Расщепление дезамидированных белков протеиназами тканей

• Автор: Кизильштейн, Александр Леонидович
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1983
• Место защиты: Ростов-на-Дону
• Количество страниц: 180 c. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ
Введение

Глава I. Обзор литературы

1.1. Внутриклеточное расщепление белка и его регуляция.

1.2. Функциональное значение амидных групп в белках Глава П. Экспериментальная часть

2.1. Материалы и методы исследования

2.1.1. Материалы исследования . .

2.1.2. Методы исследования.

Глава Ш. Результаты исследований

3.1. Неферментативное дезамидирование индивидуальных белков

3.1.1. Неферментативное дезамидирование препаратов сывороточного альбумина и гаммаглобулина в условиях, моделирующих физиологические 6,57,0, С
3.1.2. Дезамидирование гемоглобина в процессе его старения .
3.2. Атакуемость дезамидированных белков протеолитическими ферментами .
3.2.1. Изучение атакуемости нативного и дезамидированного препаратов сывороточного альбумина протеиназами тканей при разных .
3.2.2. Изучение атакуемости препарата гаммаглобулина в зависимости от степени его дезамидирования.
3.2.3. Изучение атакуемости нативного и дезамидированного препарата сывороточного альбумина протеиназами субклеточных фракций тканей семенников и мозга
3.2.4. Изучение атакуемости нативного и дезамидированного препаратов сывороточного альбумина интактными и разрушенными лизосомами семенников крыс
3.2.5. Изучение атакуемости человеческого гемоглобина, выделенного из молодых, зрелых и старых эритроцитов крови, протеиназами тканей и субклеточных фракций
3.2.6. Изучение изменения селективной активности протеиназ ткани печени при старении.III
3.3. Изучение атакуемости дезамидированных препаратов белка в опытах i viv
Глава 1У. Обсуждение результатов.
Выводы.
Литература


Так, при нейтральном мМ АТФ значительно стабилизировал мембрану лизосом, в то время как при кислом вызывал ее разрушение , . Проницаемость лизосомальной мембраны изменяется при ряде патологических состояний организма. Так, концентрация катепсина Д увеличивается после частичной гепаэктомии инициируя, повидимому, репарационные процессы в результате действия специфических белковых факторов, выделенных из сыворотки ОПЫТНЫХ животных , ii, . Таким образом, возможно, контролируется расщепление соединительнотканных компонентов, осуществляемое вне клетки , . Одной из важнейших функций лизосомальной мембраны является изоляция от цитоплазмы большого набора до гидролитических ферментов, находящихся в матриксе и адаптированных к расщеплению большинства биополимеров клетки Покровский, Тутельян, . Неконтролируемый выход лизосомальных ферментов в клетку, вызванный разрушением лизосомальной мембраны в условиях действия некоторых экстремальных факторов среды, таких, как гипероксия Кричевская и др. Домакина, Шугалей, , изменение , ii, , длительное голодание Покровский, Крыстев, и т. нике, чем в цитозоле. Так, для лизосом макрофагов брюшины мышей оно составляет 4,7 , , . Вследствие этого большинство лизосомальных ферментов имеют кислый оптимум активности Баррет, Хит, . Предполагают, что кислая среда частично денатурирует молекулу белкасубстрата и делает ее более доступной для протеолитического расщепления , . Протеолитические ферменты лизосом представлены широким спектром экзо и эндопептидаз, различающихся по механизму каталитического действия и субстратной специфичности. Сериновые протеиназы акрозин, лизосомальная эластаза и катепсин с щелочным и нейтральным оптимумом , тлеются только в лизосомах клеток определенного типа. Наиболее широко в лизосомах большинства типов клеток высших и низших организмов распространены цистеиновые протеиназы катепсины В, Н, , и карбоксипротеиназы катепсины Д и Е, и экзопептидазы карбоксипептидазы А и С Баррет, Хит, . Современные данные об этих ферментах описаны в обзорах Баррет, Хит, I0i . , Колодзейская, Пилявская, . До сих пор неизвестны точные механизмы, регулирующие активность лизосомальных протеиназ и причины их устойчивости к аутолитическим процессам. Предполагается, что лизосомальные ферменты синтезируются в виде неактивных предшественников проферментов и содержат аминотерминальную сигнальную последовательность, удаляемую в присутствии мембран эндоплазматического ретикулума . Определенную роль в процессах активации лизосомальных ферментов могут играть их углеводные компоненты. Так, отщепление ПАНК при . , i, . Косвенным подтверздением данного предположения является то, что практически все из изученных лизосомальных катепсинов являются гликопротеидаыи Баррет, Хит, I. В регуляции активности протеолитических ферментов, возможно, принимают участие и некоторые полярные липиды, например, сульфолипиды лизосомальных мембран i . Катепсин Д из селезенки быка может существовать в форме неактивного предшественника ферментингибитор, активная форма которого появляется после кислотной обработки i, , . Наличие множественных форм кателсина Д из мозга человека . Н, В и из селезенки быка , i, , возможно, позволяет осуществлять регуляцию на уровне генома клетки. Показано, что активность катепсина увеличивается при добавлении АТФ, редуцированного глутатиона. Ко А, гликофорина i . Добавление в инкубационную среду некоторых аминокислот аспарагина, глутамина, лейцина, изолейцина или валина неспецифически подавляет деградацию белков печени лизосомальными протеиназами i, i, i, i, . Широкое разнообразие протеолитических ферментов в лизосомах позволяет предположить наличие у каждого из них специфической функции в организме, одной из которых является селективное расщепление поврежденных в ходе функционирования или аномальных белков.