Роль естественных иммуномодулирующих факторов в патогенезе экспериментальных вирусных инфекций

• Автор: Ожерелков, Сергей Викторович
• Шифр специальности: 03.00.06
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 258 с.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ ГЛАВА 1. Стресс как фактор патогенеза вирусных инфекций

1.1. Проблема стресса.

1.2. Нейрогуморальная регуляция стресса.

1.3. Стресс индуцированная иммуносупрессия и е роль в изменении течения вирусного инфекционного процесса

ГЛАВА 2. Цитокины и их роль при вирусных инфекциях.

2.1. Активность цитокинов при вирусных инфекциях

2.2. Применение цитокинов и их индукторов при вирусных инфекциях.

2.3. Полипренилфосфаты индукторы цитокинов

ГЛАВА 3. Иммунокоррекция и иммуномодуляторы, применяемые для

коррекции иммунодефицитов .
ГЛАВА 4. Иммунология клещевого энцефалита ВО
ЗАКЛЮЧЕНИЕ К ОБЗОРУ ЛИТЕРАТУРЫ.
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.
ГЛАВА 5. Материалы и методы
1. Вирусы.
2. Животные.
3. Фоспренил
4. Цитокиновый профиль
5. Определение противовирусной активности Фоспренила в
культурах клеток
6. Определение адъювантного действия Фоспренила с вакцинами против бешенства и клещевого энцефалита
7. Индукция стресса у животных
7.1. Индукция физиологического стресса.
7.2. Индукция психогенного стресса
7.3. Определение состояния стресса у животных.
8. Клеточные суспензии.
9. Фракционирование клеточных суспензий
. Определение числа антителообразующих клеток
. Выявление антигеннеспецифических супрессоров у животных при стрессе
. Определение титров вируса Лангат в субпопуляциях спленоцитов стрессированных животных i vi.
. Исследование влияния стресса на функцию естественных киллеров
. Индукция вирус и стрессиндуцированной иммуносупрессии у мышей и е коррекция с помощью Фоспренила
. Определение протективной активности Фоспренила при экспериментальной инфекции, вызываемой вирусом клещевого энцефалита у мышей
. Определение протективной активности Фоспренила при экспериментальной инфекции, вызываемой вирусом полиомиелита у мышей.
. Исследование влияния полипренилфосфатов на вирионы
вне клетки в реакции прямой гемагглютинации
. Исследование стимуляции интерферона Фоспренилом в опытах i vi
.1. Выявление интерферона в клетках СПЭВ, заражнных вирусом клещевого энцефалита и в культуре, инфицированной вирусом при одновременном внесении Фоспренила и патогена.
.2. Изучение стимуляции интерферона Фоспренилом в культуре клеток Таурус1, инфицированных вирусом инфекционного ринотрахеита и аденовирусом
. Статистическая обработка результатов.
ГЛАВА 6. Характеристика нарушений гуморального и клеточного
иммунитета при физиологическом и психогенном стрессе у лабораторных животных.
6.1. Влияние физиологических температгры окружающей среды, гипокинезии и психогенных информационный стресс стрессоров на функции антителообразующих Вклеток
6.2. Стрессиндуцированная активация Тсупрессоров и их роль в патогенезе инфекции у мышей, заражнных вирусом Лангат
6.3. Нарушение функций естественных киллеров на фоне физиологического и психогенного стресса.
6.3.1. Подавление цитотоксической активности естественных киллеров под действием физиологических стресс факторов и при нагрузке
6.3.2. Снижение естественной противоопухолевой рези
стентности у мышей при стрессе.
ГЛАВА 7. Стрессиндуцированные изменения патогенеза экспериментальных флавивирусных инфекций
7.1. Активация бессимптомной инфекции, вызываемой вирусом Лангат у мышей на фоне стрессиндуцированной иммуносупрессии.
7.2. Утяжеление течения клинически выраженной инфекции, вызываемой вирусом клещевого энцефалита у мышей
при стрессе.
ГЛАВА 8. Механизмы стрессиндуцированных изменений течения флавивирусных инфекций и методы их коррекции с помощью Фоспренила.
8.1. Увеличение субпопуляции пермиссивных для вируса Лангат селезночных макрофагов у стрессированных животных
8.2. Коррекция вирус и стрессиндуцированной иммуносупрессии у мышей с помощью Фоспренила.
8.3. Коррекция стрессиндуцированных изменений течения вирусного инфекционного процесса с помощью Фоспренила.
8.3.1. Предотвращение стрессовой активации бессимтомной инфекции, вызываемой вирусом Лангат у мышей с помощью Фоспренила
8.3.2. Влияние Фоспренила на стрессиндуцированное утяжеление течения острой клинически выраженной инфекции, вызываемой вирусом клещевого энцефалита.
ГЛАВА 9. Противовирусное действие Фоспренила при экспериментальных инфекциях инфекциях, вызываемых вирусами клещевого энцефалита и полиомиелита у мышей и механизм протективного эффекта препарата, связанный с иммуномодуляцией
9.1. Изучение защитного эффекта Фоспренила при экспериментальном клещевом энцефалите у мышей.
9.2. Иммуномодулирующее действие Фоспренила при клещевом энцефалите один из механизмов противовирусного действия препарата
9.2.1. Стимуляция Фоспренилом в организме животных, зараженных вирусом клещевого энцефалита, ранней опосредованной вирусом индукции цитокинов ИЛ6, ФНОа, ИФНу.
9.3. Противовирусное действие Фоспренила при экспериментальной инфекции, вызываемой вирусом полиомиелита у мышей.
ГЛАВА . Особенности противовирусной активности Фоспренила на
этапах взаимодействия вирусклетка.
.1. Подавление размножения РНК вирус клещевого энцефалита, вирус диареи крупного рогатого скота и ДНК вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота содержащих вирусов в чувствительных культурах клеток в присутствии Фоспренила.
.2. Исследование противовирусной активности Фоспренила в отношении ДНК аденовирус и РНК вирус полиомиелита содержащих вирусов, не имеющих оболочки
.3. Взаимодействие Фоспренила и вирионов клещевого энцефалита вне клетки при использовании реакции гемагглютинации
.4. Изучение изменений вирулентности внутриклеточных и внеклеточных вирионов, вызываемых Фоспренилом
.5. Интерфероногенная активность Фоспренила один из механизмов противовирусного действия препарата на этапах взаимодействия вирусклетка.
ГЛАВА . Перспективы использования Фоспренила в качестве адъюванта некоторых противовирусных вакцин.
.1. Фоспренил значительно повышает протективный эффект вакцины против бешенства в опытах на животных
.2. Адъювантный эффект Фоспренила при вакцинации мышей против клещевого энцефалита
ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ.
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Полученные данные о стрессиндуцированной иммуносупрессии позволяют проводить отбор антистрессорных препаратов и иммуномодуляторов с целью адекватной иммунокоррекции и предотвращения осложнений течения вирусных инфекций при стрессе. Разработана экспериментальная схема лечения и профилактики КЭ с помощью ФП. Показано, что ФП обладают высоким протективным действием и при этом не вызывают персистенции ВКЭ в организме животных, что обосновывает дальнейшее исследование ФП в качестве средва этиотропной терапии КЭ. Полученные результаты позволяют рекомендовать препарат ФП для дальнейших испытаний в качестве эффективного средства, предотвращающего стрессиндуцированные осложнения течения вирусного инфекционного процесса, а также лечебнопрофилактического противовирусного препарата широкого спектра действия. С.В. Ожерелков является одним из авторов изобретения и разработчиков Фоспренила, на который выдан июня г. Российским агентством по патентам и товарным знакам патент на изобретение 7 Средство для профилактики и лечения инфекционных заболеваний и коррекции патологических состояний живого организма. Полученные в работе данные о противовирусном действии ФП при экспериментальном КЭ и полиомиелите, свидетельствуют о возможности создания лекарственной формы препарата и перспективности ее применения для профилактики и лечения вирусных инфекций, актуальных для человека. ФП прошел все стадии доклинических испытаний, и в настоящее время подготовлены документы для Минздрава России с целью получения разрешения клинических испытаний препарата в качестве средства этиотропной терапии некоторых вирусных заболеваний, в том числе КЭ. Аналогичные испытания ФП проводятся в Республике Беларусь. В настоящее время ФП рекомендован Департаментом Ветеринарии Минсельхозпрода России 4 2 от . При непосредственном участии автора получены экспериментальные и клинические данные, позволившие рекомендовать ФП для лечения и профилактики наиболее распространенных вирусных инфекций сельскохозяйственных животных диареи и инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота, а также трансмиссивного гастроэнтерита молочных поросят. Па основе экспериментальных данных, полученных автором, разработаны и успешно применяются схемы использования Фоспренила как антистрессорного препарата, иммунокорректора и адъюванта для ветеринарных вакцин. Полученные данные о механизмах противовирусного действия ФП не только значительно расширяют спектр использования ФП в ветеринарной практике, но и создают основу для создания лекарственной формы препарата для лечения и профилактики некоторых вирусных инфекций, играющих важную роль в инфекционной патологии человека. Основные положения, выносимые на защиту. Стресс, вызываемый физиологическими и психогенными факторами, индуцирует в организме животных нарушения функций гуморального и клеточного иммунного ответа. На фоне стрессиндуцированной иммуносупрессии у мышей наблюдается активация преимущественно бесимптомной инфекции, вызываемой ВЛ и утяжеление течения клинически выраженной инфекции, вызываемой ВКЭ. Препарат ФП обладает способностью предотвращать развитие стрессиндуцированной супрессии и транформацию бессимтомной инфекции, вызываемой ВЛ в клинически выраженную. ФП при определнной схеме применения эффективно защищает животных от острого КЭ. ДНК и РНКсодержащих вирусов в чувствительных культурах клеток. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ ГЛАВА 1. СТРЕСС КАК ФАКТОР ПАТОГЕНЕЗА ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ. Проблема стресса. В году Ганс Селье ввл понятие стресс для характеристики иеспецифической реации организма общего адаптационного синдрома в ответ на любое неблагоприятное внешнее воздействие . Теория стресса была предложена Г. Селье в году, опубликована в году, а наиболее полное е представление и развитие нашло сво отражение в более поздних работах автора ,,,0,1. В теории Селье стресс рассматривается с позиции физиологической реакции на физические, химические и органические факторы. Сохранение внутреннего равновесия обеспечивается процессами гомеостазиса. Организм реагирует на любой стрессор неспецифическим физиологическим возбуждением.