Молекулярно-биологические свойства бактериофагов 9В, 123, 788/8 Pseudomonas

• Автор: Семчук, Лидия Ивановна
• Шифр специальности: 03.00.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1991
• Место защиты: Киев
• Количество страниц: 138 с. : ил

1.1. Биологические особенности и распространенность бактериофагов рода

1.2. Морфологическое разнообразие и характеристика бактериофагов

1.3. Функции беЛКОЕ и морфогенез фаГОЕ

1.4. Организация геномов фагов

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛВДФАНИи

2.1. Источники бактерии и фагов

2.2. Получение препаративных количеств бактериофагов 9В, 3, , их очистка

и концентрация

2.2.1. Очистка и концентрация фэгоЕ методом дифференциального центрифугирования

2.2.2. Концентрирование фагов сернокислым аммонием

2.2.3. Центрифугирование в градиенте плотности хлористого цезия
2.3. Исследование параметров инфекционного процесса бактериофагов 9В, 3,
2.4. Определение спектра литического действия фагов
2.5. Определение действия на биологическую активность бактериофагов .
2.6. Чувствительность фагоЕ к ЭДТА .
2.7. Определение серологического родства изучаемых фагов
2.8. Электронномикроскопическое исследование
вирионов .
2.9. Определение коэффициента седиментации
вирионов .
2 Определение плавучей плотности в растворе хлористого цезия бактериофагов 9В,3,
2 Электрофоретический анализ полипептидного состава бактериофагов 9В,3,.
2 Изучение аминокислотного состава белков
фагов ЗВ, 3, .
2 Выделение нуклеиновых кислот бактериофагов
9В. 3, .
2 Определение коэффициента седиментации и молекулярных масс ДНК бактериофагов.
2 Определение содержания ГЦоснований в ДНК фагов по плавучей плотности е растворе хлористого цезия
2 Определение содержания гуанина и цитозина в
ДНК бактериофагов по кривым плавления
2 Рестрикицонный анализ ДНК .
2 Статистическая обработка полученных результатов
Глава 3. БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ФАГОВ 9В, 3,
3.1. Исследование морфологии негативных колоний
фагов 9В,3, на чувствительной культуре
3.2. Эффективность различных методов получения фаголиззтов на жидкой и твердой питательных средах
3.3. Спектр литического дейетЕИЯ фагов 9В, 3,
3.4. Изучение одиночного цикла развития фагоЕ
3.5. Изучение устойчивости фагов 9В,3, к влиянию ЭДТА
3.5.1. Изменение инфекционной активности фагов при различной концентрации ионов водорода бз
3.6. Изучение серологического родстЕа фагоЕ
Глава 4. ФИЗИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ФАГОВ ЧАСТИЦ И ИХ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ
4.1. Морфология бактериофагов .
4.2. Седиментзционные характеристики фагов.
4.3. Плавучая плотность вирионов в растворе хлористого цезия .
4.4. Основные характеристики ДНК фагов 9В,3,
4.5. Плавучая плотность ДНК бактериофагов 9ВД,
4.6. Определение содержания гуанина и цитозина в
ДНК фагов,методом термической денатурации
4.7. Молекулярная масса и коэффициенты седиментации ДНК бактериофагов 9В, 3 , .
Глава 5. ИЗУЧЕНИЕ БЕЛКОВ И НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ ФАГОВ
5.1. Полипептидиый состэе фагов
5.2. Суммарный аминокислотный состаЕ бактериофагов
5.3. Изучение геномов бактериофагов 9В, 3,
О б с у ж д е н и е юб
ВЫВОДЫ .
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Волгоград, , секции генетических проблем Человек и биосфера при ГКНТ СССР г . Киев, , УП съезде Украинского микробиологического общества г. Черновцы, , Интернациональном симпозиуме Молекулярная организация биологических структур Москва, , конференции Фитонциды. Бактериальные болезни растений г. Львов, . Публикации результатов исследований. Основные положения диссертационной работы отражены в опубликованных работах. Структура и объем работы. Диссертация изложена на 8 страницах машинописного текста, иллюстрирована II таблицами и рисунками, состоит из введения, обзора литературы, четырех глав экспериментальной части, обсуждения, выводов и списка литературы 3 источника, из них 8 иностранных авторов. Глава I. I.I. В настоящее время бактериофаги представлены довольно многочисленной группой описано около представителей 5 , разнообразной по строению и размерам , . Часть из них представлено псевдомонадными фагами, степень изученности которых различна, что затрудняет классификацию. Систематика бактериофагов, предлагавшаяся многими исследователями, основывалась на различных признаках , , , , , . В частности, для дифференциации фагов i и 7 предложили разделить фаги на 7 групп и подгрупп. Они основывались в первую очередь на морфологии вирионов. При классификации фагов в настоящее время в качестве таксономических критериев используют такие характеристики как морфология и структура частиц, тип нуклеиновой кислоты, физикохимические параметры. Используя эти признаки, все фаги сейчас разделены на семейств 0, . Применение таксономических критериев особенно важно для вновь выделенных вирулентных и умеренных фагов. Особый интерес представляют исследования лизогенного состояния бактериальных культур, являющихся потенциальными продуцентами умеренных фагов. В работах Я. Г.Кишко, В. Это относится, в частности и к бактериям рода . Так, и показали, что около ИЗОЛЯТОВ . ЯВЛЯЮТСЯ ЛИЗОГ6ННЫМИ И Продуцируют фаги , . Авторы указывают, что не всегда удается подобрать условия, позволяющие выделить новые изоляты умеренных фагов. Например, ни у одного из изолятор. Наблюдаемое явление вряд ли можно связать с особенностями культуры, так как в исследовании i с соавторами, использующих также . Автором описаны несколько изолятов фагов, спонтанно выделяющихся из этих культур изолированных от различных хозяев . В работах Я. Д, в условиях повышенной аэрации. При этом культуры выделяли несколько типов фаговых частиц. Из окружающей среды довольно успешно выделяют большое количество вирулентных фагов . При этом обнаруживается несколько десятков изолятов вирусов. Часто из одного источника выделяют представителей различных морфологических групп. Так, и 3 выделили бактериофагов ИЗ . Срвди них семь фагов обладали высокой специфичностью к флуоресцентным фитопатогеиным псевдомонадам и частично к группе . Кроме того, было дифференцировано
шесть фагов, специфичных в отношении патовара i, различающихся по морфологии. Они относились к четырем различным группам по классификации Бредли . Геномы выделенных вирусов представлены двухцепочными молекулами ДНК, обладающими транодуцирующими свойствами. В работе i описано шестьдесят фагов, специфич НЫХ К шести штаммам Ре. Между собой выделенные фаги дифференцировали по способности лизировать вирулентные и сапрофитные штаммы псевдомонад . Это указывает на большую, если не повсеместную, распространенность фагов, которые являются обычными обитателями разнообразных биоценозов , 9 . Частично изучена их морфологическая организация. Среди выделенных вирусы I и РТ представляли собой фаги с длинными несокращающимися отростками, относящимися к I группе, а бактериофаги РТ и РТ имели изометрическую головку и короткий несокращающийся отросток и относились таким образом к I группе 7 . Из различных источников, включающих образцы почвы и культуральные супернатанты и др. Они были охарактеризованы электронномикроскопически, а также определена их специфичность по кругу хозяев. Многие из изолятов имели довольно широкий спектр литического действия и были способны размножаться как на патогенных, так и непатогенных штаммах i.