Сравнительно-биохимическое исследование холинэстераз пресноводных костистых рыб бассейна Рыбинского водохранилища

• Автор: Чуйко, Григорий Михайлович
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Борок
• Количество страниц: 305 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ХОЛИНЭСТЕРАЗ ХЭ

1.1.1. История открытия и этапы изучения.

1.1.2. Типы, их свойства, функции, локализация и идентификация.

1.1.3. Молекулярное строение и структура.

1.2. ХОЛИНЭСТЕРАЗЫ РЫБ.

1.2.1. Типы, локализация и свойства

1.2.2. Участие ХЭ в физиологических процессах
1.2.3. Действие естественных экологических факторов и физиологических
состояний
1.2.4. Действие ФОС и КС на ХЭ рыб в условиях i viv
1.2.5. Влияние соединений, не обладающих прямым антихолинэстеразным
действием
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
2.1. Исследуемые рыбы
2.2. Исследуемые химические соединения.
2.3. Методы исследования.
2.4. Культивирование экспериментальных рыб.
2.5. Постановка экспериментов
2.6. Статистическая обработка.
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Исследование скорости гидролиза ацетил и бутирилтиохолина в тканях
3.2. Электрофоретическое разделение и идентификация типов ХЭ в
сыворотке крови рыб.
3.3. Чувствительность ХЭ рыб к ингибирующему действию ДДВФ i vi.
3.4. ДДВФ как избирательный ингибитор для раздельного определения
активности АХЭ и БуХЭ рыб
3.5. Соотношение доли БуХЭ и АХЭ в общей активности ХЭ плазмы крови
рыб из сем ii
3.6. Основные кинетические свойства АХЭ и БуХЭ рыб сравнение с
типичными ХЭ.
3.7. Активность АХЭ и БуХЭ в мозге и плазме пресноводных костистых
рыб межвидовые и мсжссмсйствснныс различия
3.8. Изменение активности АХЭ в мозге окуня при остром стрессе,
индуцированном введением адреналина.
3.9. Сезонная динамика активности АХЭ и БуХЭ в тканях окуня и
плотвы.
3 Роль ингибирования АХЭ мозга в нарушении пищевого поведения леща
при действии ДДВФ i vi.
3. Изменения АХЭ мозга окуня Регса viii . при остром действии
хлорофоса i viv
3 Изменение активности АХЭ в мозге карпа и динамика се вос
становления при действии i viv различных концентраций карбофоса
3 Динамика изменения активности ХЭ в тканях плотвы приодноразовом
сублетальном действии ДДВФ i viv.
3. Роль ХЭ и других причин в межвидовой избирательности летального
действия ФОС на рыб
31. Сравнительная устойчивость рыб к действию хлорофоса и ДДВФ в
острых опытах
32. Чувствительность АХЭ рыб к ингибированию ДДВФ i vi.
33. Скорость поступления ДДВФ в организм карпа и окуня.
34. Интенсивность метаболического разрушения ДДВФ в печени окуня и
карпа в условиях i vi
35. Роль БуХЭ плазмы в устойчивости леща к летальному действию
хлорофоса и ДДВФ.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ


В настоящее время принято считать, что в нервной ткани и, в первую очередь, в мозге костистых рыб присутствует практически только АХЭ, где по сравнению с другими органами и тканями ее активность наивысшая , , , Брик, i, , , , , , v , , i . . , iii и др. При этом среди позвоночных костистые рыбы обладают самой высокой активностью АХЭ мозга i, Лсйбсон, Вержбинская, Вержбинская, Лсйбсон, . В зависимости от используемого метода, условий определения, а также физиологического статуса организма, активность АХЭ гомогенатов мозга костистых рыб составляет от до мкмоль АХ г тканич. Значительные межвидовые различия не были выявлены, т. i, ii, v, , , , , . i . , . , i, , , Михкиева, Богдан, Хайдарлиу и др. Чуйко, Козловская, Козловская и др. Однако проведенные нами специальные сравнительные межвидовые исследования АХЭ в мозге видов из 4 семейств пресноводных костистых рыб выявили существование не только межвидовых, но и межсемейственных достоверных различий i, i , . Считается, что АХЭ рыб по кинетическим свойствам, распределению по тканям и внутриклеточной локализации близка к аналогичному ферменту млекопитающих и может быть отнесена к типичной АХЭ. С наибольшей скоростью она гидролизует АХ МеХ и ПрХ более медленно БуХ практически не разрушает. Кривая зависимости ее активности от концентрации субстрата характерной колоколообразной формыу. Оптимальная концентрация АХ при температуре С лежит в диапазоне от 3 до 2 М, значение константы Михаэлиса Кт для этого субстрата составляет 1. М и сходно со значением Кт для типичной АХЭ, а наибольшая активность проявляется при 7. Активность каталитического центра АХЭ карпа равна мольмин, что сближает ее с АХЭ эритроцитов быка Брик, . Имеющиеся на сегодняшний день данные по основным кинетическим характеристикам гидролиза субстратов, полученные разными авторами и на разных видах, обобщены в табл. Анализ данных таблицы показывает, что результаты разных авторов отличаются значительным разбросом. Так при гидролизе АХ значения константы Михаэлиса Кт варьируют от 0. М , , , iii, . от 1 до . М , . Особенно значительные различия наблюдаются в скорости гидролиза МеХ и ПрХ относительно АХ Брик, i . . Связаны ли эти различия с видовыми особенностями, разницей в использованных методах или другими причинами неизвестно. Кроме того, практически отсутствуют работы, где одновременно исследуются кинетические параметры АХЭ мозга рыб и одной из типичных АХЭ при гидролизе всех четырех основных холиновых субстратов, используемых для идентификации ХЭ. Абсолютно нет исследований сравнительного плана, выполненных на разные видах рыб одновременно. В большинстве исследований показано, что АХЭ мозга костистых рыб угнетается эзерином КС и большинством ФОС в концентрации М. Например, значения 0 для АХЭ канального сомика I при действии эзерина, параоксона, ДЦВФ, хлорпирифос оксона и ДФФ ФОС в концентрациях 3x7,4x7, 6x7 и 6 М, а для лосося Кларка и радужной форели 5x7,4x6, 8x7, соответственно. Линь i vi Пресная 7. Карп i i 7. Карась i 7 . Плотва i i 7. Ципринодон i vi Солоновата Лосось Кларка i Пресная . Форель радужная ii 7. Золотистый шайнер Солоновата Голубожаберник i i Пресная . Солнечник i i Солоновата 7. Окунь viii Пресная 7. 7. Каменный окунь i Соленая 7. Канальный сомик I Пресная 7. Мешкожаберный сомик Пресная 7. Угорь электрический i2 7. ii Солоновата 7. ii 7.