Серологическая диагностика лихорадки Западного Нила

• Автор: Шишкина, Екатерина Олеговна
• Шифр специальности: 03.00.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 156 с.

Введение

Часть I. Литературный обзор. Лихорадки Западного Нила ЛЗН

1. История изучения вируса Западного Нила ЗН.

2. Классификация и характеристика вируса ЗН

3. Эпидемиология ЛЗН

3.1. Распространение вируса ЗН

3.2. Заболеваемость и летальность при ЛЗН.

3.3. Сезонность ЛЗН.

3.4. Иммуноструктура населения к вирусу ЗН

3.5. Переносчики вируса ЗН

3.6. Резервуары вируса ЗН.

4. Клиническая картина ЛЗН.
5. Патологическая анатомия при ЛЗН.
6. Лечение
6.1. Принципы лечения больных ЛЗН.
6.2. Экспериментальная оценка активности противовирусных препаратов.
7. Специфическая диагностика ЛЗН
7.1. Вирусологическая диагностика
7.1.1. Методы выделения вируса ЗН.ЗЬ
7.1.2. Методы индикации вируса в полевых и клинических материалах.
7.2. Серологическая диагностика ЛЗН
7.2.1. Методы обнаружения специфических антител у больных ЛЗН
и эффективность их применения.
7.2.2. Динамика различных видов антител у больных ЛЗН.
8. Профилактика ЛЗН.
Заключение.
Часть П. Собственные исследования Глава 1. Материалы и методы
1.1. Сыворотки крови больных и здоровых людей.
1.2. Использованные вирусы и штаммы.
1.3. Иммунные асцитные жидкости ИАЖ белых мышей.
1.4. Выделение иммуноглобулинов.
1.5. Получение перокскдных коньюгатов.
1.6. Клеточные культуры.
1.7. Методы исследования
1.7.1. Реакция нейтрализации в культуре клеток Уего Е
1.7.2. Иммуноферментный анализ
1.7.2.1. ИФА для определения антигена
1.7.2.2. Непрямой метод сэндвичИФА для определения специфических 1 ИФАДО.
1.7.2.3. Метод захвата иммуноглобулинов класса М МАСЕЫБА
1.7.3. Реакция торможения гемагглютинации РТГА.
1.7.4. Реакция диффузионной преципитации в агаре РДПА
1.7.5. Реакция встречного иммунофореза ВИЭФ
1.7.6.Статистические методы
Глава 2. Серологическая диагностика ЛЗН
2.1. Доказательства роли вируса ЗН в этиологии эпидемической вспышки ЛЗН
на юге России в г
2.2. Результаты обследования в ИФА сывороток крови и проб СМЖ больных
ЛЗН на антиген вируса ЗН
2.3. Результаты обследования сывороток и СМЖ больных на антитела к вирусу ЗН в ИФАВД ИФАДО, РТГА, РДПА и ВИЭФ.
2.3.1. Данные ИФАДО МАСЕША
2.3.2. Данные ИФАв
2.3.3. Данные РТГА
2.3.4. Данные РДПА и ВИЭФ.
2.3.5. Данные параллельного обследования сывороток крови больных ЛЗН в пяти серологических реакциях МАСЕЫ8А,ИФА ДО, РТГА, РДПА и ВИЭФ
2.3.6. Сравнение эффективности использования МАСЕ1Л8А, ИФАДО и РТГА для серодиагностики ЛЗН.
Глава 3. Динамика специфических 1, ДО и антигемагппотининов у больных ЛЗН
3.1. Динамика специфических М, и антигемагглютининов, выявляемых в сыворотках крови и СМЖ больных ЛЗН в течении месяца от начала заболевания. Суммарные данные
3.2. Зависимость динамики специфических 1М, и антигемагглютининов от клинической формы болезни, возраста и пола
3.2.1. Динамика специфических 1М у больных с лихорадочной и нейроинфекционнойформами ЛЗН
3.2.2. Динамика специфических ДО у больных с лихорадочной и нейроинфекционной формами ЛЗН.
3.2.3. Динамика специфических антигемагглютининов у больных с лихорадочной и нейроинфекционными формами ЛЗН
3.2.4. Динамика специфических М у больных ЛЗН в разных возрастных группах.
3.2.5. Динамика специфических ДО у больных ЛЗН в разных возрастных группах.
3.2.6. Динамика специфических антигемагглютининов у больных ЛЗН в разных возрастных группах
3.2.7. Динамика специфических 1М у больных ЛЗН мужского и женского пола
3.2.8. Динамика специфических ДО у больных ЛЗН мужского и женского пола
3.2.9. Динамика специфических антигемагглютининов у больных ЛЗН мужского
и женского пола.
3.3. Типы иммунного ответа при ЛЗН.
3.4. Типы иммунных ответов у больных ЛЗН с нсйроинфекционной и лихорадочной
формами заболевания
Глава 4. Эпидемиологическая и клиническая характеристика ЛЗН
4.1. Эпидемиология ЛЗН.
4.1.1. Показатели заболеваемости, сезонность ЛЗН, половой, возрастной и социальнопрофессиональнный состав заболевших, летальность и эпиданамнез ЛЗН.
4.1.2. Изучение иммуноструктуры населения Астраханской области
к вирусу Западного Нила
4.1.3.Сравнение эффективности использования , ИФА1дС и РТГА
при изучении иммуноструктуры населения к вирусу ЗН.
4.2. Клиническая картина ЛЗН
Обсуждение.
Выводы.
Список литературы


В августесентябре г. России в Астраханской, Волгоградской областях и Краснодарском крае была зарегистрирована крупная эпидемическая вспышка ЛЗН 0 случаев. В результате выполнения настоящей работы впервые установлена роль вируса ЗН в этиологии 5 случаев ЛЗН в Волгоградской области и Краснодарском крае. На основании обследования сывороток крови больных в серологических реакциях с антигенами вирусов ЗН и антигеннородственных вирусов японского энцефалита, желтой лихорадки и энцефалита СентЛуис и ряда гетерологичных арбовирусов КГЛ и лихорадки Синдбис, установлена выраженная специфичность выявленных антител к вирусу ЗН. Серологическая экспрессдиагностика ЛЗН может основываться на результатах однократного обнаружения методом МАСЕША специфических в пробах СМЖ в титре 1 и в сыворотках крови , взятых в острый период болезни. При обследовании парных сывороток, помимо iI можно использовать также ИФА1ДО и РТГА. ДО и антигемагглютининов в парных сыворотках крови интервал между взятием первой и второй проб должен составлять, как правило, не менее дней. В сыворотках крови больных ЛЗН диагностические титры к вирусу ЗН обнаруживаются уже на дни заболевания, достигая максимальных уровней иногда на дни. Наибольшие показатели средних титров и антигемагглютининов соответственно 1 и приходятся на дни болезни. В некоторых случаях титры ДО в этот период составляют 1, а титры антигемагглютининов 1. ЛЗН на юге России в г. СССР и России. Более больных были в возрасте старше лет. Мужчины болели чаще ,6, чем женщины. Относительные показатели заболеваемости на населения составляли ,2 в г. Астрахани, 9,3 в сельских районах Астраханской области, ,7 в г. Волжском Волгоградской области, ,9 в г. Волгограде и ,1 в эндемичных сельских районах Волгоградской области. Летальность составила 7,7. Наблюдался полиморфизм клинических проявлений и отсутствие выраженных патогномоничных симптомов, поэтому ведущее значение в диагностике заболеваний имела специфическая серологическая диагностика. У больных с нейроинфекционной формой ЛЗН и у лиц старше лет в острый период болезни уровень специфических антител был достоверно выше, чем у больных с лихорадочной формой. Отмечены и некоторые другие особенности динамики и титров специфических антител, выявляемых у больных ЛЗН методами ИФАфМ, ИФА ДО и РТГА. У населения Астраханской области после эпидемической вспышки ЛЗН г. В октябре г. ЗН были обнаружены у 3,1 практически здоровых жителей г. Астрахани, что свидетельствовало о недавно перенесенной инаппарантной форме ЛЗН. В целом, за г. Астраханской области ,9 жителей сельской местности и ,0 горожан имели антитела к вирусу ЗН. В декабре г. Астраханской области процент доноров, серопозитивных к вирусу ЗН, составлял ,4. РТГА обладает значительно меньшей чувствительностью, чем и ИФАДО для обнаружения анамнестических антител к вирусу ЗН, поэтому информативность данных, полученных с помощью этой реакции при проведении сероэпидемиологических исследований, менее значительна. Апробация работы. Апробация работы состоялась на заседании Экспертного Специализированного Совета предварительной экспертизы диссертационных работ по медицинской вирусологии и эпидемиологии при НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского РАМН мая г. Результаты исследований представлены и обсуждены на заседании секции вирусологии Московского отделения Всероссийского научнопрактического общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов им. И.И. Мечникова ноября г. Иой Научной конференции с международным участием Проблемы инфекционной патологии в регионах Сибири, Дальнего Востока и Крайнего Севера г. Публикации. По теме диссертации опубликовано 7 научных статей в центральных научных журналах и 7 тезисов докладов в сборниках конференций. Объем н структур работы. Диссертация состоит из введения, обзора литература, 4 глав собственных исследований, обсуждения результатов, выводов и списка литературы отечественных и 4 зарубежных источников. Общий объем работы составляет 5 страниц машинописного текста, включающего таблиц и рисунков.