирусологии, связанные и выделением вирусов на тканевых культурах, и иммунохимические методы тестирования антигенов и антител, получающие все более широкое распространение благодаря быстрому развитию биотехнологической науки. По мнению ведущих ученых, наиболее перспективным направлением для создания диагностических препаратов нового поколения являются именно молекулярнобиологические методы ,,0,0. Эти методы основаны на достижениях фундаментальных исследований в области вирусологии, генетики и иммунологии 7,4,5. В нашей стране с года имеется разрешение к применению в лабораторной диагностике рекомбинантных антигенов, полученных на основе методов генетической инженерии , , , . Установление диагноза в неясных случаях заболевания. Определение типа вируса, вызвавшего ту или иную вспышку болезни. Определение распространенности среди населения кишечного вирусоносительства. Определение иммунологического состояния населения к тому или иному энтеровирусу. Для решения данных задач, поставленных перед врачомвирусологом, имеются три основных направления в методических подходах. Первые два это наиболее проверенные и считающиеся классическими для лабораторной диагностики энтеровирусных инфекций метод идентификации энтеровирусных штаммов на культуре ткани и использование культуральных серологических реакций, для определения антител 7, 7, 5, 8, 3. Третьим направлением в лабораторной работе являются ускоренные методы идентификации энтеровирусов. Выделение вируса из материалов от больного или здорового вирусоносителя и титрование выделенного штамма вируса. Определение серотипа выделенного штамма с помощью реакции нейтрализации этого вируса типоспецифической диагностической сывороткой с последующим выявлением этой реакции в культуре тканей. Проведение внутритиповой серо дифференциации для определения антигенного сходства выделенного штамма с другими штаммами того же иммунологического типа, в том числе с вакцинными штаммами. Определение маркирующих признаков способность размножаться при различных температурах инкубации iv i i . Определение уровней антител к различным энтеровирусам в сыворотках больных и реконвалесцентов, а также в сыворотках здоровых лиц. Использование для идентификации смесей сывороток поливалентное типирование дает лишь небольшой выигрыш во времени и некоторое снижение трудоемкости. В культуре клеток выделение вируса из клинического материала и его типирование занимает в среднем от до дней, при этом проб от пациентов с энтеровирусной инфекцией оказываются отрицательными вследствие нейтрализации вируса антителами i i, изза неправильного забора, хранения и транспортировки образцов или изза слабой чувствительности используемых линий клеток 6, 1, 1, 6, 8. В лабораторной практической работе большое внимание уделяется серологическим методам исследования при энтеровирусных инфекциях. Для титрования антител могут быть применены реакция нейтрализации, реакция связывания комплемента и реакция преципитации. При проведении серологической диагностики необходимо выявление четырехкратного нарастания титра антител в пробе сыворотки, взятой в период реконвалесценции, по сравнению с титром антител в пробе, взятой в острой стадии болезни. Цитопатогенному методу титром антител считают то наивысшее разведение сыворотки, которое подавляет цитопатогенное действие рабочей дозы вируса во всех зараженных данной смесью пробирках. Методу цветной пробы. Методу бляшек, основанному на образовании вирусом негативных колоний бляшек в однослойных культурах, залитых агаровой средой, содержащей витальный краситель нейтральрот. Б. Реакция связывания комплемента выявляет взаимодействие антигена с антителом в среде, содержащей третий дополнительный компонент реакции, комплемент, способный адсорбироваться на специфическом иммунном комплексе. Наличие или отсутствие комплемента в заключительной фазе реакции определяется с помощью индикаторной гемолитической системы.