"Скрытая" ВГВ-инфекция среди доноров крови и лиц, относящихся к группам риска инфицирования

• Автор: Ганина, Анна Александровна
• Шифр специальности: 03.00.06, 14.00.30
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 117 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

Часть 1. Обзор литературы

1.1 Актуальность изучения ВГВинфекции.

1.2 Таксономия и строение ВГВ

1.3 Серологические маркеры инфицирования ВГВ при

классической ВГВинфекции

1.4 Характеристика скрытой ВГВинфекции

1.5 Причины скрытой ВГВинфекции.

1.6. Лабораторная диагностика скрытой ВГВинфекции.

1.7. Эпидемиология скрытой ВГВинфекции

1.8. Передача ВГВ в случае скрытой ВГВинфекции
1.9. Клиника скрытой ВГВинфекции
Часть 2. Глава 1. Разработка иммуноферментной тестсистемы для качественного определения антиНВс ВГВ
2.1.1 Гесты для определения антиНВс ВГВ
2.1.2. Принцип метода
2.1.3. Получение иммуносорбента
2.1.4. Получение конъюгата.
2.1.5. Получение контрольных образцов
2.1.6. Результаты исследования чувствительности и специфической
активности разработанной тестсистемы
Глава 2. Собственные исследования
2.2.1 Материалы и методы.
2.2.2 Распространение скрытой ВГВинфекции среди доноров крови
и групп риска
2.2.2.1. Частота выявления антиНВс среди
исследуемых групп
22. Частота выявления ДНК ВГВ в сыворотках крови, содержащих антиНВе
2.2.2.3. Определение вирусной нагрузки в
антиНВсДНК ВГВположительных образцах.
2.2.2.4. Амплификация Бгена ДНК ВГВ,
выделенной из антиНВсДНКположительных образцов.
2.2.2.5. Результаты исследования антиНВспозитивных образцов сывороток крови от исследуемых групп лиц с помощью высокочувствительных иммуноферментных тестов
2.2.2.6. Алгоритм скрининга доноров крови.
Обсуждение результатов
Список литературы


ВГВинфекции, определяемый при использовании современных методов и диагностических препаратов Очевидно, что рутинный профиль серологических маркеров не всегда надежен для определения статуса ВГВинфекции, что делает актуальным разработку нового алгоритма скрининга доноров для выявления скрытой формы ГВ. Анализ иностранной и отечественной научной литературы свидетельствует, что изучение скрытой ВГВинфекции находится на начальном этапе и является актуальной для медицинской науки и практического здравоохранения. Исходя из этого, нами была выбрана следующая цель эпидемиологическая и вирусологическая характеристика скрытой ВГВинфекции среди доноров крови и лиц, относящихся к группам риска инфицирования. Разработать диагностическую иммуноферментную тсстсистсму ИФТС для выявления суммарных антител к антигену ВГВ антиНВс. Определить распространение скрытой ВГВинфекции среди доноров крови и лиц, относящихся к группам повышенного риска инфицирования ВГВ. Сравнить частоту выявления скрытой ВГВиифекции среди населения регионов России, различающихся по интенсивности циркуляции ВГВ Московская область и Республика Тыва. Охарактеризовать ВГВ, обнаруженный у лиц с наличием скрытой ВГВинфекции наличие мутантных форм вируса, уровень виремии. Разработать алгоритм скрининга доноров крови для выявления скрытой ВГВинфекции. Положения, выносимые на защиту. Разработанная технология изготовления ИФТС для качественного определения антиНВс ВГВ позволяет осуществлять серийный выпуск данного препарата. Частота выявления скрытой ВГВинфекции среди доноров крови зависит от интенсивности циркуляции ВГВ в исследуемом регионе. В низкоэндемичном регионе по заболеваемости ГВ, Москва и Московская область заболеваемость ХГВ в г. В высокоэндемичном, Республики Тыва заболеваемость ХГВ в г. Частота скрытой ВГВинфекции среди исследуемых групп лиц, проживающих на территории г. Москвы и Московской области, составила доноры крови 0, лица, принимающих ПАВ 1, онкологические больные 0, медицинские работники 0,. Кызыл, Республики Тыва 9,4. Основной причиной получения тицтльнг результата при выявлении скрытой ВГВинфекции с помощью коммерческих диагностических препаратов стал низкий уровень репликативной активности ВГВ и низкая концентрация НВбАй менее 0,1 нгмл. Разработанный алгоритм диагностики скрытой ВГВинфекции с использованием теста для выявления антиНВс ВГВ и высокочувствительной от 0 копиймл гнездовой полимеразной цепной реакции ПЦР позволяет выявлять нгтивны формы данной инфекции. Научная новизна. Впервые определена распространенность скрытой ВГВинфекции среди различных групп населения г. Москвы и Московской области и доноров крови Республики Тыва. Показано, что основным фактором, определяющим частоту выявления скрытой ВГВинфекции является интенсивность циркуляции ВГВ в изучаемом регионе. При анализе аминокислотных последовательностей изолитов со скрытой ВГВинфекцией выявлены и охарактеризованы замены в 8гене ДНКВГВ. Установлено, что основной причиной развития скрытой ВГВинфекции на территории низкоэндсмичного региона по заболеваемости ГВ г. Москва и Московская область является низкая концентрация Ы в сыворотке плазме крови исследуемых групп лиц. Практическая значимость. Разработана технология производства ИФТС для качественного определения антиНВс ВГВ. Тестсистема успешно прошла государственные испытания в ФГУН ГИСК им. Л.А. Тарасевича. На базе ЗАО ЭКОлаб в гг. ИФТС ИФА антиНВс. Разработан алгоритм выявления скрытой ВГВинфекции для профилактики посттрансфузионного ГВ. Внедрение результатов работы. Утвержденный проект производства ИФТС для определения антиНВс ИФАантиНВс ТУ 2 передан в серийный выпуск данного диагностического препарата. Алгоритм для обнаружения скрытой ВГВинфекции используется в практической работе лаборатории вирусных гепатитов ГУ ИГГОЭ им. М.П. Чумакова и кафедры вирусологии и микробиологии Российского Университета Дружбы Народов. Апробация работы.